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《中南民族大学》 2015年
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水稻胞质不育相关蛋白ORF216的表达与潜在互作蛋白的验证

宋丹妮  
【摘要】:植物细胞质雄性不育(CMS)是指植物不能产生正常花粉而雌性生殖器官正常,其遗传符合母性遗传的现象。本实验室前期在红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)水稻中发现了一个新的胞质不育相关基因orf216,并获得了与该基因编码的蛋白发生潜在互作的蛋白。本实验分别构建胞质不育基因orfH79、潜在互作蛋白基因OsRPLx和OsATP5x的表达载体,诱导蛋白表达并通过蛋白互作实验研究它们与胞质不育蛋白ORF216的关系;培育不同水稻品种黄化苗,分离线粒体后提取相关蛋白,通过western blot实验检测胞质不育基因orf216的表达。主要取得了如下结果。1、对水稻胞质不育基因orf216和orfH79表达产物进行蛋白互作研究。分别诱导表达2个蛋白,通过western Blot分析,结果表明这2个不育基因产物没有发生直接相互作用。2、提取YTA、YTB、HL-2和9311黄化苗线粒体蛋白,western Blot分析发现,在YTA和HL-2黄化苗中ORF216有较高的的表达,YTB中没有。但是在不含orf216基因的9311中也检出了微弱的杂交信号。3、克隆OsRPLx和OsATP5x并诱导表达,然后分别与ORF216蛋白进行His pull-down实验并进行western Blot分析,结果证明OsRPLx与ORF216这两个蛋白可发生直接相互作用,而OsATP5x与ORF216两个蛋白之间没有直接相互作用。
【学位授予单位】:中南民族大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S511;Q946.1

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1 宋丹妮;水稻胞质不育相关蛋白ORF216的表达与潜在互作蛋白的验证[D];中南民族大学;2015年
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