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《湖北大学》 2017年
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臭梧桐叶的抗炎活性及化学成分研究

田珂  
【摘要】:臭梧桐,又名海州常山(Clerodendron trichotomum Thunb.),为马鞭草科大青属植物。臭梧桐在民间应用广泛且历史悠久,有着极高的药用价值和应用前景。主要以其嫩茎和叶入药,具有祛除风湿,降血压等功效,用于治疗风湿性关节炎,高血压病,痢疾,疟疾等;其叶外用还可以治疗手癣,湿疹,痔疮等。近年来,国内外学者研究证实臭梧桐叶醇提物具有明确的抗炎活性,但其抗炎活性基础研究未见报道。为进一步确定臭梧桐的抗炎活性物质基础及寻找新颖的天然抗炎活性成分,本课题对臭梧桐干燥叶90%乙醇提取物的不同极性萃取部位进行了抗炎活性筛选,并对抗炎活性部位的化学成分进行了系统的研究。臭梧桐干燥叶经90%的乙醇室温浸泡提取,得臭梧桐叶醇提物,水混悬,再用不同极性溶剂分级萃取,得到臭梧桐石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位浸膏。利用MTT法测定臭梧桐叶不同极性部位浸膏对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7的细胞毒作用,采用脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7作为细胞炎症模型,以一氧化氮(NO)和白细胞介素1β(IL-1β)的释放量为检测指标,吲哚美辛(100μg/mL)为阳性对照,对臭梧桐叶不同极性部位进行了抗炎活性筛选。实验结果表明:石油醚部位、正丁醇部位和水部位在浓度不超过100μg/mL时,无明显的细胞毒作用;乙酸乙酯部位在浓度为100μg/mL时对RAW 264.7有明显细胞毒作用,细胞存活率仅为55.3%。石油醚部位和乙酸乙酯部位能显著地抑制LPS诱导后的RAW 264.7细胞NO和IL-1β的释放量,且呈剂量依赖性。其中给药浓度为50μg/mL时,石油醚部位对NO释放量的抑制率为46%(~(**)P0.01),IL-1β释放量的抑制率42%(~(**)P0.01);乙酸乙酯部位对NO释放量抑制率为84%(~(**)P0.01),IL-1β释放量的抑制率65%(~(**)P0.01)。因此石油醚部位和乙酸乙酯部位为臭梧桐叶的主要抗炎活性部位,且乙酸乙酯部位抗炎活性强于石油醚部位。采用反复硅胶柱色谱法、MPLC、半制备HPLC、ODS、Sephadex LH20等多种色谱分离方法对臭梧桐叶的石油醚部位和乙酸乙酯部位进行系统的化学成分研究,并运用薄层色谱法、EI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR等波谱手段对分离到的化合物进行结构鉴定。从臭梧桐叶的石油醚部位和乙酸乙酯部位共分离鉴定得到9个化合物,分别是22-脱氢赪桐甾醇(1),十六烷酸(2),正十七醇(3),5,7,4'-三羟基黄酮(4),5,7,3',4'-四羟基黄酮(5),正三十五烷(6),3'-甲氧基-4',5,7-三羟基黄酮(7),22-脱氢赪桐甾醇-3-O-β-D-半乳吡喃糖苷(8),(2S,3S,4R,E)-2-[(2'R)-2'-羟基二十八烷酰氨基]-23-二十六烷-1,3,4-三醇(9)。其中化合物3,5,6,7,8,9均为首次从该植物中分离到,化合物3,9为首次从大青属中分离到。综上所述,本文探讨了臭梧桐叶的不同极性部位的抗炎活性,并对抗炎活性部位进行了化学成分研究,为进一步研究臭梧桐的抗炎活性打下坚实的基础。
【学位授予单位】:湖北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R284

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