收藏本站
《湖南农业大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小麦矮化腥黑穗病菌(Tilletia controversa K(?)hn)的分子检测

高强  
【摘要】:小麦矮化腥黑穗病菌(Tilletia controversa kühn,简称TCK)引起的小麦矮化腥黑穗病(Dwarf bunt of wheat)是麦类黑穗病中危害最大,防治最难的一种病害,常对小麦生产造成巨大危害,同时也是我国一类检疫性病害。但是在我国日常的口岸检疫工作中我们发现小麦网腥黑穗病菌T.caries(TCT)和小麦光腥黑穗病菌T.foetida(TFL)与小麦矮腥黑穗病菌T.controversa(TCK)的冬孢子形态非常相似,这给检疫鉴定工作带来了很大的麻烦。几十年来,国内外一些学者主要从腥黑穗病菌的形态学、血清学、生化等方面进行了大量的研究探索,并取得了巨大的成果,但从分子生物学水平上对他们进行区分国内还未见报道。 利用两种分子生物学方法结合实时荧光PCR技术手段对TCK和它的两种近似种TCT和TFL进行了鉴别研究。利用RAPD方法,在目前筛选的引物中能够找出引物OperonA01(CAGGCCCTTC)鉴别出TCK和TFL,但不能鉴别出TCK和TCT;利用核糖体基因分析法,在核糖体基因的外部转录间隔区(externally transcribed spacer,ETS)和非转录间隔区(non- transcribed spacer,NTS)分别找到了TCK不同于TCT和TFL的特异性序列。并根据TCK的ETS上的特异性序列设计了Taqman探针,利用实时荧光PCR技术通过优化实时荧光PCR反应条件实现了从TCK、TCT、TFL中检测出TCK。 利用基于Taqman探针的实时荧光PCR技术可以快速、准确的实现对TCK的检测,可避免常规检测方法造成的误检、漏检,且这种检测方法相对于常规检测方法更为灵敏,整个检测过程只要2个小时,由于采用全封闭反应管及光电传导系统,不用跑凝胶电泳,因而降低了实验室常见的污染问题。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S435.12

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 王小红;荧光定量PCR技术研究进展[J];国外医学(分子生物学分册);2001年01期
2 阎培生,罗信昌,周启;木耳属真菌rDNA特异性扩增片段的RFLP研究[J];菌物系统;1999年02期
3 黄河,毛伟敏,郑儒永;小克银汉霉核糖体DNA PCR扩增产物的限制性片段长度多型性(英文)[J];菌物系统;1999年03期
4 张星耀,赵仕光,朴春根,吕全,贾秀贞;树木溃疡病病原真菌类群分子遗传多样性研究Ⅰ.——小穴壳菌属、疡壳孢属、壳囊孢属、盾壳霉属分类地位的分子证明[J];林业科学;1999年03期
5 刘作易;DNA指纹技术的发展及其在真菌分类上的应用[J];山地农业生物学报;2000年06期
6 易建平,沈禹飞,陶庭典,戚龙君,印丽萍,郑建中;PCR技术在印度腥黑穗病菌检测和鉴定中的应用[J];上海农业学报;2002年02期
7 陈忠斌,王升启,孙志贤;分子信标核酸检测技术研究进展[J];生物化学与生物物理进展;1998年06期
8 章正,王圆,姚文国,曲能治,张翠蓉,吴莘喁,彭金火,周国梁;中美小麦矮腥黑穗病菌鉴定合作研究 Ⅰ.自发荧光显微学特性研究[J];植物病理学报;1995年03期
9 程颖慧,章桂明,王颖,姜子德;小麦印度腥黑穗病菌PCR检测[J];植物检疫;2001年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 缪承杜;洪葵;;真菌分类技术的研究进展[J];安徽农业科学;2007年22期
2 高建忠;;嗜水气单胞菌的检测方法比较[J];安徽农业科学;2008年31期
3 高建忠;魏雪;童琰;黄玉邦;;MGB探针实时定量PCR检测致病性嗜水气单胞菌[J];安徽农业科学;2009年19期
4 杨沛,邓少丽,陈伟;检测淋病柰瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体的临床方法评价[J];重庆医学;2003年01期
5 陈旭;齐凤坤;康立功;李景富;;实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J];东北农业大学学报;2010年08期
6 郑金龙;高建明;张世清;陈河龙;刘巧莲;易克贤;;剑麻斑马纹病病原鉴定[J];东北农业大学学报;2011年12期
7 王义鹏;许艳丽;;荧光定量PCR技术在植物病原检测方面的应用[J];大豆科技;2011年02期
8 李珊,赵桂仿;AFLP分子标记及其应用[J];西北植物学报;2003年05期
9 赵美萍,张新祥,常文保;生化探针技术[J];大学化学;2004年02期
10 肖国生,曹三杰,文心田;荧光定量PCR技术及其在动物传染病定量检测中的应用[J];动物医学进展;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 梁军;叶建仁;;森林病理学发展[A];2008-2009林业科学学科发展报告[C];2009年
2 边银丙;熊巧玲;;中国食用菌DNA分子标记研究的十年历程回顾[A];首届海峡两岸食(药)用菌学术研讨会论文集[C];2005年
3 边银丙;;略论食用菌DNA分子标记技术的地位与前景[A];首届全国食用菌中青年专家学术交流会论文集[C];2006年
4 吴学谦;李海波;付立忠;魏海龙;吴庆其;;外生菌根菌纯培养菌种的RAPD及ITS分子标记鉴定[A];首届全国食用菌中青年专家学术交流会论文集[C];2006年
5 葛建军;曹爱新;刘先宝;陈长法;;应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光定量检测技术研究[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文集[C];2005年
6 李海波;吴学谦;魏海龙;付立忠;吴庆其;彭华正;金群英;朱光权;孙敏华;;食用真菌的DNA指纹技术研究进展[A];2004中国食用菌产业协调发展高峰论坛论文集[C];2004年
7 刘素萍;易建平;周国梁;叶军;印丽萍;;进境小麦中沙地牧草腥黑粉菌Tilletia ehrhartae的鉴定[A];外来有害生物检疫及防除技术学术研讨会论文汇编[C];2005年
8 郑金龙;高建明;张世清;陈河龙;刘巧莲;易克贤;;剑麻茎腐病菌rDNA-ITS序列分析[A];第三届全国生物入侵大会论文摘要集——“全球变化与生物入侵”[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 廖芳;重要植物疫害的检测鉴定及分子系统学研究[D];南开大学;2010年
2 张少然;T辅助细胞亚群联合检测对系统性红斑狼疮病情评估价值的研究[D];山西医科大学;2011年
3 高妍;东北民猪与大白猪背最长肌的差异表达基因研究[D];吉林大学;2011年
4 杜萍;中国野生毛木耳遗传多样性研究[D];北京林业大学;2011年
5 龙翔宇;利用基因芯片技术发掘小麦内参基因及抗赤霉病相关基因[D];四川农业大学;2011年
6 潘欣;巨桉林下大型真菌多样性及外生菌根真菌的接种效应[D];四川农业大学;2011年
7 桑稳姣;原生质体融合高效反硝化菌及其脱氮研究[D];华中科技大学;2010年
8 张爱华;赭曲霉毒素A免疫检测方法的研究与呕吐毒素生物转化菌NJA-1的鉴定[D];南京农业大学;2010年
9 赵国柱;中国砖格丝孢菌20属的分类及5个相似属代表性种的分子系统学研究[D];山东农业大学;2003年
10 李少骞;转基因植物外源基因的检测方法及整合位点的研究[D];湖南农业大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 单洪涛;野生平菇[D];山东农业大学;2009年
2 刘建;三个意蜂种群MRJP3的基因表达及其蛋白含量的比较分析[D];安徽农业大学;2010年
3 王晓光;棉花枯萎病菌致病力分化及遗传多样性研究[D];河北农业大学;2011年
4 戴杨;球毛壳ND35菌株在植物上的侵染、定殖检测和对植物生长的影响[D];山东农业大学;2011年
5 张春霞;Na_2CO_3胁迫下甜高粱CBL基因家族的表达模式分析及功能初探[D];吉林大学;2011年
6 王忠伟;籽鹅不同发育时期和不同组织内参基因选择的研究[D];黑龙江八一农垦大学;2011年
7 石锐;北京地区壳囊孢及其有性型的分类学研究[D];北京林业大学;2011年
8 杨晓兵;TRAP标记及EST在黑木耳栽培菌株亲缘关系鉴定中的研究[D];吉林农业大学;2011年
9 苟璐璐;条锈菌诱导的小麦转录因子TaWRKY基因的克隆及表达分析[D];四川农业大学;2011年
10 刘涛;大麦HvPrp1基因的克隆和表达模式分析[D];四川农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 朱衡,瞿峰,朱立煌;利用氯化苄提取适于分子生物学分析的真菌 DNA[J];真菌学报;1994年01期
2 李英波,罗信昌,李滨,郭良栋,文华安;香菇菌株的限制性片段长度多型性[J];真菌学报;1995年03期
3 周永力,吕国忠,刘伟成,白金铠;采用PCR-RFLP和RAPD对球壳孢目真菌系统学的研究[J];菌物系统;1998年02期
4 李增智,黄勃,樊美珍,唐晓庆;利用RAPD-PCR检测三种白僵菌及球孢白僵菌种内变异[J];菌物系统;1998年02期
5 曾凡亚,张义正;从多糖丰富的样品中制备食用真菌DNA[J];食用菌学报;1996年03期
6 章正;;关于小麦矮腥病菌某些近似种的探讨[J];植物病理学报;1980年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 吕杰,金宁一,丁壮,王兴龙,金扩世,李太元,米志强,毕振东,殷震;鸡新城疫病毒(青岛株)分离鉴定及HN基因的克隆、序列分析与同源性比较[J];沈阳农业大学学报;2000年04期
2 王贤;陈芳芳;余为一;;鸡新城疫病毒HN基因片段的原核表达及其单抗制备[J];安徽农业科学;2011年20期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 倪腾;韩春林;;海南核电文档一体化编码(HN编码)及其应用[A];回顾与展望:2010年全国档案工作者年会论文集(上)[C];2010年
2 胡静涛;杨文涛;肖冲;王泽;丁壮;王春凤;;GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 褚福禄;温红玲;王志玉;;人副流感病毒3型HN糖蛋白受体结合位点突变分析[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2011年
4 杨增岐;张鹏;马静;;5株基因Ⅸ型野鸟源新城疫病毒的毒力测定及其F与HN基因的遗传进化分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
5 王旋;黄兵;张训海;于可响;钟登科;宋敏训;龚争;赵磊;;不同禽源副粘病毒分离株HN基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
6 温国元;商雨;王红琳;杨峻;胡薛英;程国富;邵华斌;;新城疫病毒TS09耐热株HN基因的序列测定与耐热机制分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
7 谢兰;;卫生体制改革条件下HN医院经营策略分析[A];湖南省卫生经济与信息学会第一届理事会第二次会议暨第一次学术年会专辑[C];2010年
8 刘一尘;张春杰;程安春;程相朝;李银聚;吴庭才;丁轲;;新城疫病毒HN蛋白表达条件的优化、纯化及其活性鉴定[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(下册)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 甘军纪;表达鸡新城疫病毒HN基因重组鸡痘病毒活疫苗的临床前研究[D];扬州大学;2010年
2 张国际;副粘病毒Tianjin株HN和F基因真核表达质粒的构建及其对幼鼠免疫效果的评价[D];天津医科大学;2007年
3 张新萍;Humanin(HN)衍生物-Rattin对血管性痴呆大鼠认知功能损害的影响[D];山东大学;2013年
4 梁俊文;新城疫分离株P和HN基因分子进化与致病性的相关研究[D];山东师范大学;2010年
5 连海;新城疫病毒HN基因与鸡贫血病毒VP3基因抗肿瘤作用及其信号传导机制[D];吉林大学;2006年
6 褚福禄;副粘病毒HN糖蛋白功能性关键氨基酸定位与促细胞融合机制研究[D];山东大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张毅;HN集团人力资源规划研究[D];河南大学;2013年
2 胡子玉;HN日报报业集团印务中心设备综合效率研究[D];中南大学;2012年
3 何羽婷;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的演化及其抗原性的比较分析[D];山东农业大学;2013年
4 蒋虹;中国联通HN省分公司营销渠道绩效评价及提升研究[D];中南大学;2011年
5 滑兴;HN发电公司融资问题与对策研究[D];吉林大学;2013年
6 毛华初;HN中烟工业有限责任公司并购后绩效管理体系设计[D];中南大学;2013年
7 白艳波;鸡新城疫病毒内蒙古分离株HN蛋白基因序列比较研究[D];内蒙古农业大学;2010年
8 董丽;新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及分离株HN蛋白抗原表位差异性分析[D];扬州大学;2010年
9 钟武勇;HN出版集团战略性人力资源规划研究[D];中南大学;2010年
10 闫飞;HN送变电公司人力资源管理诊断报告[D];郑州大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026