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《中南大学》 2010年
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E1A基因对鼻咽癌放射增敏作用及机制研究

周蓉蓉  
【摘要】: 目的探讨腺病毒E1A基因对人鼻咽癌CNE-2Z细胞放射治疗的增敏作用及相关机制。 方法选用人鼻咽癌CNE-2Z细胞为靶细胞,分别用PBS,Ad-β-gal, Ad-E1A作用48小时后,用6MVX线分别给与0、2、4、6和8Gy剂量照射后,用MTT法和流式细胞仪检测三组细胞成活率及细胞周期变化,并进行克隆分析绘制细胞存活曲线,计算放射增敏比来观察E1A基因对人鼻咽癌CNE-2Z细胞放射敏感性的影响,同时用RT-PCR法检测三组细胞的VEGF水平的表达及野生型p53的表达。细胞免疫化学方法检测三组细胞的VEGF蛋白的表达。 结果RT-PCR结果显示Ad-E1A组可以检测到E1A基因的表达。经照射后Ad-E1A组的细胞存活率明显低于PBS对照组和Ad-β-gal对照组。Ad-E1A组的细胞的生长速度明显慢于PBS对照组和Ad-β-gal对照组。细胞存活曲线结果显示Ad-E1A组的CNE-2Z细胞放射增敏比分别为1.37(D0值比)、1.95(Dq值比)、1.46(SF2比)。PBS对照组和Ad-β-gal对照组的细胞照射后细胞存活曲线分析结果显示无差异,D0、Dq、SF2值分别为1.57Gy及1.53Gy、1.82Gy及1.78Gy、0.89及0.82。RT-PCR结果和细胞免疫化学结果显示Ad-E1A组比PBS对照组和Ad-β-gal对照组的人鼻咽癌CNE-2Z细胞的VEGF的表达明显下降,RT-PCR结果显示Ad-E1A组比PBS对照组和Ad-β-gal对照组的野生型p53水平明显上升。流式细胞学实验显示Ad-E1A组+放射治疗组细胞的凋亡明显高于其他组。 结论E1A基因通过下调人鼻咽癌CNE-2Z细胞VEGF的表达和上调野生型p53的表达来增加人鼻咽癌细胞对放射治疗的敏感性。 目的:探讨腺病毒E1A基因对人鼻咽癌动物模型放射增敏的实验研究。 方法:取对数生长期的CNE-2Z细胞5×105/0.2mL,接种于4周龄左右裸鼠右前肢腋部皮下致瘤,第7天裸鼠皮下肿瘤长至直径0.6-0.8cm时,随机分为6组(每组10个):PBS组,Ad-β-gal组,放射组,Ad-β-gal+放射组,Ad-E1A组,Ad-E1A+放射组。Ad-β-gal组/Ad-E1A组在第2周开始给予荷瘤裸鼠皮下肿瘤内滴度为5×109PFU/50μL的Ad-E1A/Ad-β-gal注射,每周2次,连续2周,放射组在第3周给予6MV-X照射,每天2Gy,连续5天。Ad-β-gal+放射组/Ad-E1A+放射组在第2周开始,给予荷瘤裸鼠皮下肿瘤内滴度为5×109 PFU/50μL的Ad-E1A/Ad-β-gal注射,每周2次,连续2周,在第3周给予6MV-X照射,每天2Gy,连续5天。第1次治疗后,每隔4天用卡尺测量1次肿瘤的体积,记录其直径,裸鼠的生存时间。当肿瘤的直径超过2cm时,处死裸鼠,分离肿瘤组织,采用免疫组织化学方法分析VEGF和CD34表达,RT-PCR分析wtp53的表达,Western blot分析VEGF的表达,TUNEL分析细胞凋亡。 结果:Ad-E1A+放射组较其他组能明显延缓移植瘤生长时间,Ad-E1A+放射组裸鼠的肿瘤平均体积比单独放射组小4.7倍,比单独Ad-E1A组的小5.3倍。Ad-E1A+放射组的裸鼠生存率显著高于其他治疗组。Ad-E1A+放射组的VEGF蛋白表达和微血管密度较其他各组明显下降。(P0.01)。Ad-E1A组和Ad-E1A+放射组的wtp53基因表达明显上调。TUNEL分析结果显示Ad-E1A组和Ad-E1A+放射组及放射组的肿瘤组织内均可明显观察到凋亡细胞。并且,Ad-E1A+放射组肿瘤细胞凋亡数目明显高于Ad-E1A组或单独放射组。 结论:E1A基因通过抑制肿瘤血管的形成和上调肿瘤组织中wtp53的表达及诱导肿瘤细胞的凋亡来提高人鼻咽癌细胞对放射的敏感性。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R739.63

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 张大昕,千新来,赵清正,余子豪;EIA基因对肿瘤细胞放射敏感性的影响[J];癌症;2000年03期
2 王晓雷,千新来,赵清正,徐震纲,唐平章;E1A基因对头颈部淋巴结转移鳞癌细胞体外生长的抑制和化放疗增敏的作用[J];癌症;2003年11期
3 王琪;韩德民;刘鋋;汪若峰;;头颈部肿瘤的P_(53)基因研究进展[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;1996年01期
4 赵素萍,王承龙;血管内皮生长因子在鼻咽癌中的表达及其临床意义[J];湖南医科大学学报;2003年02期
5 周蓉蓉;肖志强;廖遇平;肖华平;;E1A基因下调人鼻咽癌细胞血管内皮生长因子的表达提高放疗敏感性[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2008年20期
6 王强,郭敏,孙连玉;nm23-H_1基因在喉癌组织中表达的研究[J];中华耳鼻咽喉科杂志;1996年04期
7 屠规益,韩德民;当前头颈肿瘤科研应着重临床实用[J];中华耳鼻咽喉科杂志;1997年03期
8 屠规益,唐平章;我国头颈肿瘤外科的发展轨迹[J];中华耳鼻咽喉科杂志;1998年05期
9 吴旻;基因治疗研究的历史、现状与未来[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1995年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵清正,储大同,唐平章;E1A基因抗癌作用机理及在肿瘤防治中的意义[J];癌症;2000年02期
2 王晓雷,千新来,赵清正,徐震纲,唐平章;E1A基因对头颈部淋巴结转移鳞癌细胞体外生长的抑制和化放疗增敏的作用[J];癌症;2003年11期
3 马业伟,千新来,赵清正,周小山,李艳春;应用抑制性消减杂交技术分离E1A药敏相关基因[J];癌症;2004年02期
4 沙丹;何友兼;;VEGF及其受体Flt-1、KDR在鼻咽癌组织中的表达及意义[J];癌症;2006年02期
5 林森;周红利;杨琴;李新枝;;ErbB2与肿瘤细胞多药耐药性[J];成都医学院学报;2007年Z1期
6 杜莉;喉癌的发生发展与某些相关癌基因及抑癌基因[J];耳鼻咽喉头颈外科;1999年02期
7 任正心,覃纲,樊建刚,赵玮玮;喉癌喉切除术的喉功能重建——附109例报道[J];耳鼻咽喉头颈外科;2002年04期
8 柴丽,康健,谷京城,于广久;喉癌E-钙粘附素蛋白表达[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2004年03期
9 宁喜;倪菊芳;易世江;;EGCG联合放疗治疗鼻咽癌裸鼠移植瘤模型[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2011年04期
10 程金科,林晨,吴旻;腺病毒载体的应用及进展[J];国外医学(分子生物学分册);1996年04期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于湛;喉癌细胞外基质中与转移相关的基因的分子生物学研究[D];中国医科大学;2004年
2 王宝山;肿瘤转移相关因子在喉声门上型癌、喉咽癌原发灶及其淋巴结转移灶中的表达及临床意义[D];河北医科大学;2006年
3 张学斌;腺病毒5型E1A基因绿色荧光蛋白真核表达载体的构建及其对大肠癌治疗作用的研究[D];吉林大学;2006年
4 王晓雷;E1A基因对头颈淋巴结转移性鳞癌的生长抑制和化、放疗增敏作用[D];中国协和医科大学;2001年
5 张大昕;E1A基因对肿瘤放射敏感性的影响及机理探讨[D];中国协和医科大学;2000年
6 李正江;喉鳞状细胞癌综合治疗的临床和实验研究[D];中国协和医科大学;2000年
7 千新来;1. 腺病毒5型E1A下游基因c-101抗癌和化疗增敏作用及相关机理的初步研究 2. 新型HPV-16 E6/E7融合蛋白疫苗抗癌及抗转移作用研究[D];中国协和医科大学;2005年
8 马业伟;Ad5E1A蛋白的表达、抗癌作用和相关新基因片段的筛选及在克服DXR中的功能研究[D];中国协和医科大学;2003年
9 叶震敏;裂解型腺病毒基因治疗人肝癌细胞及其转移瘤的体内外实验研究[D];苏州大学;2006年
10 谢卫兵;利用RNAi技术研究CTSD和MMP1在鼻咽癌转移中的作用[D];第一军医大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
2 苗龙;P53、MUC2、Ki67、PCNA在胃癌及癌前病变中的表达及辅助诊断价值[D];兰州大学;2011年
3 邵盈;人IL-21基因联合γ射线照射对子宫颈癌Hela细胞抑制作用的研究[D];天津医科大学;2011年
4 李战伟;人工锌指蛋白随机库的构建及其在锌指核酸酶筛选中的应用研究[D];西北农林科技大学;2011年
5 王丽梅;卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子表达与其侵袭、转移关系的研究[D];广西医科大学;2001年
6 张贤芬;转移抑制基因nm23-H_1在喉癌下咽癌中的表达分析[D];青岛大学;2001年
7 钟艳平;抗人erbB2人/鼠嵌合抗体的构建、真核高效表达及治疗卵巢癌的实验研究[D];广西医科大学;2002年
8 刘艳伟;E1A基因对人肺腺癌细胞增殖和转移的影响[D];山西医科大学;2002年
9 孙轶青;用组织芯片研究nm23和p53在喉癌中的表达意义[D];大连医科大学;2004年
10 吴珠;Survivin和P53在喉鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达及其临床意义的研究[D];青岛大学;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 张大昕,千新来,赵清正,余子豪;EIA基因对肿瘤细胞放射敏感性的影响[J];癌症;2000年03期
2 王晓雷,千新来,赵清正,徐震纲,唐平章;E1A基因对头颈部淋巴结转移鳞癌细胞体外生长的抑制和化放疗增敏的作用[J];癌症;2003年11期
3 刘凤安,郭晓峰,董震;PCR在头颈部肿瘤研究中的应用及展望[J];耳鼻咽喉头颈外科;1994年02期
4 王卫华;P~(53)基因突变与头颈部肿瘤[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;1994年01期
5 赵素萍,王承龙;血管内皮生长因子在鼻咽癌中的表达及其临床意义[J];湖南医科大学学报;2003年02期
6 屠规益,韩德民;当前头颈肿瘤科研应着重临床实用[J];中华耳鼻咽喉科杂志;1997年03期
7 石宇,赵清正,陈艳;腺病毒E1A基因高效真核表达载体的构建与鉴定[J];中华放射肿瘤学杂志;1999年02期
8 石宇;腺病毒ElA基因研究进展[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1999年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑天荣,谢佐福,林贤东,张竟时,陆莉莉;nm23蛋白在人鼻咽癌中的表达[J];中华病理学杂志;1997年02期
2 陈小君,陈剑经,李亮平,孙艳;五色灵芝对人鼻咽癌细胞株在裸鼠成瘤的抑制作用[J];实验动物科学与管理;1996年03期
3 崔运昌,汪美先,王伯法,随延仿,曾毅;人鼻咽癌上皮样细胞系的单克隆抗体(简报)[J];第四军医大学学报;1984年03期
4 ;耳、鼻、喉[J];中国医学文摘(肿瘤学);1996年03期
5 王兵,蒋建敏,许东晖,许实波,邵志宇,林永成;鲍鱼多糖对荷人鼻咽癌裸鼠抗癌作用的研究[J];中草药;2000年08期
6 黄培根;唐慰萍;赵明伦;;人鼻咽癌裸小鼠移植瘤(NCN-Z1)的建立[J];广东医学院学报;1989年04期
7 胡利富,李晓琳,蒋金荃,姚进,俞晔,曹世龙,黄抗美,顾健人;人鼻咽癌DNA的转化活性研究[J];肿瘤;1986年01期
8 黄培根;唐慰萍;赵明伦;;人鼻咽癌裸鼠移植瘤(NCN-Z1)建立的初步报告[J];实用肿瘤杂志;1990年01期
9 李萍;韦敏怡;;细胞凋亡基因与鼻咽癌[J];中国医学文摘(肿瘤学);2003年01期
10 蔡逸云;周振英;林琳;戴亮;;鼻咽癌患者经~(60)Co-r射线放疗前后的染色体畸变和银染的观察[J];肿瘤学杂志;1992年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 林森;陈崇喜;王春雷;李先辉;陈小奉;;琥珀酸脱氢酶和丙酮酸脱氢酶激酶1在鼻咽癌癌变过程中的表达变化[A];浙江省医学会耳鼻咽喉科学分会成立60周年庆典暨2011年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会论文汇编[C];2011年
2 林少俊;宗井凤;;鼻咽癌的治疗进展[A];第十三届中国科协年会第18分会场-癌症流行病趋势和防控策略研讨会论文集[C];2011年
3 周小军;田道法;王士贞;阮岩;邱宝珊;张丽娟;;鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因表达研究[A];中华中医药学会耳鼻喉科分会第15届学术交流会论文集[C];2009年
4 项光早;;微血管密度与鼻咽癌生长、浸润、转移和预后关系的研究[A];浙江省医学会耳鼻咽喉科学分会成立60周年庆典暨2011年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会论文汇编[C];2011年
5 李美香;石金凤;谢元杰;赵国军;龙治峰;黄欣琼;;间质蛋白Periostin促进鼻咽癌转移的机制研究[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
6 杨凌;马礼钦;孔祥泉;潘建基;郑雄伟;蔡晓文;;ERCC1等基因在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义[A];第六届全国鼻咽癌学术大会论文汇编[C];2010年
7 肖旭轩;胡国清;;鼻咽癌组织p16、p53、p73蛋白表达水平对患者远期生存率的影响[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年
8 韩安家;宋玉兰;张芬芬;;鼻咽癌中β-catenin的表达与鼻咽癌细胞增殖、凋亡及侵袭的关系[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
9 邬万新;岳利华;张燕萍;;EB病毒LMP-1与鼻咽癌上皮间质转化表型和颈淋巴结转移关系[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
10 李同英;;新疆维吾尔汉族鼻咽癌组织Rb,P16抑癌基因表达的免疫组化比较研究[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 本报记者 谢明霞;从蛋白质组学入手 探究鼻咽癌[N];健康报;2011年
2 欣华;我国首次建立鼻咽癌基因研究可视模型[N];医药经济报;2005年
3 石磊;藜芦首次被证明可降压和抗肿瘤[N];医药经济报;2007年
4 刘源源;中药藜芦首次被证明具有降压和抗肿瘤作用[N];中国中医药报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周蓉蓉;E1A基因对鼻咽癌放射增敏作用及机制研究[D];中南大学;2010年
2 何本夫;瞬时受体电位通道TRPC1在人鼻咽癌CNE2细胞增殖和侵袭作用的初步研究[D];南方医科大学;2011年
3 李萍;鼻咽癌鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤模型的建立及其在肿瘤生物学行为研究上的应用[D];广西医科大学;2010年
4 周文;鼻咽癌染色体12p12-11区段扩增基因的筛选及其功能研究[D];中南大学;2010年
5 陈舒华;鼻咽癌高癌家系体质证型的蛋白质组学研究[D];湖南中医药大学;2008年
6 楼建军;抑癌基因单核苷酸多态性与鼻咽癌遗传易感性研究[D];广西医科大学;2012年
7 苏波;鼻咽癌临床进展过程中转录因子活性谱动态变化规律研究[D];中南大学;2010年
8 肖哲锋;不同分化程度的鼻咽癌组织定量蛋白质组学研究[D];中南大学;2010年
9 王路;EBNA1在鼻咽癌转移中的作用及分子机制研究[D];南方医科大学;2011年
10 阮林;鼻咽癌表皮生长因子受体信号通路的磷酸化蛋白质组学研究[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 廖维婷;Cyr61在鼻咽癌中的表达及与不同中医证型相关性的研究[D];广州中医药大学;2011年
2 李锡清;鼻咽癌新生脉管及其临床病理意义[D];桂林医学院;2010年
3 邓泽锋;鼻咽癌颈椎破坏的临床特征及预后分析[D];南昌大学;2011年
4 侯吉光;影响鼻咽癌预后因素分析[D];吉林大学;2011年
5 张晓静;影响鼻咽癌放射治疗预后因素分析[D];广西医科大学;2012年
6 张丽煌;Survivin,Bcl-2,Pml mRNA的表达及其与鼻咽癌临床分期及预后的关系[D];昆明医学院;2011年
7 邓玲;角蛋白19表达与鼻咽癌临床病理特征的关系研究[D];南华大学;2010年
8 张锋;己糖激酶2在鼻咽癌组织中的表达[D];华中科技大学;2011年
9 刘彬;整合素α_v、β_3和bFGF与鼻咽癌浸润转移的相关性研究[D];广西医科大学;2010年
10 刘新强;噬菌体随机肽库筛选鼻咽癌患者血清肿瘤标记物的实验研究[D];广西医科大学;2011年
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