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《湖南农业大学》 2000年
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苎麻体细胞杂交研究

熊兴耀  
【摘要】: 苎麻是我国特产的纤维作物和重要的出口创汇产品之一, 长期以来以营养系选择和实生苗选择为主要途径进行品种改 良。植物体细胞杂交技术为农作物的品种改良开壁了新途径, 已在许多作物上进行了成功的研究,但苎麻上直今尚无成功报 道。本文以苎麻属的白叶种苎麻(Boehmeria nivea Baud)和悬 铃木叶苎麻(B.tricuspis Makino)两个种的五个基因型为试材, 进行了苎麻体细胞杂交研究。 1.茎段愈伤组织和叶肉经酶解分离获得了大量的原生质 体。酶液中纤维酶和果胶酶的适宜浓度分别为6%和0.2%;增 加0.7molL~(-1)的甘露醇有利于保持原生质体的活力。 2.PEG融合液和电融合都能促使苎麻的原生质体发生融 合,电融合的原生质体融合频率较高。电融合的主要参数为: 电流强度200v/m,脉冲频率1.0msecs,原生质体密度5× 10~4ml~(-1),悬浮液CaCl_2浓度0.5mM。 3.用KPR培养基和B_5培养基对融合后的原生质体进行培 养,效果良好。先用半固体化的KPR分层培养,待微形愈伤组 织形成后,将其转移到加有[2mgL~(-1)NAA+1mgL~(-1)2.4-D+1mgL~(- 1)ZT+2%CM+200mgl~(-1)水解乳蛋白+2%葡萄糖+1%蔗糖+0.8%琼 脂]的B_5培养基培养,愈伤组织生长迅速。 4.将长大的愈伤组织接种到分化培养基中诱导产生新稍。 新稍长到1cm高后,转移到生根培养基生根。分化培养基为 MS+2.0mgL~(-1)BAP+0.5mgL~(-1)IBA+3%葡萄糖;生根培养基为 1/2MS+0.3mgL~(-1)IBA+0.05mgL~(-1)BAP+0.05%活性炭+2%蔗 糖。 5.融合后得到的66株再生植株,经染色体观察和PAPD分 析,确认有体细胞杂种16株,分属于9个组合。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:S563.1

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【引证文献】
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1 李玉珠;苜蓿与百脉根原生质体培养及体细胞杂交的研究[D];甘肃农业大学;2012年
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1 何谦;红麻耐盐体细胞变异体的诱导与植株再生研究[D];湖南农业大学;2006年
2 张娜;苎麻原生质体培养技术研究[D];华中农业大学;2007年
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【参考文献】
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7 袁华玲;二倍体马铃薯原生质体培养及体细胞杂交的研究[D];中国农业科学院;2008年
8 崔海峰;小麦体细胞杂交中外源染色质的消减与渐渗研究[D];山东大学;2008年
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8 安骥飞;苜蓿与百脉根细胞融合的研究[D];西南农业大学;2005年
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【二级参考文献】
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7 郭阳;主要苎麻品种亲缘关系及自交S1代变异研究[D];中国农业科学院;2013年
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