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《中南大学》 2011年
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mPEG-CS介导的livin和survivin双基因干扰治疗大肠癌动物实验研究

崔健  
【摘要】:目的:探讨mPEG-CS纳米载体介导的针对livin基因和survivin基因的特异性RNA干扰治疗大肠癌动物实验研究,,比较双基因干扰与单基因干扰对荷瘤裸鼠生长的影响。 方法:通过大肠癌癌细胞悬液皮下注射成瘤的方法构建大肠癌裸鼠模型;免疫组化试验确定livi、survivin的亚细胞定位;mPEG-CS介导的livin和survivin双基因干扰之后后观察观察瘤体体积变化情况,并计算抑瘤率,切片后行HE染色观察瘤体细胞形态,免疫组化SP法分析基因干扰后livin和survivin蛋白的表达,TUNEL凋亡染色观察肿瘤细胞凋亡情况。 结果:大肠癌癌细胞悬液法皮下注射成瘤的方法构建大肠癌裸鼠模型2周后肉眼下可见瘤体形成,并生长迅速,约5周后瘤体基本稳定在一个平台上,瘤体切片后行HE染色符合大肠癌株细胞;免疫组化染色后在电子显微镜下观察结果表明Survivin的阳性率为81%,亚细胞定位主要位于肿瘤细胞胞浆(48.5%),细胞核(49.2%)和胞膜(2.3%)也有轻度染色。livin的阳性率为76.9%,其中强阳性率为33.2%,中度阳性率为27.7%,弱阳性率为15.0%。亚细胞定位主要位于肿瘤细胞胞浆(49.6%)与细胞核(50.4%),其中胞浆与胞核表达率无明显差异mPEG-CS纳米载体介导针对livin基因和survivin基因的特异性RNA干扰治疗后结果表明,livin和survivin双基因干扰可以明显抑制瘤体生长,瘤重及体积均明显均明显小于单基因干扰。免疫组化SP法结果发现,livin和survivin双基因干扰后livin蛋白表达抑制率为78.6%,survivin蛋白表达抑制率为73.3%,其作用均强于单基因干扰。TUNEL凋亡染色结果表明,livin和survivin双基因干扰诱导细胞凋亡能力比单独livin或者survivin基因干扰强。 结论:大肠癌癌细胞悬液法皮下注射成瘤的方法构建大肠癌裸鼠模型是可行的,在病因学上更接近癌的自然发生过程,且成瘤率高,适宜于大肠癌病因及治疗实验研究;livin、survivin在裸鼠大肠癌中的亚细胞定位主要位于细胞质及细胞核,二者分布无明显差异;livin和survivin双基因转染后可以促使肿瘤细胞凋亡、明显抑制瘤体生长,瘤体的livin和survivin蛋白水平受到明显抑制。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R735.34

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黎军和;何文静;何友兼;;Survivin和Livin在Dukes'B期结直肠癌中的表达及其临床意义[J];癌症;2007年05期
2 管晓翔,陈龙邦;肿瘤多药耐药性及其治疗进展[J];癌症进展;2004年02期
3 冯静;陈小兵;赵明耀;;结肠直肠癌肝转移相关分子标志研究进展[J];癌症进展;2009年05期
4 夏雪梅,陈余清,蔡映云,李殿明,胡俊锋,黄礼年;Survivin反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的研究[J];蚌埠医学院学报;2005年01期
5 Hans J Stauss;;Enhancing Immune Responses for Cancer Therapy[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年03期
6 胡少为,马坚妹,王朝晖,赵宝霞,刘敏,吕申;胃黏膜上皮及胃癌细胞中错配修复基因hMLH1蛋白的表达及意义[J];大连医科大学学报;2004年02期
7 康杰芳;王喆之;;人野生型p53肿瘤抑制基因在烟草中的遗传转化[J];第四军医大学学报;2007年20期
8 姚晓军;黄宗海;李强;王朝阳;;Ad-VEGF-GFP-CD/TK双自杀基因系统对大肠癌的生长抑制作用及微环境中细胞因子活性的影响[J];南方医科大学学报;2010年02期
9 唐时幸;基因直接注射方法及其在医学上的应用[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1995年04期
10 吴洪波;于雁;;大肠癌基因治疗进展[J];国际肿瘤学杂志;2006年05期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 刘霆;新型非病毒载体介导融合自杀基因靶向治疗结肠癌的实验研究[D];中南大学;2007年
2 郭春光;结直肠癌肝转移相关分子标志物的筛选与鉴定[D];中国协和医科大学;2008年
3 蔡明;Livin基因和Survivin基因联合靶向SiRNA对大肠癌细胞生物学效应的研究[D];华中科技大学;2009年
4 李兰双;Fcy::Fur/5-FC自杀基因系统对宫颈癌的实验研究[D];重庆医科大学;2009年
5 杨转移;WIF-1基因启动子甲基化对星形胶质瘤生物学行为的影响[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 胡友主;Bcl-2、P53基因在肝母细胞瘤中的表达研究及意义[D];暨南大学;2000年
2 杨文宇;腺病毒介导双自杀基因选择性杀伤血管内皮细胞的研究[D];第一军医大学;2004年
3 申龙树;大肠癌组织HLA及相关分子的异常表达及其意义[D];东南大学;2004年
4 魏冬;WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统治疗人结肠癌的动物实验研究[D];山东大学;2005年
5 张惠晶;大肠癌中DCC基因失表达与其启动子甲基化的相关性研究[D];中国医科大学;2008年
6 李竞博;结直肠癌k-ras基因突变率及相关因素的研究[D];吉林大学;2009年
7 吴琼;TPEF、STAT1、CDK8在大肠癌中的表达及其意义[D];广州医学院;2009年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 万德森;;结直肠癌流行趋势及其对策[J];癌症;2009年09期
2 李殿明,刘超,陈余清,夏雪梅,黄礼年,李柏青;肺癌组织survivi nmRNA的表达及其与预后的关系[J];蚌埠医学院学报;2005年03期
3 李伟,陈余清,周继红,李殿明,徐凤珍,夏雪梅;Survivin反义寡核苷酸经线粒体途径诱导肺癌细胞凋亡研究[J];蚌埠医学院学报;2005年06期
4 李大鹏;王启之;;survivin在食管癌的表达及其与Bcl-2相关性研究[J];蚌埠医学院学报;2009年03期
5 韦建宝;陈山荣;赵枫;韦忠恒;覃忠卫;;结直肠癌同时性肝转移治疗46例分析[J];结直肠肛门外科;2006年04期
6 田小林;聂祝青;;Survivin基因与结直肠癌关系的研究进展[J];结直肠肛门外科;2011年01期
7 张民献;;结直肠癌肝转移手术治疗分析[J];当代医学;2011年15期
8 陈万青;张思维;邹小农;;中国肺癌发病死亡的估计和流行趋势研究[J];中国肺癌杂志;2010年05期
9 吴胜春;檀碧波;吕品田;韩杰;;胃癌组织铂类药物体外化疗药敏性与多种耐药相关因子表达的关系[J];广东医学;2010年04期
10 周活动;林强;洪锦伏;;47例结、直肠癌肝转移的诊断与治疗[J];广东医学院学报;2010年02期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王宏芳;CRAd.pEgr1-Smac联合照射对MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制效应[D];吉林大学;2011年
2 王育波;壳聚糖/β-甘油磷酸钠作为液态栓塞材料的可行性分析[D];吉林大学;2011年
3 谭文勇;降低心脏前壁区域的照射剂量作为左乳癌保乳术后放疗的心脏保护新策略[D];华中科技大学;2011年
4 赵光;结直肠癌血清比较蛋白质组学研究及特征多肽的功能研究[D];第二军医大学;2011年
5 杨瑾;PAMAM-D纳米颗粒介导双自杀基因抑制人Tenon's 囊成纤维细胞增殖的实验研究[D];天津医科大学;2010年
6 王艳;人参皂苷Rg3对人肺腺癌细胞株抗肿瘤作用及相关机制的研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
7 龙玲;皂刺抗宫颈癌活性及其作用机理的研究[D];西北农林科技大学;2006年
8 冯志华;丙型肝炎病毒DNA免疫的实验研究[D];第四军医大学;1999年
9 李嘉;免疫耐受期慢性HBV感染者肝脏病理与细胞免疫状况关系的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
10 张素欣;不同方式负载抗原后外周血树突状细胞对口腔癌抑瘤作用的体内外实验研究[D];河北医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 夏爽;高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究[D];广西医科大学;2011年
2 李擎虎;三物白散对胃癌SGC-7901细胞凋亡及survivin基因表达的影响[D];湖南中医药大学;2011年
3 王丽;结直肠癌患者EGFR蛋白和k-ras基因突变状态检测及其临床意义[D];福建医科大学;2011年
4 刘霞;奥曲肽对人结肠癌细胞SW480增殖和凋亡影响的研究[D];河北医科大学;2011年
5 王耀贤;结直肠癌伴肝转移同期手术治疗效果研究[D];河北医科大学;2011年
6 于新明;CMTM8能否判断结直肠癌的预后[D];北京协和医学院;2011年
7 肖维;mPEG-CS纳米粒介导的livin和survivin双基因干扰对大肠癌细胞杀伤效率的研究[D];中南大学;2011年
8 陈尧磊;52例青年大肠癌临床特征分析[D];中南大学;2011年
9 冯常娜;关于基因增强技术的伦理问题研究[D];武汉科技大学;2011年
10 秦光远;结直肠癌术后吻合口瘘危险因素分析[D];石河子大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许铭炎,邓小玲;DNA错配修复基因与肿瘤研究新进展[J];癌变.畸变.突变;2002年04期
2 晏霆,朱满洲;基因治疗与基因载体[J];安徽医药;2002年04期
3 杨冬,朱尤庆,齐健;Survivin基因与PTEN蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及临床意义[J];癌症;2004年03期
4 杨景,柳凤轩,阎晓初,贺光友,刘丽梅;Survivin在结直肠癌组织中表达的临床意义及其与细胞凋亡、血管生成的关系[J];癌症;2005年01期
5 邓艳春,王吉村,刘新平,季少平,药立波;基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌基因[J];癌症;2005年06期
6 孟竹达;林从尧;冯茂辉;;DCC PTEN在大肠癌中的表达及临床意义[J];长治医学院学报;2007年02期
7 何庭芳,李代强;肝母细胞瘤P53基因蛋白与增殖细胞核抗原相关性研究[J];当代医师杂志;1997年06期
8 王烈,曹贵松,卫立辛;B7基因联合导入对自杀基因靶向化疗作用影响的电镜观察[J];第二军医大学学报;1999年11期
9 季晨阳,季 丹,DR Smith,HS Goh;p53 cDNA突变和突变型p53蛋白表达与大肠癌预后的关系[J];第一军医大学学报;2000年05期
10 李清泉,吴小军,胡克,丁续红,杨炯;肺癌患者癌组织和痰液细胞中p53和K-ras基因突变的研究[J];中国肺癌杂志;2000年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姚红兵,吴爱国,黄宗海;Survivin在结直肠癌中的表达及其临床意义[J];第一军医大学学报;2004年12期
2 唐发清,曹亚;Survivin研究进展[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;2001年02期
3 施国伟,潘煜海;Survivin与泌尿系肿瘤[J];国外医学.泌尿系统分册;2003年02期
4 刘祺;survivin与消化系统肿瘤[J];中国普通外科杂志;2003年11期
5 徐咏莲,刘少阳,江大琼;宫颈癌中survivin的表达及临床意义[J];肿瘤防治研究;2004年03期
6 李建莎,吴焕明,邢铭友;Survivin,Ki67,PCNA和FⅧRAg在非霍奇金淋巴瘤表达及意义[J];华中科技大学学报(医学版);2004年02期
7 濮德敏,程彦君,黄玲,姚冬梅,辛晓岚;凋亡抑制蛋白Survivin在增生性子宫内膜及子宫内膜癌中的表达[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2004年02期
8 别俊,孙茂盛,孙强明,郑建平,孙雯佳;人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定[J];第一军医大学学报;2004年08期
9 燕翔,丁强,张元芳;Survivin在泌尿系肿瘤的研究进展[J];医学研究生学报;2004年08期
10 张学峰,曾甫清;凋亡抑制蛋白存活素及其在膀胱癌临床应用研究的进展[J];临床泌尿外科杂志;2004年07期
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1 李大伟;;P糖蛋白、Survivin在喉鳞癌中表达与细胞增殖、凋亡及预后的关系[A];第十次全国中西医结合耳鼻咽喉科学术会议论文汇编[C];2010年
2 包琳;;中医药对肝癌Survivin基因表达影响的研究探讨[A];第五届中国中西医结合围手术期医学研讨会论文集[C];2010年
3 ;A Single Amino Acid Change(Asp 53→Ala53) Converts Survivin from anti-apoptotic to proapoptotic[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
4 吕喜英;;Survivin与CD105在肺癌组织中的表达与预后的关系[A];中国(第七届)肿瘤微创治疗学术大会暨世界影像导引下肿瘤微创治疗学会成立筹备大会论文汇编[C];2011年
5 王晓娟;戴国仪;曹利民;朱慧芬;张悦;邵静芬;杨敬;沈关心;;Survivin反义核酸促进紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年
6 王晓娟;赵晓萍;朱慧芬;张悦;邵静芳;杨敬;沈关心;;Survivin反义核酸促进紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
7 孙慧;马杰;孙玲;刘林湘;邹典斌;刘少君;;Survivin、Bcl-2和VEGF在骨髓增生异常综合征中的表达及其相关性研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
8 张青云;李雪峰;徐建军;王雅明;;尿液中Survivin酶联免疫方法的建立及膀胱癌检测的初步应用[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
9 李秀梅;王洪江;陈艳;李卉;庞作良;张丽萍;李惠武;;新疆哈萨克族食管癌中Survivin表达上调对细胞凋亡相关基因的影响研究[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
10 金晓东;李强;李萍;吴庆丰;陶家军;郝冀方;;Survivin表达对HepG2细胞高LET射线辐射敏感性的影响[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 衣晓峰;如何判断大肠癌化疗疗效[N];中国医药报;2003年
2 ;丹参能显著抑制增生性瘢痕成纤维细胞Survivin表达[N];中国中医药报;2005年
3 余志平;机理研究成果颇丰 治疗研究尚待深[N];中国医药报;2005年
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1 杨彤涛;凋亡抑制基因survivin在人骨肉瘤组织中的表达及其RNA干涉的初步研究[D];第四军医大学;2004年
2 曹永倩;紫杉醇及survivin反义寡核苷酸对恶性黑色素瘤细胞作用的实验研究[D];山东大学;2010年
3 范海涛;Survivin与VEGF的检测及二者反义寡核苷酸对膀胱癌的治疗研究[D];吉林大学;2010年
4 李红玲;Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其反义寡核苷酸对淋巴瘤细胞增殖与凋亡的影响[D];第四军医大学;2004年
5 马静;RNA干扰抑制survivin基因表达诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的实验研究[D];昆明医学院;2010年
6 朱晓东;Survivin在紫杉醇抗肿瘤机制中作用及其反义核酸干预胃癌形成的研究[D];复旦大学;2003年
7 史惠蓉;Survivin在卵巢癌中的表达及其反义核酸诱导卵巢癌细胞凋亡的实验研究[D];郑州大学;2004年
8 马爱妞;SurKex诱导survivin基因沉默的分子机理研究[D];上海交通大学;2010年
9 成胜权;Survivin基因对人肝癌细胞增殖和凋亡作用机制的研究[D];第四军医大学;2004年
10 张成伟;ⅢA期非小细胞肺癌新辅助化疗前后Survivin、P53、Bcl-2的表达及意义[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 崔健;mPEG-CS介导的livin和survivin双基因干扰治疗大肠癌动物实验研究[D];中南大学;2011年
2 赵杨;Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2004年
3 王霞;survivin和hTERT在大肠粘膜癌变中表达及其与c-mye关系[D];郑州大学;2004年
4 刘洪翔;Survivin 在结直肠腺瘤癌变过程中的表达及其与p53、Ki-67表达的关系[D];郑州大学;2004年
5 管睿;Rab、Survivin在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义[D];第二军医大学;2004年
6 赵蒙;Survivin反义寡核苷酸转染对肝门部胆管癌细胞株FRH-0201侵袭作用的实验研究[D];山东大学;2010年
7 张秀梅;Survivin反义寡核苷酸对大鼠肝星状细胞HSC-T6凋亡的影响[D];南华大学;2010年
8 孔令慧;非小细胞肺癌中E2F-1、Survivin蛋白表达及与HPV感染的相关性研究[D];华中科技大学;2009年
9 郭文佳;与Survivin调控相关的六个因子在新疆哈萨克族食管癌中的表达研究[D];新疆医科大学;2010年
10 林青;白术内酯Ⅰ对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞存活素survivin表达的拮抗作用及促凋亡作用[D];成都中医药大学;2011年
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