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《中南大学》 2010年
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膀胱起搏点及其与逼尿肌不稳定的关系初探

何芊  
【摘要】: 逼尿肌不稳定(detrusor instability, DI)是临床上最常见的膀胱功能障碍,发生率极高,在下尿路梗阻患者中高达39%,可引起尿频、尿急、急迫性尿失禁等临床症状,对患者的生活质量造成了很大的影响,严重者甚至会导致肾、输尿管积水和肾功能损害。然而令人遗憾的是,由于DI的发病机制尚不明确,现治疗DI的药物效果均不能让人满意。 最新的研究已经证明膀胱逼尿肌是一种具有特殊的肌源性兴奋性的组织。逼尿肌自身兴奋性的改变很可能与DI的发生有着密切的关系。而膀胱这种兴奋的起源则很可能是与胃肠道Cajal间质细胞相类似的膀胱ICCs样细胞。而若膀胱ICCs样细胞要控制逼尿肌在发生DI时协调一致收缩,则应该有一个主要的膀胱起搏点,但相关研究结果尚未见报道。 本课题通过建立大鼠的DI模型,并研究DI大鼠膀胱ICCs样细胞在顶、体、底及三角区四个不同部位与对照组相比在数目、功能、兴奋性及信号传导各个方面的变化特点,从而初步确定膀胱起搏点的位置,并对其与逼尿肌不稳定的关系作一个系统的探讨,希望对逼尿肌不稳定的发病机制及相关治疗的研究提供一定的借鉴。 目的:建立大鼠逼尿肌不稳定模型并进行评估,为后续的对逼尿肌不稳定的深入研究提供一个可靠的实验平台。 方法:选取雌性wistar大鼠25只,随机分为实验组15只和对照组10只。实验组大鼠行膀胱出口部分结扎术建立模型,术后6周对两组大鼠进行充盈性膀胱测压并评估尿动力学检测结果。 结果:建模组15只大鼠术后2只死亡,剩余13只大鼠于术后第6周行充盈性膀胱测压,结果9只出现逼尿肌不稳定的表现,DI发生率为69.2%,2只未发生DI,2只膀胱测压未见明显收缩波。测压结果分析,DI组大鼠的膀胱排尿压、膀胱容量、排尿量、残余尿比对照组均显著增加。 结论:逼尿肌不稳定大鼠的膀胱功能在梗阻早期有明显的代偿性增强。对大鼠膀胱出口进行部分结扎并在术后6周左右麻醉下行插管测压是建立逼尿肌不稳定模型更为简便、可靠并可广泛推广的方法。 目的:检测DI组大鼠与对照组大鼠相比膀胱不同部位ICCs样细胞数目及功能上的变化特点。 方法:(1)通过特异性c-kit免疫荧光染色鉴定大鼠膀胱中的ICCs样细胞,并比较DI组与正常大鼠膀胱顶部、体部、底部及三角区ICCs样细胞的分布差异及两组大鼠间相同部位细胞数量上的变化幅度;(2)运用Western blot法从蛋白水平比较两组大鼠内各个不同部位及两组大鼠间相同部位ICCs样细胞的c-kit表达差异。 结果:(1)DI组及对照组膀胱顶部ICCs样细胞数目均显著大于其他三个部位,而DI组各个部位的细胞数目均较对照组明显增加,顶部的增长幅度最大;(2)DI组大鼠各部位c-kit蛋白表达较对照组相应部位明显增加。对照组大鼠膀胱各部位c-kit蛋白表达无显著差异,DI组大鼠膀胱顶部的c-kit表达明显多于其它三个部位,而其它三个部位之间的c-kit表达无显著差异。 结论:大鼠膀胱顶部的ICCs样细胞在DI时在数量上及c-kit表达上与其它部位有明显差异,且较正常大鼠相同部位的变化也最明显,证实了膀胱ICCs样细胞在DI时细胞数量和功能明显增强,也提示膀胱顶部很可能是膀胱起搏点的位置所在。 目的:检测DI组大鼠与对照组大鼠相比膀胱不同部位ICCs样细胞兴奋性的变化特点。 方法:(1)通过免疫荧光双标技术鉴定膀胱ICCs样细胞表达HCN2通道蛋白;(2)通过Wetern blot及RT-PCR技术从蛋白及基因水平分别检测两组大鼠内各个不同部位及两组大鼠间相同部位ICCs样细胞的HCN2表达差异。 结果:(1)膀胱ICCs样细胞有通道蛋白HCN2的表达;(2)DI组大鼠各部位HCN2蛋白表达较对照组相应部位明显增加。对照组大鼠膀胱各部位HCN2表达无显著差异,DI组大鼠膀胱顶部的HCN2的表达明显多于其它三个部位,而其它三个部位之间的HCN2表达无显著差异。 结论:大鼠膀胱顶部的ICCs样细胞在DI时在HCN2的转录及翻译水平上与其它部位有明显差异,且较正常大鼠相同部位的变化也最明显,进一步证实了膀胱ICCs样细胞在DI时细胞兴奋性明显增强,也再一次证明了膀胱起搏点很可能在膀胱顶部。 目的:检测DI组大鼠与对照组大鼠相比膀胱不同部位组织中信号传导的变化特点。 方法:(1)通过免疫荧光双标技术鉴定缝隙连接蛋白connexin43的分布情况;(2)通过Wetern blot技术从蛋白水平比较两组大鼠内各个不同部位及两组大鼠间相同部位逼尿肌组织中connexin43的表达差异。 结果:(1)膀胱逼尿肌组织中有connexin43蛋白的表达,且主要存在于膀胱ICCs样细胞上;(2)DI组大鼠各部位connexin43表达较对照组相应部位明显增加。对照组大鼠膀胱各部位connexin43表达无显著差异,DI组大鼠膀胱顶部的connexin43比其它三个部位明显增强,而其它三个部位之间的connexin43表达无显著差异。 结论:首次发现大鼠膀胱顶部的ICCs样细胞在DI时缝隙连接蛋白connexin43表达与其它部位有明显差异,且较正常大鼠相同部位的变化也最明显,进一步证实了膀胱ICCs样细胞在DI时信号传递变得更为活跃,也间接证明了膀胱顶部是电活动最强烈的部位。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R694.5

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