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《中南大学》 2010年
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CEA及CK20的不同检测方法对结直肠癌诊断及预后评估的初步探讨

龚学军  
【摘要】: 背景 结直肠癌是最常见的消化道肿瘤之一,结直肠癌患者实行了根治性手术后,仍会有相当一部分的患者不可避免的出现复发,术后5年生存率一直徘徊在45%-55%之间。 细胞角蛋白20 (cytokertin20,CK20)是分布于外胚层起源细胞中的中间纤维丝,为细胞骨架的组成部分之一。CK20具有更为严格的上皮组织特异性。正常组织中,CK20见于肠粘膜细胞,胃粘膜及幽门腺体细胞,十二指肠粘膜细胞,泌尿系伞状细胞,表皮M erkel细胞,而其它组织均为阴性。CK20在细胞发生化生、恶变、肿瘤转移、体外培养等异常时,这种表达持续存在。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)是一种重要的肿瘤相关抗原和国际公认的肿瘤标记物,相对分子质量为180,000的胚胎性癌蛋自,广泛地存在于上皮源性恶性肿瘤组织中,在90%的胃肠道癌,60%的胰腺癌、50%的乳腺癌,70%的非小细胞肺癌中有较高的表达。 目的 对CEA和CK20在结直肠癌不同组织的表达及它们之间的关系做出初步研究,探讨两者与结直肠癌临床和病理之间的关系。 方法 采用免疫组织化学法分别检测CEA和CK20蛋白在结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织、肠系膜淋巴结组织及正常肠粘膜组织中的表达。 结果 CEA和CK20蛋白在组织中的表达定位于细胞浆和细胞膜。除正常对照组为阴性外其余各组CEA蛋白均呈不同程度的表达。CEA在癌组织中的总阳性表达率为92.86%;癌旁组织组CEA的表达高于肠系膜淋巴结组。包括正常对照组在内各组CK20蛋白均有不同程度的表达,癌组织组CK20的表达高于癌旁组织组,癌旁组织组的表达高于正常对照组的表达,正常对照组的表达高于肠系膜淋巴结组。 结论 1、CEA在各种不同结直肠癌组织中均有不同程度的表达,正常结肠粘膜无表达。其在癌组织中的表达与肿瘤的Dukes分期有关。 2、CK20在正常结肠粘膜及结直肠癌组织中均有不同程度的表达,其在癌组织中的表达与有无淋巴结转移有关。 背景 结直肠癌出现转移和复发与肿瘤的隐性微转移(occult micrometastases)及循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCS)密切相关,目前常用检测CTCS的技术有免疫细胞化学法、逆转录聚合酶链反应、流式细胞术等方法。由于这些方法或较费时、或程序复杂、或检查结果假阳性率高,难以推广应用于临床。已经出现一些新的方法,如实时荧光定量PCR、蛋白指纹图谱技术等。但以上的方法实验成本较高,目前还难以适应临床的实际需要,近年来,免疫传感器分析法由于其灵敏度高、选择性好和结构简单等特点而得到了越来越广泛的重视。免疫传感器是基于检测抗原-抗体结合的一种高选择性生物传感器。本实验首次采用免疫传感器分析法检测结直肠癌患者血清中CEA、CK20的表达。 目的 初步探讨准确性、特异性高且简便实用的CEA、CK20检测方法以期改善结直肠癌诊断及预后评估。 方法 分别采用酶联免疫法、实时荧光定量PCR及免疫传感器分析法序列性联合检测结直肠癌患者不同组织及外周血中CEA及CK20的表达,以探讨其在结直肠癌的诊断及预后评估中的价值。 结果 实时荧光定量PCR技术结合免疫传感器及ELISA等方法对结直肠癌患者外周血CEA、CK20及不同组织CEAmRNA、CK20mRNA进行检测发现:采用灵敏度较高的realtime-PCR有利于提高基因检测阳性率,尤其是外周血CEAmRNA的阳性率从57.14%提高到89.28%;Dukes A, B期的15例患者中,通过CK20的免疫组化染色发现有3例患者(74个淋巴结)有微转移,进一步检测CK20mRNA的拷贝表达发现有9例患者(155个淋巴结)有微转移;CEA和CK20免疫传感器应用于临床标本的检测结果与ELISA法比较无显著性差异,尽管灵敏度和准确性不及realtime-PCR,但特异性要强于realtime-PCR,且其阳性率还高于ELISA法,CEA和CK20免疫传感器能用于血清CEA的定量检测。 结论 一、改进检测方法能提高结直肠癌患者外周血CEA、CK20的阳性率,能为诊断及预后评估提供帮助。 二、realtime-PCR检测肠系膜淋巴结CK20mRNA的表达对确定结直肠癌患者的分期有重要的价值,对预后的评估也有一定意义。 三、首次成功建立CEA、CK20的多巴胺化学氧化原位包埋法免疫传感器,并应用于检测结直肠癌患者外周血CEA、CK20。 背景 决定结直肠癌患者预后的最重要指标是肿瘤的浸润深度与淋巴结转移的程度。但是,在部分实施了根治性手术的结直肠癌患者中,经病理学常规检查未发现淋巴结转移者仍会发生转移和复发,有研究认为该现象与结直肠癌淋巴结微转移有关。 1992年UICC将隐匿性转移(occult metastasis)或微转移(micrometastasis, MM)限定为单个转移肿瘤细胞或转移肿瘤细胞团直径2 mm。多数文献报告将常规组织学检查未发现转移灶而经免疫组化或分子生物学技术检测发现的淋巴结转移灶定义为淋巴结微转移。因此,淋巴结微转移目前尚无统一的标准。 本研究的前面两部分实验已经证明采用免疫组化、ELISA、免疫传感器、realtime-PCR等方法检测结直肠癌患者外周血及肠系膜淋巴结中CEA、CK20及CEAmRNA、CK20mRNA,结果发现循环血液微转移灶及淋巴结微转移灶。 目的 探讨CEA、CK20以及CEAmRNA和CK20mRNA与微转移的关系,了解其能否成为结直肠癌分期及预后评估的有效方法。 方法 通过临床随访及临床应用统计学方法对两组测定值进行比较分析。 结果 影响预后的指标有:外周血CK20阳性率、淋巴结CK20mRNA阳性率、淋巴结CEAmRNA阳性率、术前合并梗阻或穿孔、糖尿病、肿瘤浸润深度、下切缘与肿瘤距离、送检淋巴结数目、有无淋巴结转移、术后有无化疗(p0.05)。其中淋巴结CK20mRNA阳性率、淋巴结CEAmRNA阳性率、术前合并梗阻或穿孔、肿瘤浸润深度、下切缘与肿瘤距离是影响结直肠癌预后的独立因素,而外周血CK20阳性率、术后有无化疗、糖尿病、送检淋巴结数目则未能进入Cox多因素模型。 结论采用realtime-PCR的方法检测肠系膜淋巴结的CK20mRNA表达在结直肠癌诊断及预后评估中有一定的意义和价值。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735.3

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【引证文献】
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1 苏丽娅;苏秀兰;;结直肠癌相关肿瘤标志物的研究进展[J];医学综述;2014年03期
【参考文献】
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1 ;Quantitative real-time RT-PCR detection for CEA, CK20 and CK19 mRNA in peripheral blood of colorectal cancer patients[J];Journal of Zhejiang University Science(Life Science);2006年06期
2 ;Detection of micrometastasis of gastric carcinoma in peripheral blood circulation[J];World Journal of Gastroenterology;2004年06期
3 Eeva Salminen;Salla Palmu;Tero Vahlberg;Peter J.Roberts;Karl-Owe S(o|¨)derstr(o|¨)m;;Increased proliferation activity measured by immunoreactive Ki67 is associated with survival improvement in rectal/recto sigmoid cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2005年21期
4 Katrin Hoffmann;Christiane Kerner;Wolfgang Wilfert;Marc Mueller;Joachim Thiery;Johann Hauss;Helmut Witzigmann;;Detection of disseminated pancreatic cells by amplification of cytokeratin-19 with quantitative RT-PCR in blood,bone marrow and peritoneal lavage of pancreatic carcinoma patients[J];World Journal of Gastroenterology;2007年02期
【共引文献】
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1 李宇红;安欣;向晓娟;王志强;王风华;冯芬;姜文奇;何友兼;徐瑞华;;晚期结直肠癌患者化疗后血清CEA、CA199水平一过性升高的临床意义[J];癌症;2009年09期
2 杨雪炎;熊兵红;马利;程勇;;宫颈癌微转移检测研究进展[J];包头医学院学报;2009年03期
3 陈佳慧;王崇树;;结直肠癌微转移的诊断和治疗进展[J];结直肠肛门外科;2010年04期
4 余宗林;;乳腺癌微转移的诊断现状[J];达州职业技术学院学报;2007年Z1期
5 支宇;陈绍勤;戴起宝;;大肠癌患者循环肿瘤细胞检测的研究进展[J];福建医药杂志;2008年02期
6 梁君林;万德森;潘志忠;周志伟;高枫;;Dukes’A,B期结直肠癌淋巴结微转移与复发转移的关系[J];广东医学;2007年10期
7 李萍;张祥忠;尹爱华;孙延君;何丽芳;胡素云;;消化道肿瘤患者外周血癌胚抗原mRNA水平监测与患者预后的关系研究[J];国际内科学杂志;2007年11期
8 李平栋;头颈部肿瘤患者循环肿瘤细胞的检测及展望[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;2003年05期
9 孙璟;焦洁茹;魏旭倩;赵雅洁;吴方;江石湖;;胃癌患者外周血生存素基因检测的临床意义[J];国际消化病杂志;2008年03期
10 周生余,石远凯;乳腺癌患者骨髓和外周血中潜伏肿瘤细胞的检测与临床意义[J];国外医学(肿瘤学分册);2001年03期
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1 刘旭东;RNAi-Rac1对胆管癌治疗的实验研究[D];吉林大学;2011年
2 王旻;直肠癌选择性扩大根治术的临床评价及可行性分析[D];吉林大学;2011年
3 刘宇;Periostin在胃癌侵袭和转移中的机制及临床意义的研究[D];中南大学;2011年
4 蒋敬庭;协同刺激分子B7-H4在胃癌组织中的表达及其临床意义[D];苏州大学;2011年
5 王水;乳腺癌哨兵淋巴结活检的临床和实验研究[D];南京医科大学;2002年
6 苏琪;直肠癌保肛手术的有关基因研究及保肛手术后肛门功能障碍的生物反馈治疗[D];中国医科大学;2005年
7 葛明建;实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应(fqRT-PCR)法检测外周循环肺癌细胞(CTCs)的临床应用研究[D];重庆医科大学;2005年
8 宗祥云;大肠癌微转移的实验检测及临床意义分析[D];复旦大学;2005年
9 王存;直肠癌系膜区域转移与微转移的研究[D];四川大学;2005年
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6 李坤;腹腔镜胃部手术前后腹腔冲洗液中腹腔脱落癌细胞MMP-7的相关研究[D];兰州大学;2011年
7 骆盼;结直肠癌组织中Ezrin蛋白表达与肝转移的临床实验研究[D];河北医科大学;2011年
8 张剑锋;直肠癌新辅助治疗后临床病理学特点及其对于预后的意义[D];北京协和医学院;2011年
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10 高万举;洛铂对SGC-7901细胞凋亡及Akt,PTEN,ERK mRNA表达的影响[D];郑州大学;2011年
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3 马灵筠,杨五彪,万学东,陈群力;CA125、CEA、AFP检测在结核性腹水及恶性腹水鉴别诊断中的价值[J];陕西医学杂志;2004年11期
4 周伟;黄林平;韦佳明;项灿宏;;CEA、CA199和CA242动态变化评判82例结直肠癌治疗效果及预后分析[J];肿瘤学杂志;2009年06期
5 李国胜;颜登国;张汝一;甄运寰;姬清华;程海玉;;外周血CK20 mRNA表达与结直肠癌临床病理和预后的关系[J];世界华人消化杂志;2012年21期
6 王锡山;;结直肠癌综合治疗的规范化实施[J];中国实用外科杂志;2010年04期
7 黄永坤;;结肠癌的临床治疗进展[J];中外医学研究;2012年31期
8 刘慧龙;;结直肠癌分子靶向治疗研究近况[J];中国肿瘤;2011年03期
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1 何湘帆;;手术前癌胚抗原水平:结直肠癌病人的一种预后试验[J];国际消化病杂志;1981年02期
2 曾琪华;;结直肠癌的病因[J];国际外科学杂志;1984年02期
3 ;纤维不能防止结肠癌[J];英国医学杂志(中文版);1999年03期
4 陈华江!200003,王杰军!200003,何金!210002,贾绍昌!210002,刘会敏!210002,殷广福!210002;血管内皮生长因子及其受体在结直肠癌中的表达及其意义[J];实用癌症杂志;2000年05期
5 周平红,姚礼庆,何国杰,李和平,秦新裕;微超声探头对结直肠癌术前分期的诊断价值[J];中国超声医学杂志;2002年02期
6 陈达民;老年多发性结直肠癌:手术与尸检病例的回顾性研究[J];国外医学.消化系疾病分册;2002年02期
7 李新宇,王杉,马向涛,叶颖江,崔志荣;细胞核因子κB抑制蛋白α的表达与结直肠癌临床病理特征的关系[J];中华普通外科杂志;2003年08期
8 Moore H.G. ,Shoup M. ,Riedel E. ,J.G.Guillem,李康;结直肠癌骨盆复发:切除可能性的决定因素[J];世界核心医学期刊文摘.胃肠病学分册;2005年04期
9 肖亮;施健;谢渭芬;;氟脱氧葡萄糖-正电子发射断层成像术在诊治结直肠癌肝转移中的作用[J];胃肠病学;2006年02期
10 宁泉波;蔡鹏;刘琪芳;;左半结直肠癌梗阻Ⅰ期切除吻合的临床应用观察[J];中国冶金工业医学杂志;2007年03期
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1 徐芳英;方义湖;黄琼;来茂德;;微乳头结构和肿瘤芽在结直肠癌发展和预后中的意义[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
2 黄彦钦;蔡善荣;张苏展;李其龙;马新源;何玉芳;周晓红;郑树;;中国结直肠癌人群筛查方案的应用价值初探[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
3 王建平;丁智勇;王颖;;腹腔镜治疗结直肠癌42例体会[A];2011年浙江省肛肠外科学术大会暨结直肠肛门疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
4 潘益峰;张明五;姜侠;张善春;金明娟;马新源;李其龙;余运贤;陈坤;;Toll样受体4基因多态性与结直肠癌易感性的相关性研究[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
5 王贵玉;陈英罡;刘正;郁雷;汤庆超;马天翼;王锡山;;结直肠癌的临床分期更新意义及相关分子标记物[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
6 张琪;张宇;裘华森;叶晓峥;魏星;;极高龄结直肠癌患者围手术期处理体会[A];第七届全国中西医结合围手术期医学专题研讨会全国中西医结合围手术期快速康复新进展培训班广东省中医药学会外科学会会议论文集[C];2012年
7 李晓东;殷咏梅;;双调蛋白与表皮调节素在结直肠癌患者血清与肿瘤组织中的表达及两者与临床病理因素的相关性[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
8 周雷;介建政;宋新;唐弢;王文跃;;结直肠癌肝转移的手术治疗[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
9 徐玉清;;结直肠癌肝转移治疗原则和进展[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会报告集[C];2011年
10 陈嘉;;结直肠癌个体化靶向治疗新理念[A];2010年江苏省抗癌协会第二届传统医学专业委员会学术研讨会资料汇编[C];2010年
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1 本报记者 罗朝淑;别让结直肠癌治疗走向“不规”路[N];科技日报;2010年
2 复旦大学肿瘤医院大肠癌外科主任 蔡三军;结直肠癌 治疗理念有更新[N];健康报;2011年
3 康艾;中国抗癌协会专家云集杭州探讨结直肠癌临床最新进展[N];大众科技报;2010年
4 记者 李天舒 通讯员 高健;根治术可提高结直肠癌患者生存率[N];健康报;2010年
5 记者 马艳红;卫生部首次发布《结直肠癌诊疗规范》(2010年版)[N];中国医药报;2010年
6 记者 田雅婷;结直肠癌有了诊疗规范[N];光明日报;2010年
7 姜澜;爱必妥可延长结直肠癌肝转移患者生存期[N];中国医药报;2011年
8 记者 白毅;大样本研究揭示结直肠癌发病规律与预后关系[N];中国医药报;2010年
9 张旭;结直肠癌肝转移治疗新途径[N];中国医药报;2011年
10 记者 胡德荣;腔镜结直肠癌术与开腹手术5年生存率一致[N];健康报;2011年
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1 韩黔峰;sFRP4、β-catenin、Cox-2、ER-β、pS2、Keratin 19蛋白和MSI基因在结直肠癌细胞中的表达[D];四川大学;2005年
2 杨桓;主要乙醇代谢酶编码基因及JWA基因单核苷酸多态性与结直肠癌遗传易感性的关联研究[D];第三军医大学;2009年
3 李天煜;结直肠癌细胞系中表观遗传修饰与p33ING1b基因转录抑制的关系[D];广西医科大学;2010年
4 张继红;Ang/Tie-2在结直肠癌中的表达及其分子机制的研究[D];吉林大学;2011年
5 刘丽;TGFβ信号网络基因遗传变异与结直肠癌发生、发展风险的分子流行病学研究[D];华中科技大学;2011年
6 陈坤;结直肠癌环境与宿主因素的流行病学研究[D];浙江大学;2003年
7 孔斌;水通道蛋白-1(AQP-1)在结直肠癌组织中的表达及其与肿瘤微血管形成的关系研究[D];河北医科大学;2010年
8 解方为;异常甲基化调控结直肠癌细胞Irinotecan代谢酶相关基因的表达及其意义[D];第三军医大学;2009年
9 刘冰;环境因素、Caspase凋亡通路相关基因多态性与结直肠癌风险的关联研究[D];浙江大学;2010年
10 马震;粪便标本基因标记物mRNA表达检测及其对结直肠癌诊断的研究[D];吉林大学;2011年
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1 王洪敏;结直肠癌肝转移的临床因素分析[D];吉林大学;2010年
2 郭晓亮;REIC/Dkk-3基因在结直肠癌中的表达及其意义[D];中国医科大学;2010年
3 江伟;FOLFIRI方案治疗老年结直肠癌安全性临床观察[D];安徽医科大学;2010年
4 陈尚忠;SOX2在结直肠癌中的表达及意义的初步研究[D];中南大学;2010年
5 石曦雯;核基质结合因子SAFB在结直肠癌发生发展中的作用及其分子机制[D];南方医科大学;2010年
6 龙结根;Testin基因在结直肠癌组织中的表达及临床意义[D];重庆医科大学;2010年
7 廖存;血清CEA阴性结直肠癌患者蛋白组学比较研究[D];广西医科大学;2011年
8 刘金星;MMP-9基因多态性与结直肠癌相关性研究[D];泸州医学院;2011年
9 张丽莉;hMLH1-93G/A基因多态性与结直肠癌的相关性研究[D];南京大学;2011年
10 孟令振;细丝蛋白A在结直肠癌中的表达及其与MMP-9的关联研究[D];河北医科大学;2011年
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