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乌司他丁对人绒毛膜癌uPA表达及侵袭的影响

李燕  
【摘要】: 【目的】检测尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, uPA)在不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3和JAR中的表达差异及尿胰蛋白酶抑制剂(urinary trypsin inhibitor,UTI)乌司他丁(Ulinastatin)对高侵袭力人绒毛膜癌JEG-3细胞中uPAmRNA的表达及细胞体外侵袭能力的影响,探讨uPA表达与绒毛膜癌侵袭转移的关系及乌司他丁在绒毛膜癌中抗侵袭转移作用及机制。 【方法】(1)体外培养不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3和JAR; (2) Matrigel体外侵袭实验检测人绒毛膜癌细胞JEG-3和JAR细胞侵袭能力,运用半定量逆转录—聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测两种细胞中uPAmRNA的表达情况,并比较其差异;(3)将高侵袭力人绒毛膜癌JEG-3细胞分别在含0U/ml 50U/ml、100U/ml、200U/ml、400U/ml、800U/ml乌司他丁的培基中培养24小时,提取细胞总RNA,运用RT-PCR方法检测不同药物浓度组JEG-3细胞中uPA mRNA的表达情况;Matrigel体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力变化,并比较各组之间的差异,分析细胞侵袭能力、uPA mRNA表达水平、药物浓度之间的关系。 【结果】(1)在两种细胞中均检测到uPA mRNA的表达,在高侵袭力JEG-3细胞中uPA mRNA表达明显强于低侵袭力JAR细胞,差异有统计学意义(P0.05);(2)不同浓度乌司他丁作用后的JEG-3细胞中均检测到uPA mRNA的表达,当药物浓度组在50U/ml时,与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);当药物浓度10OU/ml及以上时,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且各组间uPA mRNA表达差异有统计学意义(P0.05);随着药物浓度的增加uPA mRNA表达减弱,相关性分析显示uPA mRNA水平与药物浓度之间呈负相关(r=-0.862, P0.05);(3)不同浓度的乌司他丁作用后的JEG-3细胞穿膜数均减少,当药物浓度为50U/ml时,与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);当药物浓度在100U/ml及以上浓度时,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),各组间侵袭力差异亦有统计学意义(P0.05);细胞穿膜数随着药物浓度的增加而减少,随着uPA mRNA表达水平降低而减少,相关性分析显示侵袭水平与药物浓度呈负相关(r=-0.885,P0.05),细胞侵袭力与细胞中uPA mRNA的表达水平呈正相关(r=0.996,P0.05); 【结论】(1)uPA mRNA的表达在高低侵袭力绒毛膜癌细胞中存在明显的差异,uPA mRNA表达水平能影响绒癌细胞的侵袭能力;(2)乌司他丁能有效抑制uPA基因在高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞中的表达;(3)抑制uPA mRNA的表达,可以降低JEG-3细胞的体外侵袭力。


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