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《湖南农业大学》 2003年
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番木瓜组织培养及种质超低温保存研究

曾继吾  
【摘要】: 番木瓜(Carica papaya L.)是一种重要的热带亚热带水果。本研究以番木瓜为试验材料,研究了影响番木瓜茎尖培养、体细胞胚胎发生和种质超低温保存的一些因素,为番木瓜组织培养和种质保存提供依据。主要研究结果如下: 1.筛选出比较适宜番木瓜茎尖培养的激素组合。以MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+ADS40mg/L+GA_31.0mg/L的激素组合最佳,增殖系数每4周可达6.8倍,这样的小芽可以在MS+IBA2.0mg/L+活性碳(AC)0.2%培养基上正常生根,生根后可移栽成活。 2.番木瓜的子叶和幼胚二种外植体均能诱导愈伤组织、通过体胚发生途径实现植株再生。外植体在MS+2,4-D1.00(mg/L)+BA0.30(mg/L)+NAA0.05(mg/L)培养基上诱导的愈伤组织最佳。添加一定浓度的硫酸腺嘌呤(ADS)、水解酪蛋白(CH)可以促进番木瓜体胚发生。再生植株在生根培养基上生根后,可移栽成活。 3.首次采用玻璃化法成功保存了番木瓜茎尖。其保存方法为:3~5cm长的茎尖,在含有5%DMSO培养基预培养3d,然后剥取1.5~2.5mm长的茎尖,先在室温下用60%PVS_2溶液预处理40~50min,再用100%PVS_2处理30min,换一次新鲜的PVS_2溶液后,迅速投入到液氮中。保存24h后,在40℃水浴中化冻,用1.2mol/L的蔗糖+MS基本培养基洗涤两次,后接种到再生培养基上,可获得53.3%的存活率和51.6%的植株再生率。保存后的番木瓜无菌小苗在形态上与对照一致,通过流式细胞仪检测,染色体未发生变异。正常生根后可以移栽成活。 4.应用透射电子显微镜对番木瓜超低温保存过程中细胞超微结构变化进行观察。发现细胞在经过预培养、60%PVS_2的预处理和PVS_2脱水处理的过程中,细胞质壁分离程度逐渐加重。在液氮中保存后,有一部分细胞的细胞壁、细胞膜以及细胞核膜均有不可逆的损伤,可能是部分细胞致死的原因之一。也有部分细胞结构完整,虽然细胞结构发生了变化,但是程度不深,是可逆的伤害,在恢复培养时会自动修复,由此再生出植株。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S667

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前4条
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中国硕士学位论文全文数据库 前5条
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【二级引证文献】
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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