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《湖北大学》 2017年
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酸浆体内降糖活性及其化学成分的研究

张嫱  
【摘要】:酸浆(Physalis alkekengi)是药食同源的传统中药,主要富含黄酮类、酚酸类、苦味素类多种化学成分,具有利尿、抗氧化、影响糖脂代谢等作用。糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是严重危害人类健康的全球性疾病,临床治疗药物主要为化学药物,毒副作用明显,因而找寻高效、低毒的新型药物是预防和治疗DM的首要任务。本论文在体外活性筛选的指导下,探索酸浆活性提取物乙酸乙酯部位对DM的预防效果;并通过建立DM模型鼠,研究酸浆乙酸乙酯部位降糖效果及其具体作用机制;同时运用液相色谱-高分辨质谱-固相萃取-核磁共振波谱(HPLC-HRMS-SPE-NMR)技术鉴定酸浆乙酸乙酯部位具体化学成分,阐明酸浆降糖活性的物质基础。本研究主要包含以下五个方面:1.利用75%酒精分别回流提取酸浆植株和果实,依次用石油醚(petroleum ether,PE)和乙酸乙酯(ethyl acetate,EA)萃取,得植株石油醚相(PE of plant)、植株乙酸乙酯相(EA of plant,EAP)、植株水相(aqueous of plant)、果实石油醚相(PE of fruit)、果实乙酸乙酯相(EA of fruit,EAF)和果实水相(aqueous of fruit)六个部位。2.酸浆乙酸乙酯部位对体外葡萄糖吸收的影响。利用荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-[N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino]-2-deoxy-D-glucose,2-NBDG)作为光学探针评估酸浆EAP、EAF部位影响HepG2细胞摄取葡萄糖的能力。结果表明酸浆植株部位能有效提升细胞摄取葡萄糖的能力,从而加强外周组织对葡萄糖的吸收、利用。3.酸浆乙酸乙酯部位对DM的预防作用研究。通过高糖高脂饮食(HFD)诱导产生食源性肥胖大鼠,分别给予300mg/(kg·d)酸浆EAP、EAF部位,连续灌胃4周,检测酸浆EAP、EAF部位对空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、糖化血清蛋白(GSP)、空腹胰岛素(FINS)、口服糖耐量实验(OGTT)的影响。结果表明酸浆能有效缓和长期高热量饮食所引发的高血糖、高血脂、胰岛素分泌相对不足等症状,对DM有较好的预防效果。4.酸浆乙酸乙酯部位对DM的治疗作用研究。通过HFD结合腹腔注射低剂量链脲佐菌素(STZ)的诱导,建立T2DM大鼠模型。阳性对照药罗格列酮(Rosiglitazone,ROS)的剂量为4mg/(kg·d),酸浆低剂量组LEAP/LEAF(300mg/(kg·d))、高剂量组HEAP/HEAF(600mg/(kg·d))分别灌胃酸浆EAP、EAF部位,连续灌胃4周,分别检测酸浆EAP、EAF部位对FBG、TC、TG、GSP、FINS、OGTT的影响。结果表明酸浆能在一定程度上缓解高血糖、高血脂的现象,并且减少GSP的产生,促进FINS分泌,改善胰岛素抵抗。其中HEAP组效果最佳,其作用效果与罗格列酮相似,根据以上结果推测酸浆植株部分可能通过改善糖脂代谢进而预防DM并发症的发生;通过抑制糖基化、降低自由基的产生、保护胰岛β细胞和增强胰岛素敏感性的方式发挥降糖活性。5.运用HPLC-HRMS-SPE-NMR联用技术鉴定酸浆EAP部位的化学成分,共鉴定出45种化学成分,包含10个黄酮类、24个酸浆苦素类以及7个酚酸类化合物。其中,从酸浆中首次发现10个化合物,包括3-Caffeoylquinic acid,Vitexin,3,4-Dicaffeoylquinic acid,Apigenin 7-O-glucoside,25-Hydroxy-physalin F,Physalin G等。综上所述,本论文主要研究了酸浆植物的体内降糖活性及化学成分,并结合其作用效果及化学成分推测可能的作用机制,阐明了酸浆降糖活性的物质基础,为其开发成降糖靶向药物或膳食补充剂提供科学依据。
【学位授予单位】:湖北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R284

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