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《中南大学》 2007年
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氨基化硅纳米颗粒制备及其基因转移载体性能

周银  
【摘要】: 目的:寻找合适的基因转染载体一直是基因治疗中的一大难题,二氧化硅纳米颗粒(silica nanoparticles,SLNPS)以其良好的生物相容性、易于修饰以及低毒副作用而被人所期待,其应用前景也被普遍看好。本室前期研究已经证实适量SLNPS不会影响细胞的增殖,动物实验也表现出较低的生殖毒性与急性毒性。本研究旨在通过对SLNPS进行氨基化修饰,并优化修饰条件,提高SLNPS的表面电位及结合DNA的稳定性与有效性,同时细胞转染试验分析优化后颗粒的转染效果。 第一章氨基化SLNPS的制备及修饰条件优化 方法:微乳法制备SLNPS,利用硅烷偶联剂(N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三乙氧基硅烷,AEAPS)的偶联作用,一次性制备表面偶联氨基基团的二氧化硅纳米颗粒,并对修饰条件进行优化摸索,制备的颗粒经冷冻干燥后,电镜观察其粒径、分散性,电位分析仪检测纳米颗粒表面Zeta电位值,观察室温下存储6个月后同批颗粒DNA结合能力是否一致。 结果:通过优化条件,制备粒径在65nm、分散均匀、表面电位为+31.5mv的氨基化修饰的SLNPS,在质量比20:1下能与DNA完全结合,颗粒制备6个月后,超声分散外观与初始制备时无差别,但结合能力有所下降。 第二章氨基化纳米颗粒细胞转染效率分析 方法:梯度琼脂糖凝胶电泳分析SLNPS与DNA的结合能力,并观察其与DNA结合后,是否能有效保护DNA不被血清所降解;一般转染方法和SLNPS-电穿孔复合转染分析SLNPS转染HL7702细胞的效率及稳定性,MTT试验分析SLNPS分别对肝细胞(HL7702细胞)和肝癌细胞(Bel-7402细胞)的毒性。 结果:优化条件下的SLNPS在质量比20:1时能完全结合并能有效保护DNA不被血清降解,流式细胞分析证实SLNPS用一般转染方法转染HL7702细胞,其效率能稳定在20%~30%,而SLNPS-电穿孔复合转染虽效率高达60%以上,但与电转染对照无明显区别,MTT试验提示SLNPS对肝细胞毒性要低于脂质体,而Bel-7402细胞则可能会在SLNPS加入后3天左右增殖速度减慢。 结论:制备得到粒径65nm、分散均匀、表面电位+31.5mv的氨基化修饰的二氧化硅纳米颗粒,能稳定携带人源基因载体进行基因转染,可作为基因转染的一种新材料与方法。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q78

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【参考文献】
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1 ;Expression of reconstructive hF Ⅷ in the hrDNA by using hrDNA targeting vector[J];Chinese Science Bulletin;2005年19期
2 朱诗国,吕红斌,向娟娟,唐珂,张必成,周鸣,谭琛,李桂源;一种新型的非病毒DNA传递载体:多聚赖氨酸-硅纳米颗粒[J];科学通报;2002年03期
3 薛志刚,郑多,阮建明,潘乾,赵迪诚,刘小平,陈玉祥,夏家辉,夏昆;硅纳米颗粒作为基因转染载体的研究[J];遗传学报;2003年07期
【共引文献】
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1 朱诗国,甘凯,李征,沈守荣,向娟娟,李小玲,范松青,吕红斌,曾朝阳,李桂源;多聚赖氨酸-硅纳米颗粒的生物相容性研究[J];癌症;2003年10期
2 张晶,杨新岐,姜海龙,孙莉;应用纳米锌粉及稀土的粉末渗锌技术研究[J];中国表面工程;2005年03期
3 徐超;李兆泽;万红;吴学忠;;MEMS固体微推进器中Cr薄膜点火电阻的研究[J];传感技术学报;2006年05期
4 包南;孙剑;谢晴;马志会;;PEG辅助纳米TiO_2的可控制备及其光催化活性[J];传感技术学报;2006年05期
5 徐桂云;范金石;焦奎;;纳米颗粒在DNA固定化中的应用进展[J];传感器与微系统;2008年03期
6 李莉娟;孙凤久;;红外光谱法在金属氧化物纳米材料研究中的应用[J];材料导报;2006年01期
7 寿青云;陈汝东;;金属氧化物纳米流体的导热性能研究[J];材料导报;2006年05期
8 李敏;崔屾;;纳米催化剂研究进展[J];材料导报;2006年S1期
9 张凌;杨晓伟;王晓敏;李天保;刘旭光;许并社;;环己烷制备内包金属洋葱状富勒烯的研究[J];材料导报;2007年01期
10 王红;傅刚;陈环;刘志宇;;TiO_2纳米管阵列的制备及复阻抗分析[J];材料导报;2008年S1期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 高惠;杨俊玲;;纳米SiO_2的制备方法及应用[A];第八届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2008年
2 陈建海;;纳米技术在基因治疗中的应用研究进展[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
3 马印;秦记珍;狄友波;曲娴;罗群芳;;超细羊毛改性前后针织物性能的研究[A];第30届全国毛纺年会论文集[C];2010年
4 张敏;刘微;李擎;郭春燕;何俊霞;斯日古楞;吉日木图;;基因转染技术及其在肿瘤研究中的应用进展[A];2012中国驼业进展[C];2012年
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1 严亚;碳纳米管基复合物的制备及其光催化和电催化性质研究[D];华东理工大学;2011年
2 宋建荣;7YSZ/Al_2O_3/Ni-343多层热障涂层的同步合成及其性能研究[D];武汉理工大学;2010年
3 马国章;纳米SiO_2杂化材料的制备及其在紫外光固化涂料中的性能研究[D];太原理工大学;2011年
4 姜金华;介观结构无机生物材料的合成及其性能研究[D];吉林大学;2011年
5 罗宁;爆轰法合成碳包覆金属纳米材料的研究[D];大连理工大学;2011年
6 陈国祥;GaN纳米管和纳米带的结构稳定性及其电子性质的第一性原理研究[D];陕西师范大学;2011年
7 马谦;钛铌酸盐微纳米发光材料的制备与表征[D];山东大学;2011年
8 吴雄辉;非病毒型载体介导SOD1基因体外细胞转染及表达的实验研究[D];中南大学;2011年
9 雷若姗;高强度Cu-Nb纳米弥散强化铜合金的制备及其相关基础问题的研究[D];中南大学;2011年
10 曹兴;磁性纳米基因载体介导Mcl-1特异性shRNA治疗肝细胞癌的实验研究[D];中南大学;2010年
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1 李强;水合肼液相还原法制备纳米铜粉的研究[D];大连理工大学;2010年
2 李光远;添加微量纳米铜粉对铁基粉末烧结件组织性能的影响[D];长春工业大学;2010年
3 徐秀娟;导电性纳米颗粒的分散与应用[D];华东理工大学;2011年
4 徐军;废酸中铁离子的回收及共沉淀法制备纳米四氧化三铁的工艺研究[D];武汉工程大学;2010年
5 孔倩倩;麻疯树高效再生体系的建立及纳米载体转基因技术研究[D];中南林业科技大学;2010年
6 马敏伟;金属薄膜流变力学性能研究[D];中南林业科技大学;2009年
7 曹磊;纳米ZnO的气敏机理研究[D];西安工业大学;2011年
8 党维军;微纳复合材料的制备与研究[D];西北大学;2011年
9 郭正波;纳米层状镁铝羧酸盐水滑石制备表征及应用研究[D];湖北工业大学;2011年
10 安琴友;纳米晶氧化锆粉体制备与晶体缺陷研究[D];湖北工业大学;2011年
【二级参考文献】
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1 杜仕国,施冬梅,韩其文;纳米颗粒的液相合成技术[J];粉末冶金技术;2000年01期
2 瞿其曙,何友昭,淦五二,李敏,林祥钦;超细二氧化硅的制备及研究进展[J];硅酸盐通报;2000年05期
【相似文献】
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1 孙国凤;;开发蛋白氨基化的工业过程,从7月开始制造降钙素[J];生物技术通报;1992年09期
2 张斌斌;沈剑锋;胡轶喆;吴利平;叶明新;;多壁碳纳米管氨基化修饰(英文)[J];复旦学报(自然科学版);2008年04期
3 周忠强;α-氨基酸的不对称合成[J];中南民族大学学报(自然科学版);2005年02期
4 曾宪银;王志强;任月明;;氨基化纳米Fe_3O_4处理含氟废水的研究[J];黑龙江科技信息;2011年14期
5 M. IWAHARA;M. HONGO;陈雷;;通电促进黄色短杆菌No.2247的α-酮戊二酸还原氨基化为L-谷氨酸[J];发酵科技通讯;1982年04期
6 何晓晓,王柯敏,谭蔚泓,刘斌,林霞,黄杉生,李杜,何春梅,李军;基于氨基化SiO_2纳米颗粒的新型基因载体[J];科学通报;2002年18期
7 李芳生,徐洵;绒毛膜促性腺激素(HCG)对大白鼠肝谷氨酸代谢酶系的影响及其机制[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;1964年02期
8 田兵;;宫崎医大基因工程研究获得新成果[J];全球科技经济瞭望;1988年03期
9 陈彤,胡常伟,付真金,田安民;直接胺化绿色合成芳胺研究新进展[J];科学通报;2002年14期
10 黄海涛;惠忠英;陈云;黄进;;原位微波合成官能化碳纳米管复合聚己内酯材料[J];武汉大学学报(理学版);2009年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄静;董丽杰;王翔;张俊俊;熊传溪;;氨基化超顺磁性Fe_3O_4纳米粒子的合成与表征[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(上册)[C];2009年
2 祝良芳;吕玉芬;郭滨;胡晓科;唐典勇;李桂英;胡常伟;;钒基催化剂作用下苯的一步氨基化研究[A];第十三届全国催化学术会议论文集[C];2006年
3 赵剑英;李玉邯;高连勋;;氨基化片基表面氨基密度检测[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
4 张刚;于沂;陈鑫;韩宇;邹永存;肖丰收;杨柏;;纳米二氧化硅空心胶囊的制备与表征[A];第四届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];2001年
5 赵剑英;邱雪鹏;高连勋;;通过有机反应共价键合片基的方法[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
6 袁玉蓀;韓儀;;斜生栅列藻(Scenedesmus Obliquus)氨基移換作用的初步研究[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
7 赵剑英;邱雪鹏;高连勋;;通过表面原子转移自由基聚合(ATRP)键合片基的方法[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
8 陈贞茂;黄萍;李东辉;;四硝基铝酞菁红区荧光法测定葡萄糖[A];第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集[C];2006年
9 王娟;王勇;杨帆;杨秀荣;;基于双偏振测量技术的DNA-亚甲基蓝相互作用研究[A];第十届中国化学会分析化学年会暨第十届全国原子光谱学术会议论文摘要集[C];2009年
10 刘剑波;羊小海;王柯敏;嵇海宁;武春雷;;氟离子对于氨基化CdTe量子点分散作用的研究[A];中国化学会第27届学术年会第04分会场摘要集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 李小林;亚洲最大光气产品基地将被催生[N];中国化工报;2004年
2 记者欧植兆;千万元固定资产为底线[N];中国安全生产报;2010年
3 记者 巴家伟;危化企业: 工艺不改造不许再生产[N];大连日报;2011年
4 胡笑形;我国农药工业发展方向[N];农民日报;2005年
5 特约记者 吴志雄;湖北提高危化行业准入门槛[N];中国化工报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王健;氨基化明胶的性能及在鼻粘膜给药的应用研究[D];沈阳药科大学;2002年
2 陈彤;苯在催化剂作用下直接氨基化/羟基化研究[D];四川大学;2003年
3 赵启武;亚铜催化酰胺和硫醇分子内烯基化反应及电子转移引发2-萘酚邻位氨基化反应研究[D];中国科学技术大学;2009年
4 祝良芳;由苯直接催化氧化氨基化一步合成苯胺研究[D];四川大学;2007年
5 周琰;介孔材料为载体的杂多酸催化剂的制备、表征及在非均相催化反应中的应用[D];复旦大学;2007年
6 唐典勇;钒基催化剂作用下苯直接氨基化和羟基化反应的理论研究[D];四川大学;2007年
7 吴卓夫;硅基介质固定化酶的研究[D];吉林大学;2009年
8 金岚;具有可控壳层的功能性聚合物微球的构筑[D];复旦大学;2005年
9 朱荣秀;胺类双官能团催化剂催化作用的理论研究[D];山东大学;2007年
10 甘胜华;有机基材表面构筑微纳金属/无机/生物高级结构的研究[D];北京化工大学;2009年
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1 高铁军;肼的衍生物的合成及其进行氨基化反应的研究[D];合肥工业大学;2010年
2 余天华;甲苯直接催化氨基化制甲基苯胺研究[D];四川大学;2004年
3 周银;氨基化硅纳米颗粒制备及其基因转移载体性能[D];中南大学;2007年
4 苏秀峰;氨基葡甘露聚糖在小鼠体内抗呼吸道合胞病毒的研究[D];重庆医科大学;2007年
5 张斌斌;碳纳米管表面修饰及功能材料的制备研究[D];复旦大学;2008年
6 孙惠娟;基于肿瘤靶向放疗的磁性纳米球的制备与改性[D];南京理工大学;2009年
7 李波;氨基化制备3,5-二甲基苯胺的研究[D];西北大学;2007年
8 章中平;氯代芳烃在NHC和[Pd(allyl)Cl]_2催化体系中的氨基化反应[D];浙江工业大学;2009年
9 何激;2-甲基-3-氨基-7-N,N-二甲氨基-5-苯基吩嗪盐酸盐的合成研究[D];湖南科技大学;2009年
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