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《中南大学》 2004年
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纳米生物技术治疗肝癌:p53-白蛋白纳米粒的制备和转染的研究

郭妍  
【摘要】:目的:制备白蛋白纳米粒,评价白蛋白纳米粒做为p53基因载体的可行性。用p53-白蛋白纳米释控系统体外转染HepG2细胞,观察其对肝癌细胞生长的影响。 方法:应用复凝聚法制备白蛋白纳米粒,通过静电吸附作用及化学键耦连作用连接上p53表达质粒DNA,制备成p53-白蛋白释控系统。琼脂糖凝胶电泳分析载体与DNA结合情况及抵抗NDASE-Ⅰ消化的作用。将同剂量的p53-白蛋白纳米粒,p53—脂质体微粒阳性对照组与裸DNA的阴性对照组及空白的白蛋白纳米粒组分别转染至培养的HepG2细胞中,用RT-PCR及Western Blot测p53的表达并通过其对肿瘤细胞生长的影响观察其抑瘤的作用。 结果:1.粒度分析仪及电镜检测证实白蛋白纳米粒呈均匀分散的球形颗粒,平均粒径为98nm。 2.琼脂糖凝胶电泳结果显示:在PH值较小的酸性条件下,白蛋白纳米粒能有效结合p53基因并能抵抗NDASE-Ⅰ消化的作用。 3.RT—PCR显示:白蛋白纳米粒能将p53基因高效地转染入HepG2细胞中并表达。 4.细胞生长抑制曲线显示:p53-白蛋白纳米粒组能有效地抑制肿瘤细胞的生长,作用优于脂质体载体组。 结论:制备了粒径较小的白蛋白纳米粒,能有效连接上p53表达质粒DNA,并能转染HepG2细胞,有效地抑制癌细胞的生长。ANP可作为DNA转移载体。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R735.7;R-39

【参考文献】
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