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《湖南农业大学》 2004年
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藤茶活性成分的分离鉴定及药理作用研究

何桂霞  
【摘要】:随着社会经济和人们生活水平的提高以及老龄化社会的加速到来,“健康”便成了当今世界研究的主题。目前在生命科学中,氧自由基和抗氧化剂的研究是近年来生物学和医学界非常活跃、非常引人关注的一个研究领域。体内氧自由基产生过多会导致细胞损伤,引起心脏病、脑缺血、癌症和衰老等严重疾病。所以寻找天然的利于人体吸收的清除体内自由基的外源性清除剂,对防止疾病的发生和保持机体健康是十分有益的。 藤茶(Ampelopsis grossedentata)属葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物,我国壮族和瑶族人民将其幼嫩茎叶制成保健茶,用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疮疖等症,夏天泡茶数同不馊,有“神茶”之称,近年来引起人们极大的关注。经化学成分分析,发现滕茶是一种富含黄酮类化合物的一种特殊植物,有效部位黄酮总量达40%左右,其中二氢杨梅素(Dihydromyricetin,简称DMY)含量高达25%左右。药理实验证明藤茶总黄酮及其中主要成分DMY具有镇痛、止咳、广谱抗菌、降血压、降血脂、降血糖、抑制肿瘤等多种功效。因此研究藤茶的活性成分及药理作用,对于全面开发、综合利用这一独特的天然植物资源具有非常重要的理论意义和实际应用价值。 对藤茶化学成分的前期研究中已经分出了DMY、杨梅素(Myricetin)等成分。通过药理实验追踪和化学实验发现仍有一些有效成分未得到分离鉴定,同时对其中富含的藤茶总黄酮(TCF),特别是DMY的抗氧化作用及其稳定性的研究等均未见系统报道。本项课题针对目前藤茶研究中亟待解决的几个问题,选择藤茶为材料,对其所含主要化学成分进行了研究,分离得到了8个化合物,其中6个为首次从藤茶中发现的化合物;建立了藤茶中总黄酮、DMY含量测定的方法,并研究了它们与产地及季节的关系;对藤茶中总黄酮和DMY在动物体内外的抗氧化活性进行了系统的研究;对DMY自身的稳定性进行了考察;对藤茶地上营养器官的形态结构及其黄酮的组织化学定位进行了初步的研究。本论文的研究结果为系统、合理、全面地开发和利用藤茶提供了科学依据。实验研究结果归纳如下: 1.未知活性成分的分离鉴定: 采用硅胶柱、聚酞胺柱层析法对藤茶的石油醚、乙醇、水的提取物进行了分离, 从中得到8个化合物,通过UV、工R、’H一NMR、’3C一NMR、MS等光谱解析鉴定为:二氢 杨梅素(dihydromyrieetin,wl)、杨梅素(myrieetin,wZ)、橙皮素(hesperitin,I)、 三氢梅}皮索(di一lydroquereeti:1,11)、山奈酚(kaemp民r。)一,111)、芹菜素(apigenin, IV)、p一谷幽醇(p一51 t 0 5 t erol,V)、齐墩果酸(oleanolie aeid,Vl),其中橙皮 素、二氢恻皮素、山奈酚、芹菜素、p一谷幽醇、齐墩果酸6个化合物为首次从藤 茶中发现。 2一卜要成分含量研究: l)采用差示紫外分光光度法测定藤茶,}“1’cF含量。以DMY为对照品,318 nm 为检测波长,对不同产地不同采收期藤茶的叶、茎中的总黄酮进行含量测定。测定 结果显示不同产地的I’CF含量高低有差异_Jl.含量随季节而变化,由3月份到5月份含 量依次增加,5月份藤茶叶中‘fCF含量最高,为41.2一45.4%,而后逐渐一「降,到冬 季11月份落叶时的含量最低,为19.1一19.7沉,。相同情况下叶中含量高于茎中3一4 倍。不同产地的藤茶中TCF含量高低有差异,以江华藤茶含量最高,其次为张家界, 株洲的含量稍低。 2)采川HPLe奋则定藤茶,I,主要单体成分oMY含量。色谱条件:Liehrosphere,, 柱(150mm x 4.6mm);流动相:甲醇:水:磷酸(25:75:0.1);流速:1 mL/min; 柱温:25℃;检测波长:29(j nm:进样量:2()川』,对不同产地不同采收期藤茶的叶、 茎中的 DMY进行含量测定。测定结果显示,5月份藤茶叶中DMY含量最高 27.9一31 .2%;相同情况一日l卜中含量高于茎「「,3一4倍。不同产地的藤茶中DMY含量高 低有差异,以江华藤茶含量最高,其次为张家界,株洲的含量稍低。 3.主要成分药理作川研究: 1)以黄llg吟一黄嘿吟氧化酶系统产生超氧阴离子自由基的方法,研究了TCF对 氧自由基的清除作用;以CyS一l‘犷系统诱导离体大鼠肝匀浆及vi tc一FeZ‘系统诱导肝 线粒体产生的脂质过氧产物,研究了TCF抗脂质过氧化作用。实验结果显示TCF能 较好地清除氧自由基,其IC,。为14.7以g/‘nL;能抑制离体大鼠肝匀浆自氧化及Cys- FeZ‘系统诱导引起的脂质过氧化,其ECS。分别为9.4 09/mL和38.1 pg/mL,对肝线 粒体也有保护作用,并呈量效依赖关系。说明TCF对氧自由基有清除作用,并能预 防性的对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤。 2)采用分光光度法研究了DMY对由vi te一I了eZ‘、CyS一FeZ‘、HZOZ一FeZ‘三种体系诱 导的脂质过氧化产物的影响。实验结果显示,DMY能抑制离体大鼠脑、心、肝匀浆及 线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的生成并表现出剂量依赖关系。说明DMY具有 较好的抗脂质过氧化作用。 3)用正交设计方法建立了小鼠四氯化碳肝损伤模型,考察了TCF和DMY对CC14 诱泞的小鼠急性川一损伤的彩响。,实验结果显示,!巧占都能剂量依赖性地降低CCI;致 小鼠肝损伤血清AIJT、AS’I’值升高,降低肝组织匀浆中MDA的含量?
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R282

【引证文献】
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【参考文献】
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10 胡浩斌;郑尚珍;郑旭东;;东紫苏挥发油化学成分的研究[A];西北地区第三届色谱学术报告会暨甘肃省第八届色谱年会论文集[C];2004年
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5 张延妮;珠子参化学成分及其活性成分的筛选研究[D];陕西师范大学;2010年
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8 龚金炎;竹子外表皮中护肤功能因子的研究[D];浙江大学;2010年
9 王进;岩白菜素的人体与动物药代动力学及对I_(GABA)的作用研究[D];山东大学;2010年
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2 周玮婧;荔枝皮原花青素的提取、纯化以及抗氧化活性研究[D];华中农业大学;2010年
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【同被引文献】
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3 本报记者 张萍;“武陵藤”贵州藤茶亮相铜仁[N];铜仁日报;2010年
4 本报记者 雷萌;山间小藤叶 一番大事业[N];中华合作时报;2010年
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6 记者 李先宏、通讯员 义勇、少怀、波道、晓勇;来凤林产业唱响“五子之歌”[N];湖北日报;2006年
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8 记者 秦叙常 通讯员 李尚海 邓华;简短的奠基仪式[N];恩施日报;2010年
9 郑义勇 石少怀 谭波道 陈晓勇;来凤上演“油茶药酒筷”林业产业交响曲[N];中国绿色时报;2006年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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3 王哲元;泽漆抗肿瘤活性部位筛选及主要成分杨梅素的作用[D];兰州大学;2012年
4 周防震;藤茶活性成分DMY对乳腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的影响[D];华南理工大学;2012年
5 程霜;石榴皮萃取物抗氧化和降血脂作用与成分研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
6 刘利;桑叶次生代谢产物研究[D];中国农业科学院;2005年
7 胡申才;具细胞毒活性海洋微生物的分离筛选及次级代谢物的研究[D];华中农业大学;2005年
8 吕本强;注射用双黄连粉针剂物质基础研究[D];第一军医大学;2007年
9 王(韦华);猪源乙型脑炎病毒SXBJ07株全长基因组克隆分析及ELISA检测方法的建立[D];西北农林科技大学;2009年
10 惠明;枯草芽孢杆菌B53的分离鉴定及产聚γ-谷氨酸的研究[D];中国农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁萌;藤茶提取物对肉鸡免疫性能、脂质过氧化水平和脂类代谢的影响[D];山东农业大学;2004年
2 赵勇彪;发酵藤茶生产技术及其风味形成机制研究[D];吉首大学;2013年
3 应乐;藤茶超临界CO_2萃取物体外活性与工艺优化[D];浙江大学;2012年
4 刘栩;逆流色谱分离黄酮类化合物——大豆、藤茶和白水曲柳皮中黄酮类化合物的分离[D];中国农业科学院;2003年
5 杨铃;微波辅助萃取藤茶中二氢杨梅素的研究及机理探讨[D];华南理工大学;2005年
6 易诚;显齿蛇葡萄繁殖技术及产品加工工艺研究[D];湖南农业大学;2005年
7 卢彦欣;狂犬病病毒街毒株BDRV的分离鉴定及全基因组序列测定[D];吉林大学;2007年
8 蔡秀磊;鸭疫里默氏杆菌耐药性与耐药基因研究[D];山东农业大学;2007年
9 白永平;绵羊肺炎支原体的分离鉴定与敏感药物试验的研究[D];四川农业大学;2007年
10 曹娟;生物表面活性剂产生菌的分离鉴定及其对环境污染物生物降解的促进作用[D];南京农业大学;2008年
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