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《中南大学》 2008年
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MPO对THP-1细胞泡沫化的影响和相关机制的实验研究

孙定军  
【摘要】: 目的:观察髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)对低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的作用和对THP-1单核巨噬细胞泡沫化的影响和可能的机制。 方法:不同浓度的MPO(0.5、1、1.5、2、2.5u/L、)与LDL孵育;不同浓度MPO浓度(0.5、1、1.5、2、2.5u/L)加入过氧化氢(hydrogendioxide,H_2O_2)与LDL共孵育,TBA法检测丙二醛(MDA)的生成量和琼脂糖蛋白电泳检测蛋白相对电泳率(REM)。在MPO-H_2O_2体系中加入不同浓度的阿司匹林(1、5、10mmol/1)与LDL共孵育后,TBA法检测MDA的生成量和琼脂糖蛋白电泳检测蛋白相对电泳率。MPO途径氧化生成的氧化型低密度脂蛋白(oxidized low densitylipoprotein,ox-LDL)与THP-1单核巨噬细胞共同培养24小时后,油红O染色法检测细胞的形态学,液相色谱一质谱联用法检测细胞内胆固醇含量。 结果:1.不同浓度的MPO与LDL孵育后,与对照组(单纯LDL)比较,MDA的生成量和蛋白相对电泳率(REM)差异均无统计学意义(P>0.05);2.不同浓度MPO浓度加入H_2O_2后与LDL共孵育,与对照组比较,MDA生成量和REM均有明显的增加,差异有统计学意义(P<0.05);3.MPO-H_2O_2反应体系中加入不同浓度的阿司匹林(1、5、10mmol/1)后与LDL共孵育,在阿司匹林浓度为1mmol/L,与对照组比较,MDA的生成量和REM差异均无明显统计学意义(P>0.05);阿司匹林浓度在5mmo/l、10mmol/L,与对照组比较,MDA的生成量和REM均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);4.MPO途径氧化生成的ox-LDL与THP-1单核巨噬细胞共培养24小时后,油红O染色形态学观察;实验组巨噬细胞内可见大量的红色脂质颗粒,正常对照组几乎没有红色的脂质颗粒。液相色谱—质谱联用法检测,总胆固醇(TC),游离胆固醇(FC),实验组细胞检测CE/TC=52.70%(>50%),对照组CE/TC=35.7%(<50%)。 结论:1.MPO可能通过H_2O_2途径介导LDL氧化并诱导THP-1单核巨噬细胞泡沫化。 2.5可司匹林可以抑制MPO-H_2O_2途径介导的LDL氧化。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R363

【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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【二级参考文献】
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