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《湖南大学》 2011年
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多能干细胞中稳定表达转录因子FoxA2的细胞特性研究

刘义  
【摘要】:转录因子FoxA2是胚胎发育过程中神经产生的重要调节因子。研究发现维甲酸诱导的P19多能性干细胞定向神经分化过程中出现FoxA2的表达。为了进一步探讨FoxA2在干细胞向神经分化过程中的作用,我们建立了可以稳定表达GFP-FoxA2融合蛋白的P19细胞株-P19-GFP-rFoxA2细胞株。GFP-FoxA2融合蛋白的稳定表达导致P19-GFP-rFoxA2细胞中多能性相关基因Nanog和Sox2的表达降低和碱性磷酸酶的活性降低,但不影响多能性基因Oct4的表达;同时,该细胞中神经干细胞标志物Nestin的表达以及Prominin-1阳性细胞数目的增多,说明FoxA2的稳定表达促使P19细胞部分丧失干细胞特征并导致神经干细胞特性的出现。另外,P19-GFP-rFoxA2细胞中出现神经细胞分化相关基因NeuroD1的表达。我们证实了FoxA2可以结合NeuroD1的启动子调节其活性,说明NeuroD1是FoxA2的下游靶基因。进一步研究发现:RA诱导P19-GFP-rFoxA2细胞神经分化过程中NeuroD1的表达量升高;P19-GFP-rFoxA2细胞在没有RA悬浮培养的过程中同样发现NeuroD1的表达升高,表明FoxA2可以通过调节NeuroD1促进多能性细胞向神经方向分化。我们的结果表明P19-GFP-FoxA2 cell具有了部分神经细胞特性,FoxA2在促进P19多能性干细胞神经分化过程中发挥着重要的作用。
【学位授予单位】:湖南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R329

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【共引文献】
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