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《中南大学》 2008年
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肝细胞癌中NGX6表达与血管生成及超声造影特征的相关性研究

肖际东  
【摘要】: 肿瘤血管生成取决于血管生成因子与抑制因子之间的平衡。这一平衡受原癌基因和抑癌基因的调节。肝细胞癌是一种多基因病变,基因方面的研究,可为肝细胞癌预防、诊断、治疗及预后提供理论依据。NGX6基因是新克隆的一个鼻咽癌候选抑癌基因(基因登陆号:AF188239)。前期研究表明NGX6与肿瘤浸润转移有关。超声造影被誉为无创性微循环血管造影,是超声医学的最新进展。本课题将分子生物学及影像技术结合,探讨肝细胞癌NGX6基因表达和超声造影与血管生成的关系,对于从多方面认识血管生成的规律及指导基因靶向治疗有重要作用。 工作目的: 1、NGX6在肝细胞癌及癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系。 2、NGX6在肝细胞癌中的表达与微血管密度(microvesseldensity,MVD)、微血管形态、VEGFmRNA的关系及其在血管生成中的作用。 3、肝细胞癌超声造影特征与MVD、微血管形态、VEGF表达的关系以阐明血管生成及侵润转移影像学的分子病理学基础。 4、肝细胞癌超声造影特征与NGX6表达的关系,为寻找影响肝细胞癌血管生成靶点及侵润转移影像学研究提供基因水平的理论依据。 资料与方法: 研究对象为2006年1月~2007年10月经手术病理证实的肝细胞癌患者45例,术前行超声造影。采用Acuson Sequoia 512彩超仪,探头频率2.0~6.0MHz,造影软件CPS(contrast pulse sequences),造影剂声诺维(SonoVue)。录制造影全过程,予以QONTRAST-QRADIO软件分析。术中取新鲜离体肝细胞癌标本,应用RT-PCR检测NGX6、VEGF在癌及癌旁组织(距离癌灶距离大于2cm的肝组织)表达,免疫组化及Western-blotting检测VEGF在癌及癌旁组织表达。CD34显示微血管,记录MVD,观测微血管形态。对肝细胞癌NGX6表达、VEGF、MVD、微血管形态特征和超声造影声像特征的关系统计分析。 结果: 1、癌组织NGX6阳性表达率35.5%(16/45),癌旁组织阳性表达率77.8%(35/45),癌及癌旁组织表达阳性率组间差异有统计学意义(x~z=16.335 P<0.01),癌组织NGX6表达与淋巴结转移(x~2=5.237,P=0.022)有关。 2、NGX6在肝细胞癌中的表达与MVD(x~2=3.919,P<0.05)、VEGFmRNA(x~2=10.132,P<0.01)相关联,与微血管形态无关。 3、肝癌超声造影达峰时间与VEGF(r_s=-0.335),MVD(r_s=-0.477)有关。峰值强度与VEGF(r_s=0.566),MVD(r_s=0.569)有关。 4、微血管分型不同组间变低时间有差异(t=2.059,P<0.05)。具有环条型微血管特征的肝细胞癌门脉相低增强、“快出”廓清模式发生率高于点线型,门脉相增强表现及廓清模式与微血管分型有关(x~2=11.948,P<0.01,C=0.458)。 5、MVD高低与肿瘤强化边缘特征(x~2=7.032,P<0.01,C=0.368),强化范围变化(x~2=5.38,P<0.05,C=0.327),癌栓强化特征(x~2=4.148,P<0.05,C=0.291)发生有关;VEGF与肿瘤强化边缘特征(x~2=3.90,P<0.05,C=0.282),强化范围变化(x~2=6.544,P<0.05,C=0.356)癌栓强化特征(x~2=7.039,P<0.01,C=0.368)发生相关。 6、NGX6 mRNA表达与肿瘤强化边缘特征(x~2=10.499,P<0.01,C=0.435),强化范围变化(x~2=5.867,P<0.05,C=0.34),癌栓强化特征(x~2=6.749,P<0.01,C=0.361)发生有关。与廓清模式、放射状滋养动脉、强化是否完全等特征无关。 结论: 1、NGX6在肝细胞癌及癌旁组织有表达,与淋巴结转移有关,NGX6基因转录水平的表达降低或缺失在原发性肝细胞癌的发生过程中起了重要作用。 2、NGX6可能参与肝细胞癌血管生成的调控,与微血管形态无关。 3、肝细胞癌造影达峰时间、峰值强度可反映新生血管的状况。微血管形态特征是肝细胞癌廓清模式,变低时间长短及“门脉相增强表现”等超声造影强化及灌注特征的形态学基础之一。 4、肝细胞癌强化边缘特征、强化范围变化、癌栓强化特征与VEGF表达、MVD有关,将分子特征与超声造影影像学特点联系,为临床上影像学方法判断肝细胞癌血管生成及浸润转移提供实验依据。 5、NGX6 mRNA表达与肝细胞癌强化边缘特征,强化范围变化,癌栓强化特征有关,为探讨NGX6与肝细胞癌浸润、转移提供影像学依据。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R735.7

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