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《湖南农业大学》 2013年
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仙人掌多糖明胶微球的工艺研究

程杰  
【摘要】:仙人掌多糖已经被证实具有多种功效。为了促进其开发和利用,探索并优化了仙人掌多糖明胶微球的制备工艺,旨在提高其载药量与包封率和增加多糖的稳定性。本研究采用乳化-交联法制备仙人掌多糖明胶微球(ODP-GMS),选取固化剂戊二醛添加量、明胶浓度、水油比(W/O)比值、乳化剂添加量、仙人掌多糖(ODP)浓度五个因素进行单因素实验,在此基础上进行正交实验与响应面实验;通过光学显微镜观察ODP-GMS的显微特征、粒径,并进行溶胀度测试、缓释效果评价以及稳定性考察;测定ODP和不同释放程度ODP-GMS对·OH、DPPH、O2·-三种自由基的清除率。结果表明:①固化剂戊二醛最佳添加量为1%,水相分散相中明胶浓度最适宜为10%。通过正交实验发现,影响仙人掌多糖明胶微球制备的因素为:多糖添加量乳化剂添加量W/O比值;最佳组合为W/O比例为1:3,乳化剂添加量1%,多糖添加量为10mg/mL,验证性结果载药量与包封率平均分别为7.47%与91.38%,实验重现性良好。响应面分析结果发现最佳提取条件:W/O比值为1:3.67,乳化剂含量1.06%,ODP浓度11.47mg/mL,由模型预测载药量达到7.756%。进一步提高了载药量和精确了工艺条件。②乳化-交联法制得的ODP-GMS球体为圆整球形,大小较为均匀,球体之间无粘连,分散较好。通过光学显微镜观察可以确定其结构为仙人掌多糖集中分布在球心,少许以小泡形式分散在球体各处的明胶载体微球;扫描电镜观察ODP-GMS微球形态表面光滑圆整,成球率高,分散度好。粒径集中在7.24μm附近,符合正态分布曲线。③水溶解2h后微球直径相比之前膨胀了22.81%±0.45;质量增加到以前的40.3%。ODP-GMS在PBS溶液中释药曲线符合Higuchi方程,24h内均匀释放,累积释放量达到85%。ODP-GMS在盐酸中的缓释效果较差,12h内累计释放率达到90%,释药曲线较为适合一级动力学方程和Higuchi方程。④ODP-GMS稳定性良好,不同温度和湿度对其载药量的影响较小。加速实验考察3个月后不同温度储存的ODP-GMS各参数间都无明显区别,证明本实验制得的ODP-GMS在常温下能较好的储存。⑤ODP-GMS对·OH、DPPH·、O2·-三种自由基的清除作用都较明显,释放12h后对DPPH的清除率达到50%,全部释放后与等量新鲜制备的ODP抗氧化能力相当。以上结果说明本实验乳化交联法制备ODP-GMS的方法具有可行性。
【关键词】:仙人掌多糖 明胶微球 工艺优化 抗氧化
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:TQ461
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-7
  • 目录7-11
  • 第一章 绪论11-26
  • 1 仙人掌多糖的研究现状11-14
  • 1.1 仙人掌多糖的药理作用11-13
  • 1.2 ODP的基本性质13-14
  • 1.2.1 ODP的结构组成13
  • 1.2.2 ODP的水溶性13-14
  • 1.2.3 ODP的其他性质14
  • 1.3 ODP剂型开发14
  • 2 明胶微球化的技术14-16
  • 2.1 药物微囊化的介绍15
  • 2.2 明胶微球的优点15-16
  • 3 明胶微球的制备方法16-25
  • 3.1 喷雾交联法16
  • 3.2 喷雾干燥法16
  • 3.3 冷冻干燥法16-17
  • 3.4 单凝聚法17
  • 3.5 复凝聚法17
  • 3.6 乳化法17-24
  • 3.6.1 乳液的分类18-19
  • 3.6.2 乳液的制备方法19-21
  • 3.6.3 乳化剂的应用21-22
  • 3.6.4 乳化工艺参数的优化22-23
  • 3.6.5 明胶微球的稳定化23-24
  • 3.7 关于微球的检测和分析24-25
  • 3.8 药物缓释25
  • 4 本实验研究的目的与内容25-26
  • 第二章 仙人掌多糖明胶微球的工艺优化26-42
  • 1 实验材料26
  • 1.1 主要材料及试剂26
  • 1.2 主要仪器26
  • 2 实验方法26-29
  • 2.1 溶液的配制27
  • 2.2 ODP的提取27
  • 2.3 多糖含量测定标准曲线的绘制27
  • 2.4 多糖换算因子的测定27-28
  • 2.5 仙人掌多糖微球制备28
  • 2.6 微球包封率及载药量的测定28
  • 2.7 仙人掌多糖微球化条件优化28-29
  • 2.7.1 微球固化剂的选择28
  • 2.7.2 W/O比的影响28-29
  • 2.7.3 连续相中乳化剂浓度的影响29
  • 2.7.4 分散相中仙人掌多糖浓度的影响29
  • 2.7.5 分散相中明胶浓度的影响29
  • 2.8 仙人掌多糖微球正交实验设计29
  • 2.9 仙人掌多糖微球响应面实验设计29
  • 3 实验结果与分析29-40
  • 3.1 多糖含量测定的标准曲线29-30
  • 3.2 单因素试验结果及分析30-35
  • 3.2.1 固化剂对ODP-GMS的影响30
  • 3.2.2 W/O对ODP-GMS的影响30-31
  • 3.2.3 连续相中乳化剂浓度ODP-GMS的影响31-32
  • 3.2.4 分散相中仙人掌多糖浓度对ODP-GMS的影响32-33
  • 3.2.5 分散相中明胶浓度的影响对ODP-GMS的影响33-35
  • 3.3 正交试验结果及分析35-36
  • 3.4 仙人掌多糖明胶微球验证试验结果36
  • 3.5 单独分析包封率和载药量的正交结果36
  • 3.6 响应面试验结果及分析36-40
  • 4 讨论40-41
  • 本章小结41-42
  • 第三章 仙人掌多糖明胶微球的表征42-54
  • 1 实验材料42
  • 1.1 主要材料及试剂42
  • 1.2 主要仪器42
  • 2 实验方法42-44
  • 2.1 溶液的配制42-43
  • 2.2 ODP-GMS形态观察43
  • 2.3 ODP-GMS粒径检测43
  • 2.4 ODP-GMS溶胀性测试43-44
  • 2.5 ODP-GMS体外缓释作用44
  • 2.5.1 ODP-GMS PBS缓释作用44
  • 2.5.2 ODP-GMS酸溶液缓释作用44
  • 2.6 初步稳定性考察44
  • 2.6.1 温度对微球稳定性的影响44
  • 2.6.2 湿度对微球稳定性的影响44
  • 2.6.3 加速试验44
  • 3 结果与分析44-51
  • 3.1 ODP-GMS形态观察44-46
  • 3.2 ODP-GMS粒径检测46
  • 3.3 ODP-GMS溶胀性测试46-47
  • 3.4 ODP-GMS体外缓释作用47-50
  • 3.4.1 ODP-GMS PBS缓释作用47-48
  • 3.4.2 ODP-GMS在酸性溶液中缓释作用48-50
  • 3.5 初步稳定性考察50-51
  • 3.5.1 温度对微球稳定性的影响50
  • 3.5.2 湿度对微球稳定性的影响50
  • 3.5.3 加速试验50-51
  • 4 讨论51-52
  • 本章小结52-54
  • 第四章 仙人掌多糖明胶微球体外抗氧化性研究54-60
  • 1 实验材料54
  • 1.1 实验材料54
  • 1.2 实验仪器54
  • 2 实验方法54-56
  • 2.1 溶液的配制54-55
  • 2.2 ODP-GMS中仙人掌多糖的提取55
  • 2.3 清除·OH的测定55
  • 2.4 清除DPPH·测定方法55
  • 2.5 清除超氧阴离子自由基(O_2~-)测定方法55-56
  • 3 结果与分析56-58
  • 3.1 仙人掌多糖对·OH清除作用56
  • 3.2 ODP-GMS对DPPH·清除作用的影响56-57
  • 3.3 仙人掌多糖清除超氧阴离子自由基O_2~-的能力57-58
  • 4 讨论58-59
  • 本章小结59-60
  • 本文主要创新点60
  • 后续研究思路60-61
  • 参考文献61-71
  • 附录71-72
  • 致谢72-73
  • 作者简介73

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