收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

T细胞表面受体信号转导及辅助受体功能的研究

杨丽芬  
【摘要】:第一部分PKC-alpha对TCR信号转导途径下Akt的调节作用的研究 Akt,又称为蛋白激酶B (protein kinase B, PKB),是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于蛋白激酶AGC家族。它含有三个同源性很高的成员:Aktl/PKBα, Akt2/PKBβ和Akt3/PKBΥ。Akt在从原始的多细胞动物到人类中保守存在,在一系列包括细胞的存活/调亡、增殖、分化、糖代谢、生长、转录、细胞周期的进程、细胞迁移等生物学活动中发挥着非常重要的作用。 自从它作为PI3K (phosphoinositide 3-kinase)下游靶分子的这一重要身份被发现以来,过去的十几年里人们对它进行了深入的研究。人们对PI3K/Akt信号通路的研究最初集中在其在肿瘤的发生中的作用上,且为数众多的可调节这一通路上的成员的化学物质已被开发为抗肿瘤药物。近年来,人们对PI3K/Akt信号通路在免疫学领域尤其是在T细胞中的作用有了新的认识。研究发现,PI3K/Akt信号通路可被T细胞表面受体(TCR)和/或协同刺激分子CD28的刺激信号所活化;PI3K/Akt信号通路对T细胞的发育及胸腺细胞的存活意义重大;PI3K/Akt信号通路参与调节T细胞的迁移(主要是指组织间的分布)。调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)是近年来的一个研究热点,越来越多的研究表明,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路能促进诱导性调节性T细胞(inducible Tregs)的产生。 然而,到目前为止,T细胞中TCR刺激诱导Akt活化的机制并不清楚。Akt的分子结构高度保守,包括:1)N-端调节结构域;2)中心激酶区,含有一个苏氨酸磷酸化位点(Thr308),可以被称为PDK1的激酶磷酸化;3)羧基末端调节区域,含有一个疏水性的基序(hydrophobic motif,HM),可以被称作PDK2的激酶在丝氨酸位点(Ser473)磷酸化。Akt在这两个位点均发生磷酸化时,该酶的活性才达到最大。目前的研究中,PDK1已得到一致认同,然而长期以来PDK2却颇具争议,MK2 (mitogen-activated protein (MAP) kinase-activated protein kinase-2), ILK (integrin-linked kinase), p38 MAP kinase, PKC-a (protein kinase C-α), PKC-β, NEK6 (the NIMA-related kinase-6), mTORC2 (the mammalian target of rapamycin complex2), DNK-PK (the double-stranded DNA-dependent protein kinase)等都被认为是PDK2的候选分子。目前比较公认的观点是调节Akt Ser473磷酸化的激酶可能呈细胞、刺激信号和底物特异性。 研究证实,PKC-β在B细胞中调节着Akt在Ser473而不是Thr308的磷酸化。但PKC在T细胞中对Akt在Ser473的磷酸化调节尚无报道。 采用生物化学及遗传学的方法,本课题首先利用基因敲除小鼠,证实在T细胞中的主要PKC亚型PKCθ对TCR信号引起的Akt磷酸化无调节作用。用非特异性及特异性抑制剂抑制经典类PKC (conventional PKC)的亚型发现,TCR信号引起的Akt Ser473磷酸化比对照组明显降低。体外酶学实验直接证明T细胞中这类亚型的PKC-α而不是PKC-β调节着Akt在Ser473磷酸化,且这种调节呈TCR信号依赖性。而用PKC-α敲除小鼠的T细胞验证了这一结果,并进一步证实PKC-α的缺失引起的Akt在Ser473磷酸化降低导致了Akt下游分子p70S6K和FOXO1/3a磷酸化的降低,而对另一下游分子GSK3的磷酸化并无影响。最后,用体外酶学实验证实PKC-α对Akt的调控不是通过mTOR实现的。因此,本研究首次证实PKC-α在T细胞中TCR信号途径下扮演着PDK2的角色 第二部分CTLA-4-B7对Th17分化的抑制作用的研究 Th17细胞是一种能分泌白介素17(IL-17)的帮助性细胞亚群,在一些自身免疫性疾病中起着重要的致病作用作用。研究显示CD28-B7的相互作用对Th17细胞的体外分化是必需的,但是CTLA-4-B7的相互作用对Th17细胞分化的调控作用还不清楚。在本研究中我们发现用hCTLA-4Ig或anti-CTLA-4抗体阻断CTLA-4与B7之间的相互作用可以增强IL-17细胞因子的生成,增强体内和体外Th17细胞的分化。另外,在CD28基因敲除小鼠体内阻断CTLA-4和B7之间的相互作用能增强其对实验性自身免疫性心肌炎(EAM)的敏感性,而这种作用是由Th17的反应增强所介导的。总之,我们首次证明了CTLA-4-B7的相互作用能抑制Th17细胞的分化,从而抑制了Th17介导的自身免疫。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 许韩师,杨岫岩,梁柳琴,李志坚,阳晓,叶玉津,李幼姬;慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠肾组织Akt信号通路蛋白表达及泼尼松的调控作用[J];中国病理生理杂志;2003年10期
2 赵晓辉;彭毅志;王元元;;缺氧复氧心肌细胞中HSP90对AKT表达的调控作用[J];现代生物医学进展;2007年04期
3 张春虎;胡随瑜;曹美群;林源;李云辉;;丹皮酚对肝癌MHCC97-H细胞PTEN、AKT表达的影响[J];现代生物医学进展;2007年08期
4 王福青;张志国;;红花黄色素对大鼠缺血再灌注损伤心肌Akt、eNOS的影响[J];中国现代医药杂志;2008年05期
5 高嵩丹;李宏伟;李爱玲;修瑞娟;;Akt介导过氧化氢促新生大鼠心肌细胞肥大[J];基础医学与临床;2008年02期
6 傅燕萍;丁娟;王伟;王诚;刘喜波;孙丽萍;;Akt和PTEN在恶性黑色素瘤中的表达及其临床意义[J];浙江实用医学;2009年01期
7 宋丽;范理宏;;AKT与端粒酶在非小细胞肺癌组织中表达水平及意义[J];临床肺科杂志;2009年03期
8 赵阳;吕仁荣;霍然;高峰;;PTEN和磷酸化Akt在婴幼儿血管瘤中的表达及意义[J];山东大学学报(医学版);2009年05期
9 王秀玲;益莉娜;丁佩芬;邹珏;洪月琳;郑唯强;;乳腺癌Akt的表达及其临床意义[J];临床与实验病理学杂志;2009年03期
10 张琳;李东野;夏勇;张卓琦;潘德峰;朱红;杨煜;;脂质体转染Akt基因对心肌细胞缺血-再灌注的影响[J];中国微循环;2009年04期
11 任秀聪;李彦敏;;芹菜素抑制蛋白激酶B活性诱导人卵巢癌细胞凋亡的机制研究[J];现代中西医结合杂志;2010年14期
12 陈玲;吕湛;;高糖通过Akt信号通路诱导内皮细胞衰老[J];川北医学院学报;2010年03期
13 陈青植;余跃伟;夏春;张兵;;Akt和Bad信号分子在人膝骨性关节炎中的变化[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年33期
14 晏淼;朱正秋;;Akt/mTOR信号通路与恶性肿瘤[J];白求恩军医学院学报;2010年06期
15 岳瑶;李惠平;;HER2和AKT与乳腺癌预后研究进展[J];癌症进展;2011年03期
16 张薇;刘高华;张利华;;Akt与心肌保护[J];心血管病学进展;2011年04期
17 林晓;林青;唐俐;刘斌;李昱;;髓母细胞瘤中PI3K、AKT及Nrf2的表达及其意义[J];中国生物制品学杂志;2011年09期
18 王少军,郭辉,贾淑兰,王富龙,张明明,躬晓华;电针刺对短暂性大脑中动脉梗塞大鼠病灶及半暗区Akt、caspase-9、TUNEL的影响[J];中国中医急症;2004年02期
19 胡万芹,胡明道,DAI H CHUNG;格尔霉素降低Raf-1和AKt水平诱导神经母细胞瘤凋亡的研究[J];昆明医学院学报;2004年02期
20 王爽,谢鹏,赵裕光,贾延劼,牟君,王运良,吕发金;PI3K/AKT信号途径在大鼠脑源性神经干细胞中的作用[J];江西医学院学报;2005年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 褚婷婷;胡质文;杜进堂;周连秀;李艳梅;;磷酸化对蛋白和多肽结构影响的研究[A];中国化学会第28届学术年会第19分会场摘要集[C];2012年
2 李刚;马立新;苏雨行;贺峭伟;刘青林;邓林;;垂体腺瘤中sMICA对NK和T细胞表面受体NKG2D表达影响的实验研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
3 郑春雷;林子扬;杨亚军;牛憨苯;沈恂;;在单个活细胞内观察和研究由磷酸化调控、MK2介导的p38 MAP激酶与热休克蛋白27的相互作用[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
4 陈康寅;黄体钢;刘彤;李永健;周欣;蔡伟;蔡金荣;刘洪梅;王林;李广平;李玉明;;高血压左室肥厚与心力衰竭兔心肌Ryanodine受体及其磷酸化水平的变化[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
5 钟敏成;薛国胜;周金华;李银妹;;光镊测量RGD多肽与Hela细胞表面受体的结合力[A];第七届全国液体和软物质物理学术会议程序册及论文摘要集[C];2010年
6 查显丰;陈少华;杨力建;闫小娟;李萡;翁建宇;杜欣;李扬秋;;TCRζ克服慢性粒细胞白血病T细胞免疫缺陷的研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
7 蔡静;刘霆;陈心传;李建军;孟文彤;刘志刚;代阳;;异基因造血干细胞移植术后TCRγ基因克隆性分析及第三方脐血细胞作用机制的研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
8 ;分会交流摘要[A];第七届全国免疫学学术大会论文集[C];2010年
9 ;Primary analysis of the character of TCR beta chain CDR3 in the peripheral blood of mother and son by technique of CE&HTS[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
10 郭晖;徐兵川;;初发的2型糖尿病患者NK细胞表面受体及细胞裂解功能的变化[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨丽芬;T细胞表面受体信号转导及辅助受体功能的研究[D];中南大学;2010年
2 肖志宏;内质网钙释放与内皮型一氧化氮合酶在血管内皮调节中的作用和机制[D];华中科技大学;2011年
3 尉建锋;电压依赖性钾通道Kv2.1增加粘着斑激酶磷酸化调控肿瘤细胞粘附和迁移[D];浙江大学;2006年
4 周培富;结核分枝杆菌信号转导调控网络研究及新型免疫抗原的筛选鉴定和运用初探[D];西南大学;2012年
5 邓刚;重组Akt腺病毒对CCL_4诱导肝纤维化大鼠模型的影响[D];中南大学;2008年
6 刘先宝;DMOG改善骨髓间充质干细胞生存能力以及相关机制的探讨[D];浙江大学;2009年
7 赵振奥;小鼠子宫内膜基质细胞中前列腺素通路的调控[D];东北农业大学;2011年
8 李泽娟;β1,4半乳糖基转移酶1促凋亡途径及其影响CDK11~(p58)促凋亡作用的研究[D];复旦大学;2005年
9 朱园园;一个新的中心体蛋白TACP1被PLK1磷酸化修饰及其对中心体功能的调控[D];浙江大学;2007年
10 王玮;高通量酵母双杂交平台的建立及其在蛋白质相互作用组学当中的应用[D];复旦大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周艳;磷酸化AKT和NF-κBp65在卵巢上皮性癌中的表达及其意义[D];郑州大学;2007年
2 薛景;SHG44细胞辐射抗性与Akt相关性的研究[D];苏州大学;2006年
3 夏丽华;反义TIMP-1体内基因转导对大鼠糖尿病肾病的影响[D];大连医科大学;2007年
4 冯振华;NRAGE通过TrkA/MEK/ERK和AKT信号通路抑制NGF诱导的PC12细胞分化[D];南京师范大学;2007年
5 程佳;卵巢上皮性癌组织中磷酸化蛋白激酶B和PTEN的表达及其意义[D];郑州大学;2007年
6 娄可心;celecoxib对血管平滑肌培养细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用及分子机制的研究[D];南京医科大学;2007年
7 赵晓辉;内源性热休克蛋白90对缺氧心肌细胞AKT表达的影响[D];第三军医大学;2007年
8 何康霞;hSHIP负调PI3K/AKt信号通路对HeLa细胞增殖与凋亡的影响[D];厦门大学;2009年
9 赵阳;PTEN和磷酸化Akt在婴幼儿血管瘤和血管畸形中的表达及意义[D];山东大学;2009年
10 刘子青;MGF对肌卫星细胞增殖及Akt蛋白表达的影响[D];上海体育学院;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 劳;炭疽伎俩 不过尔尔[N];医药经济报;2001年
2 ;巴拿马旅游业行动计划[N];中国旅游报;2002年
3 新纹;非典病毒并不“强”?[N];医药经济报;2004年
4 郝成;SARS研究发现病毒感染新机制[N];中国医药报;2005年
5 唐伟;新型淋巴毒素的临床研究立项863项目课题[N];科技日报;2006年
6 刘乐;《免疫学》:研究发现微生物引发免疫反应的新机制[N];中国畜牧兽医报;2007年
7 紫箕;获批药品数量十年来首次回落[N];医药经济报;2006年
8 喜文;Vectibix有望升格为一线药物[N];医药经济报;2007年
9 毛黎;禽流感病毒感染人类与受体形状有关[N];科技日报;2008年
10 时磊;也是一种选择[N];国际经贸消息;2001年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978