收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

高抗性耐贮转基因猕猴桃的选育及适应性研究

苑平  
【摘要】:红阳猕猴桃原产于四川省苍溪县,因其口感好,肉质细腻,具有极高的开发利用价值。但红阳猕猴桃因为抗病性差,果实贮藏期太短等原因,常给果农带来巨大的经济损失,不利于推广种植。为建立猕猴桃基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,本研究以海沃德猕猴桃为实验材料,克隆得到猕猴桃ACO基因,通过反义RNA技术转化红阳猕猴桃,抑制其乙烯的产生,从而达到延长果实贮藏期的目的,另外选择高抗性的砧木对转基因苗进行嫁接,以解决抗病性差的缺点,从而选育出一个耐贮且高抗病性的红阳猕猴桃新品种。 猕猴桃叶片中由于酚类和糖类物类含量过多,常规的方法很难从中提取出猕猴桃基因组DNA和总RNA。本实验通过在提取缓冲液中添加一定比例的PVP-40和β-巯基乙醇,有效的防止了酚类物质的氧化和多糖类物质的干扰。成功从猕猴桃叶片中的得到了高质量的基因组DNA和总RNA,完全能够满足PCR鉴定和Southern分子杂交等分子生物学实验的要求。 从海沃德猕猴桃叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA,并以cDNA为模板,用特异性引物进行PCR扩增,得到大小长约1Kb的猕猴桃ACO基因的全长片段。通过中间载体pJIT163和表达载体pCAMBJA1300成功构建了该基因的反义表达载体。 以红阳猕猴桃带芽茎段和叶片为外植体,研究其愈伤诱导、分化出芽、生根及练苗等过程,完善了其组培体系,并建立了一个高效的农杆菌介导的红阳猕猴桃遗传转化体系,为通过分子生物学的手段来研究和改良红阳猕猴桃提供了一个很好的技术平台。共获得47株潮霉素抗性植株,随机挑选其中14株经跨35S启动子,和跨CaMV终止子的PCR鉴定,其中7株在两次检测中都扩增得到了目的条带,初步统计得出阳性植株占50%左右。实验证明本研究在世界上首次将猕猴桃的ACO基因的反义表达载体成功转化中华猕猴桃,并获得了再生植株。 为使得到的转基因阳性植株提前挂果,而且增加红阳猕猴桃的抗病性。本实验选用高抗病性的对萼猕猴桃(Actinidiavalvata)为砧木,进行了试管苗的嫁接。共嫁接20株阳性植株,存活19株,嫁接成活率在95%以上,结果非常理想。预计明年可以挂果,果实的贮藏时间和嫁接苗的抗病性还有待进一步观察和研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 杜毅刚;关于引种红阳猕猴桃的几点建议[J];柑桔与亚热带果树信息;2001年05期
2 吕岩;红阳猕猴桃主要特点[J];西北园艺;2001年03期
3 杨亚琴,李民和,周行;红阳猕猴桃引种栽培试验初报[J];贵州林业科技;2003年02期
4 董官勇,苟斌,李明章;红阳猕猴桃高产栽培技术[J];落叶果树;2003年05期
5 余中树;栽植红阳猕猴桃的关键技术[J];落叶果树;2003年04期
6 余中树;红阳猕猴桃引种栽培应注意的几个问题[J];落叶果树;2002年02期
7 余中树;红阳猕猴桃早结高效栽培关键技术[J];柑桔与亚热带果树信息;2002年12期
8 姚春潮,刘旭峰,龙周侠;红阳猕猴桃在陕西的试栽表现[J];北方果树;2002年05期
9 文国琴,何震;红阳猕猴桃茎段愈伤组织诱导成苗技术[J];福建林业科技;2004年04期
10 杜毅刚 ,蒲仕华 ,尹茂斌;红阳猕猴桃夏季修剪技术要点[J];柑桔与亚热带果树信息;2001年10期
11 余中树;红阳猕猴桃栽植的关键环节[J];中国南方果树;2003年06期
12 梁岩;;推进猕猴桃产业发展促进农民增收[J];四川农业科技;2007年07期
13 邓凯邦;;红阳猕猴桃新建果园栽培技术[J];四川农业科技;2010年04期
14 冯莎莎;刘畅;姚太梅;;红阳猕猴桃苗木培育技术[J];北方园艺;2010年21期
15 刘昌龙;王文洪;;广西乐业红阳猕猴桃高位嫁接适应性观察[J];广西热带农业;2006年06期
16 张乃华;万崇东;何才智;刘兴凡;;红阳猕猴桃引种表现及栽培技术要点[J];中国南方果树;2008年01期
17 周岳友;谢义福;;浙西猕猴桃栽培[J];中国林业;2009年13期
18 吕岩;郭勇社;;红阳猕猴桃生产中存在的几个问题[J];西北园艺(果树);2007年02期
19 易忠应;;资源县大力发展红阳猕猴桃产业[J];中国果业信息;2010年06期
20 何士松;红阳猕猴桃单主干上架技术[J];中国果树;2002年03期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 王瑞玲;秦文;丁捷;李莹露;;两种病原菌对贮藏期红阳猕猴桃品质的影响[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
2 白新鹏;郭志勇;刘小琴;裘爱泳;;分光光度法测定猕猴桃根提取物中总三萜类成分的研究[A];2009年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会论文集[C];2009年
3 余中树;;红阳猕猴桃不良表现及应对措施[A];中国园艺学会猕猴桃分会第四届研讨会论文摘要集[C];2010年
4 余中树;李军德;;猕猴桃新品种—红阳猕猴桃果实套袋实验[A];中国园艺学会猕猴桃分会第四届研讨会论文摘要集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 徐一新;中药藤梨根和猫人参活性成分研究[D];第二军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 苑平;高抗性耐贮转基因猕猴桃的选育及适应性研究[D];吉首大学;2012年
2 孙玉丹;猕猴桃糖蛋白与多酚的相互作用研究[D];河南工业大学;2012年
3 黄涛;大棚栽培条件下红阳猕猴桃生长发育及果实品质的研究[D];四川农业大学;2012年
4 王瑞玲;红阳猕猴桃采后病害生理及臭氧保鲜技术研究[D];四川农业大学;2010年
5 王岁红;猕猴桃根活性成分的提取、分离纯化及其保肝功能评价的研究[D];中南林业科技大学;2008年
6 宋美晶;不同品种猕猴桃的成分研究[D];辽宁师范大学;2012年
7 覃燕东;红阳猕猴桃果实生长发育的解剖观察[D];四川农业大学;2012年
8 陈晓晓;中华猕猴桃根化学成分研究[D];济南大学;2011年
9 杨刚;红阳猕猴桃果实色素变化规律和影响因素的研究[D];四川农业大学;2011年
10 任艳会;果实特征和后熟处理对红阳猕猴桃内在品质的影响[D];四川农业大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 林翩;早熟优质的红阳猕猴桃[N];福建科技报;2004年
2 本石巫果 岳光勤;马边红阳猕猴桃受青睐[N];乐山日报;2009年
3 特约记者 黄晓军 通讯员 麻红军;凤凰红阳猕猴桃助农增收近千万元[N];团结报;2010年
4 本报记者 杨娜;红阳猕猴桃,“照亮”万重山[N];中国妇女报;2010年
5 周至县哑柏镇昌西猕猴桃基地农技师 吕岩;栽培红阳猕猴桃应注意的问题[N];陕西科技报;2003年
6 周至县植保植检站 冯华;猕猴桃根病的发生与防治[N];陕西科技报;2004年
7 左富焰 郑茹 本报记者 石元清;沐川 建设万亩猕猴桃产业带[N];乐山日报;2009年
8 李俊杰;猕猴桃食疗便方[N];民族医药报;2003年
9 记者 何方;黔江区协议引资135亿元[N];重庆日报;2009年
10 张成;如何生产出口猕猴桃[N];中华合作时报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978