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《中南大学》 2013年
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高速逆流色谱分离纯化海桐皮活性成分的研究

廖晓云  
【摘要】:近年来高速逆流色谱(HSCCC)广泛应用于天然产物化学成分的分离提纯。本文利用HSCCC分离技术,针对海桐皮活性成分开展研究。探讨了高速逆流色谱的最优分离条件,并对海桐皮活性成分的抗氧化和抑菌作用进行了相关研究。主要内容如下: (1)考察了HSCCC分离海桐皮乙酸乙酯萃取部位的最优分离条件。实验结果表明最优两相溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:4:1:4,v/v),上相有机相作固定相,下相水相作流动相。转速为850转/分钟,流速为2mL/min,此时固定相保留率达到54%。通过HSCCC一步分离,从420mg乙酸乙酯部位中分离纯化得到75mg原儿茶酸、32mg绿原酸和44mg咖啡酸。高效液相色谱分析结果显示分离后物质的纯度都超过95%,原儿茶酸的纯度甚至达到了99.7%。 (2)采用紫外光谱(UV)、液相质谱(HPLC-MS/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和碳谱(13C NMR)方法分析鉴定出海桐皮活性成分的化学结构。本文首次报道从海桐皮中分离得到原儿茶酸、绿原酸和咖啡酸这三种物质。 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)抗氧化实验表明这三种物质均具有较好的抗氧化性,原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸的抗氧化强弱为咖啡酸原儿茶酸绿原酸,其半数抑制浓度分别为22.5μg/mL.41.9μg/mL和20.9μg/mL。同时考察了三种物质对阪琦杆菌、副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠杆菌的抑菌效果。结果表明原儿茶酸、绿原酸和咖啡酸的抑菌作用均强于乙酸乙酯部位,且不同物质对菌种的抑菌效果具有选择性。其中原儿茶酸对副溶血菌具有较强抑菌作用,最低抑制浓度(MIC)为400μg/mL,而绿原酸对阪琦杆菌的抑菌效果甚佳,MIC为600μg/mL,咖啡酸对鼠伤寒沙门氏菌的MIC为600 (3)研究了正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:1:1,v/v)溶剂体系中的酸效应和盐效应。选择水杨酸为研究对象,探讨了不同种类的酸、盐及它们的浓度对水杨酸分配系数的影响。实验结果表明酸或盐的加入可以微调分离对象在溶剂体系中的分配系数。本论文图20幅,表17个,参考文献100篇。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:O657.7

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【参考文献】
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