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《中南大学》 2003年
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实验性气道高反应动物模型肺内神经肽及其受体时空分布

任雁宏  
【摘要】: 第一部分 气道高反应性动物模型的建立及检测 目的:基于气道上皮稳态假说,通过臭氧应激损伤气道上皮细胞,建立新型气道高反应性动物模型。 方法:12只新西兰兔随机分为两组,(1)臭氧攻击组:将动物暴露于2.0ppm臭氧中攻击3天,每天1小时。(2)正常对照组。末次攻击后12小时用乙酰甲胆碱雾化吸入激发气道反应,RM-6240C生物信号采集系统实时、动态观测跨肺压和气流量,计算气道阻力,收集肺泡灌洗液进行细胞计数、分类,总蛋白,IL-1含量测定及肺组织病理切片,以证实气道高反应性的存在。 结果:①臭氧应激组动物激发后,气道阻力增加,呼气阻力增加程度更明显。②肺泡灌洗液中总蛋白、IL-1含量升高,细胞总数及各细胞分类均高于正常对照组。③肺组织病理切片可见臭氧应激组动物支气管腔狭窄,气道上皮脱落,肺泡、肺间质中大量炎细胞浸润。 第二部分 降钙素基因相关肽及其受体在气道高反应性形成中的时空分布 目的:探讨降钙素基因相关肽在气道高反应性形成中的作用。 方法:将25只新西兰兔随机分为五组,分别臭氧攻击0、1、2、4、8天,每天1h,采用放射免疫法检测肺组织匀浆中CGRP含量,RT-PCR测定肺内CGRPRlmRNA表达改变,原位杂交法观察CGRPRl mRNA阳性细胞肺内分布。 结果:①放射免疫结果显示,臭氧应激使肺组织匀浆中CGRP浓度24h内迅速升高,并于应激第二天达到峰值,之后缓慢下降,应激第八天降至正常水平;②RT-PCR结果显示,随应激时间的延长,肺内CGRPRl mRNA表达逐渐增强,于应激第4天达到峰值,之后逐渐下降,应激第八天降至正常水平;③原位杂交结果显示,臭氧应激0天组阳性反应细胞主要均匀分布于肺间质、支气管上皮细胞,血管及支气管平滑 硕士学位论文 摘 要 肌亦有少量表达。随应激时间的延长,镜下可见阳性反应细胞分布不 均,多呈散在的片装或灶状集中于气管、血管周围。臭氧应激第八天, 肺组织表达CGRPRI mRNA阳性细胞明显减少。 第三部分 血管活性肠肚及其受体在气道高反应性 形成中的时空分布 目的:探讨血管活性肠肽在气道高反应性形成过程中的作用。 方法:25只新西兰兔随机分为五组,分别臭氧攻击0、1、2、4、S 天,每天1小时。采用放射免疫法检测肺组织匀浆中VIP含量,RT干CR 测定肺内VIPRlmRNA表达改变,原位杂交法观察VIPRI m删阳性细 胞肺内分布。 结果:①臭氧应激第一天肺组织匀浆中VIP浓度未见明显改变,随应 激时间延长,VIP浓度逐渐增高,于第四天达最高值,四天后开始下 降,第八天降至正常水平;②与肺组织匀浆中UP含量变化相似, VIPRI mRNA表达经历了先增加后降低的双向过程,随应激时间的延 长,表达逐渐增强,应激2~4天表达达到峰值,之后逐渐下降,应 激第八天降至正常水平;③臭氧应激0天组动物肺间质、支气管上皮 细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞均有VIPRI mRNA表达,分布均匀。 臭氧应激第一天,肺内染色阳性细胞分布未见明显改变,应激2~4 天,阳性细胞分布不均,呈斑片状集中于气管、血管周围,染色强度 增加,肺泡腔内亦可见阳性染色细胞,至臭氧应激第八天,阳性染色 细胞减少。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R56

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【参考文献】
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