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《中南大学》 2009年
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三皮汤抗实验性溃疡性结肠炎作用及对细胞因子IFN-γ、IL-4的影响

周伟伟  
【摘要】: 目的:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis UC)归属于中医“休息痢”、“腹泻”的范畴。其病机为邪毒(湿热毒或寒湿毒)壅遏于大肠,腑气不利,损伤肠络,化腐成疡,表现为腹痛、腹泻、黏液血便。现代研究表明,当UC发生时,肠道粘膜局部免疫紊乱,同时伴有全身免疫功能失调,其促炎细胞因子IFN-γ上调,可诱导和促进炎症发生;抗炎细胞因子IL-4下调,使其抗炎作用不足,而且这些细胞因子的表达和分泌量均与UC疾病的炎症程度呈正相关。本实验欲研究三皮汤对UC小鼠脾组织重量、病变结肠观察组织学、血清和脾脏组织细胞因子IFN-γ及IL-4含量的影响,初步探讨三皮汤对UC的治疗作用及机制。 方法:40只动物随机分成正常组(Normal group)、模型组(Model group)、三皮汤组(Sanpi decotion group)、柳氮磺胺吡啶组(SASP group),每组10只。参照Heller等的方法用恶唑酮(QXZ)建立小鼠溃疡性结肠炎模型。三皮汤组和柳氮磺胺吡啶组分别予三皮汤(0.55 g.ml-1)、柳氮磺胺吡啶(0.05mg.ml-1)灌胃。恶唑酮(QXZ)灌肠后每天对小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分。第10d处死所有小鼠,取其病变结肠进行组织学损伤评分,取脾组织检测重量的变化,并采用ELISA测定各组小鼠血清和脾脏组织细胞因子IFN-γ及IL-4的含量。 结果:1.一般情况及DAI评分:模型组、三皮汤组、柳氮磺胺吡啶组小鼠灌肠后24小时均出现不同程度的体重下降、腹泻、懒动、拱背、厌食;模型组小鼠均出现稀便,5只小鼠有肉眼血便,DAI评分与正常组比较有显著性差异;三皮汤组和SASP组小鼠在治疗第4天症状开始减轻,体重逐渐增长,DAI评分与模型组相比差异有显著性;治疗第10天,两治疗组小鼠症状明显改善,精神好转,食欲增加,未见粘液血便,偶有稀便,且三皮汤组症状改善明显优于SASP组,两组DAI评分比较无明显差异。 2.组织学损伤情况:模型组小鼠肠壁可见明显的充血和水肿,沿肠系膜纵型剪开可见肠壁黏膜有散在的溃疡点和糜烂,病变主要在远端结肠,以直肠病变最严重。三皮汤组和SASP组小鼠肠粘膜病变较模型组明显好转。光镜下病理形态:模型组小鼠肠粘膜可见糜烂和溃疡形成,病变主要局限于黏膜层和黏膜下层,病变部位有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润;组织学评分明显高于正常组、三皮汤组和SASP组,;三皮汤组小鼠结肠病变有明显改善,肠粘膜无糜烂和溃疡,仅有少量炎性细胞浸润;SASP组小鼠肠粘膜未见明显糜烂和溃疡,仍有炎性细胞浸润。 3.脾组织重量情况:模型组小鼠脾组织重量明显减轻,与正常组比较有显著性差异(P<0.01);三皮汤组和SASP组脾组织重量较模型组均有明显增加。 4.各组血清IFN-γ、IL-4含量比较:模型组小鼠血清IFN-γ含量明显升高,IL-4含量明显降低,与正常组比较有显著性差异(P<0.01),三皮汤组和SASP组IFN-γ含量与模型组相比均有明显降低,且有统计学意义(P<0.01),IL-4含量与模型组相比均有升高,且三皮汤组与模型组相比有统计学意义(P<0.01),三皮汤组与SASP组组间比较无明显差异。 5.各组脾组织IFN-γ、IL-4含量比较:模型组小鼠血清IFN-γ含量明显升高,IL-4含量明显降低,与正常组比较有显著性差异(P<0.01),三皮汤组和SASP组IFN-γ含量与模型组相比均有明显降低,且有统计学意义(P<0.01),IL-4含量与模型组相比均有升高,且三皮汤组与模型组相比有统计学意义(P<0.01),三皮汤组与SASP组组间比较无明显差异。 结论:三皮汤对模型动物UC病变具有确切的改善作用,推测其现代医学机制可能是通过调节Th1/Th2之间的平衡,改善免疫功能,促进UC的愈合。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R285.5

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