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《湖南农业大学》 2011年
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茶氨酸的分离机理与定量分析及抗衰老功能研究

龚雨顺  
【摘要】:茶氨酸是茶叶中的非蛋白氨基酸,占茶叶游离氨基酸的50%。茶氨酸具有特殊的鲜爽味,能缓解茶叶的苦涩味,是评价绿茶品质的重要指标。由于具有保护神经等一系列药理功能,茶氨酸作为食品添加剂和保健品倍受人们关注。为了为茶氨酸的有效开发利用提供科学理论支撑,本论文在前人基础上对茶氨酸检测方法、离子交换色谱对茶氨酸的吸附机理、茶氨酸抗衰老以及与衰老相关的疾病等药理功能等方面进行了系统研究。主要研究结果如下: (1)建立了一种反相离子对高效液相色谱法快速测定茶叶中茶氨酸的检测方法。茶叶样品制备只需超声10min。该方法以全氟辛酸(PDFOA,2mmol/L)为离子对试剂、乙腈-水(12%:82%)为流动相,检测波长为200nm,进样体积为10μL。在此分离条件下,茶氨酸的最低定量限、最低检测限分别为15.6ng与5.1ng。抗干扰试验表明,茶叶中其它成分对茶氨酸的测定并无干扰。所建立方法的样品制备方法简单,只需超声提取10min。该测定方法准确,灵敏,并具高回收率,适用于茶叶中茶氨酸的快速检测。 (2)为了采用离子交换树脂对茶氨酸进行吸附分离提供理论依据,研究了离子交换树脂对茶氨酸的吸附行为。结果表明,pH对茶氨酸在732阳离子交换树脂、717阴离子交换树脂和HD-8大孔强酸性阳离子交换树脂三种离子交换树脂上的吸附量影响都不大;阳离子树脂的吸附量比阴离子交换树脂的大10倍以上,大孔强酸性树脂的吸附量比普通凝胶型阳离子交换的吸附树脂量稍大;在303-323K与研究浓度范围内,HD-8大孔强酸性树脂对茶氨酸的吸附行为很好地符合Freundlich吸附等温方程;动力学研究表明HD-8大孔强酸性树脂对茶氨酸的吸附速率受液膜扩散和化学反应等因素的共同控制。 (3)衰老以及与衰老相关的疾病已经成为日趋严重的医学甚至社会问题。以秀丽线虫作为模式动物研究茶氨酸的抗衰老作用。研究结果表明,茶氨酸不能延长正常条件下线虫的寿命,但可以显著延长热应激条件下秀丽线虫寿命的12.8%。通过检测茶氨酸对带有绿色荧光蛋白的秀丽线虫CL2070在热应激下产生的热休克蛋白表达影响,发现茶氨酸能上调热应激后热休克蛋白HSP-16.2的表达。采用蛋白印迹技术检测野生型秀丽线虫N2中HSP-16.2的表达水平,也得到了一致的研究效果。这样从蛋白水平验证了茶氨酸能延长热应激条件下秀丽线虫寿命的原因。 (4)以秀丽线虫CL2006为研究模型,研究了茶氨酸对阿尔茨海默病的保护作用。研究表明茶氨酸能减轻CL2006中Aβ1-42介导的瘫痪行为,下调CL2006体内的Aβ1-42mRNA表达量,并能减轻由此引起的氧化应激水平,降低体内活性氧的产生。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R284.1;S571.1

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【引证文献】
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3 景平;茶氨酸应用前景广阔[N];健康报;2008年
4 徐铮奎;茶氨酸:氨基酸的佼佼者[N];医药经济报;2006年
5 徐铮奎;茶氨酸:21世纪“新天然镇静剂”[N];医药经济报;2007年
6 本期主讲人:江南大学食品科学与技术国家重点实验室教授 江波;茶氨酸及其生理活性(上)[N];中国食品报;2009年
7 徐铮奎;儿童多动症试试“茶氨酸”[N];大众卫生报;2006年
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9 主讲人:江南大学食品科学与技术国家重点实验室教授 江波;茶氨酸及其生理活性(中)[N];中国食品报;2009年
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