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《湖南农业大学》 2012年
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芥菜型油菜黄籽候选基因BjuA.YSC表达载体构建和遗传转化

汤敏  
【摘要】:研究表明,芥菜型油菜黄籽形成涉及类黄酮合成基因。初步研究表明芥菜型油菜种皮颜色黄黑籽差异的形成受到MYB类转录因子、bHLH类转录因子、WD40蛋白等协同调控,并且不断发现有新的调控基因影响原花色素的合成,如KAN4等转录因子。本研究以本实验室克隆的芥菜型油菜A9染色体上黄籽候选基因BjuA.YSC为研究对象,通过互补试验研究BjuA.YSC基因的功能,从而揭示油菜黄籽性状形成的分子机制,为甘蓝型黄籽油菜育种提供科学依据。 本研究构建了含黄籽候选基因的表达载体,以芥菜型油菜四川黄籽无菌苗的下胚轴为外植体,利用农杆菌介导法进行转化,抗性筛选和PCR分析鉴定目的基因已整合至受体植株中。试验结果如下: 1、通过酶切、连接等分子克隆技术,首次将BjuA.YSC整合入pBI121载体中,构建成表达载体pBI-BjuA.YSC。 2、建立了以下胚轴为外植体、农杆菌介导法的芥菜型油菜遗传转化体系。 3、从6400个芥菜型油菜四川黄籽下胚轴外植体中,共获得抗卡那霉素的再生苗24株,经PCR检测证实有外源基因整合的阳性植株为3株,转化效率为0.046%。3株转基因植株发育正常,能开花、结实,但T0代植株所结种子仍为黄色。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S565.4

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【参考文献】
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