收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究

吴顺  
【摘要】:水稻是我国的主要粮食作物之一,其播种面积占全部粮食作物面积的30%,产量则占粮食总产量的40%。由于粮食的不断增产和人民生活水平的提高,人们对稻米的要求逐步从量的需要转向质的要求,米饭的食味品质备受关注。湖南作为我国稻米的主要产区之一,绝大部分水稻品种的直链淀粉含量偏高,品质较差,严重影响了稻米的出口,因此,尽快改良我省稻米的直链淀粉含量已成为一项极其重要且十分紧迫的任务。运用基因工程手段培育转基因水稻为传统水稻育种和遗传改良开辟了新的途径。本研究以3个籼稻品种的成熟胚为材料,建立了适合于籼稻愈伤组织的诱导和再生体系。通过对水稻愈伤组织培养过程中的生理生化特性进行的研究,优化了农杆菌遗传转化条件,并将外源蜡质反义片段和抗潮霉素抗性基因共转化湘早籼33号和01早5202愈伤组织,经过抗性筛选和植株再生,得到了既含目的基因又含标记基因的共转化植株。研究结果如下: 1.籼稻成熟胚愈伤组织的诱导和再生体系的建立。三种水稻组织培养中常用的基本培养基(MS、N_6、CC)对愈伤组织诱导率影响不大,但以N_6培养基上生长的愈伤组织质量较好,而CC培养上培养的愈伤组织分化率较高。在实验中,选择以N_6培养基作为籼稻愈伤组织诱导的基本培养基,而以CC培养基作为愈伤组织分化的基本培养基。2,4-D是植物组织培养中最常用的愈伤组织诱导剂,但其浓度过高或过低都不利于水稻愈伤组织的诱导,在N_6基本培养基上添加1.5~2mg·L~(-1)的2,4-D能有效地诱导供试材料成熟胚愈伤组织的形成。适当浓度的6-BA(0.2~0.4mg·L~(-1))能改善愈伤组织的质量,提高其植株再生频率,但过高浓度的6-BA会对愈伤组织产生毒害作用。 2.细胞生长、分化和形态建成的方向取决于其生理和生化的变化。籼稻愈伤组织在继代培养过程中,可溶性蛋白含量呈现有规律的变化。在愈伤组织旺盛生长过程中,其可溶性蛋白含量明显提高,可溶性蛋白组分电泳条带增多。愈伤组织在转入分化培养基后,蛋白合成明显增加,可溶性蛋白含量分别在分化培养的第6d和第12d出现峰值,而此时正是愈伤组织形态发生明显变化的时期。这表明,蛋白质的活跃合成为器官的形态建成奠定了物质基础。愈伤组织培养过程中某些保护酶活性及其同工酶的变化反映了其细胞内自由基代谢的规律。PPO活性高低与愈伤组织褐化程度有关。POD和SOD活性的高低反映了细胞内代谢的旺盛


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 罗建平,吴礼福,姜绍通;怀槐愈伤组织形成与异黄酮积累[J];中国中药杂志;2003年12期
2 李香串,祁学忠;麻黄愈伤组织的诱导研究[J];山西中医学院学报;2003年03期
3 许鸿源,蒙爱东,李春霞,邓锡青,杨美纯,周歧伟,黄春燕,许鸿章;灵发素对三七愈伤组织发生和增殖的影响[J];中药材;2004年01期
4 曾桂萍,余显权,刘仁祥,戴保威;提高籼稻愈伤组织分化频率的研究[J];贵州农业科学;2004年03期
5 王丹丹;李兴林;崔兴华;周鑫;;虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化[J];天津科技大学学报;2009年02期
6 伍春莲;;黄芪愈伤组织的培养及其蛋白质含量的测定[J];西华师范大学学报(自然科学版);2009年02期
7 金荣;赵东利;;表油菜素内酯对苦参愈伤组织生长的影响[J];生物技术通报;2009年S1期
8 王克臣;冷超;黄文功;李明;;黑亚14号不同类型愈伤组织结构的透射电镜观察[J];Agricultural Science & Technology;2009年04期
9 王克臣;冷超;黄文功;李明;;黑亚14号不同类型愈伤组织结构的透射电镜观察[J];安徽农业科学;2009年32期
10 陈美兰;叶正良;欧阳少林;林淑芳;邵爱娟;黄璐琦;;龙脑樟愈伤组织的诱导及龙脑的产生[J];中国中药杂志;2010年05期
11 曲同宝;孟繁勇;张友民;王丕武;;影响羊草愈伤组织分化因素的研究[J];安徽农业科学;2010年12期
12 高丽红;;栝楼愈伤组织的培养[J];今日科苑;2010年10期
13 胡燕梅;郭云贵;蒋细旺;余群娣;崔鹏;;蔗糖及天然有机物对银杏愈伤组织合成黄酮的影响[J];西南农业学报;2010年03期
14 王和飞;梁柳;张燕;刘进平;;胆木愈伤组织与悬浮细胞培养研究[J];热带农业科学;2011年06期
15 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;郑宝强;;牡丹愈伤组织扫描电镜观察[J];林业科学研究;2011年05期
16 凌杰;宁淑香;;益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究[J];辽宁师范大学学报(自然科学版);2013年01期
17 郭生桢,李惠芝,潘景丽;人参愈伤组织的诱导[J];西北植物研究;1982年02期
18 刘涤,迟静芬;外源环化腺一磷和几种抑制剂对烟草愈伤组织生长和分化过程的影响[J];植物生理学报;1983年03期
19 丁葆祖;柏淑华;吴逸;杨静仪;;人参愈伤组织细胞亚显微结构的研究[J];Journal of Integrative Plant Biology;1983年03期
20 徐桂芳;牛玉仙;唐定台;张静兰;;四种愈伤组织中吲(口朶)乙酸氧化酶和过氧化物酶的活性与同工酶的关系[J];Journal of Integrative Plant Biology;1983年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 职明星;李秀菊;王清连;;基质含水量对扦插棉花愈伤组织形成的影响[A];中国棉花学会2009年年会论文汇编[C];2009年
2 郭志刚;刘雪;刘瑞芝;;培养条件对藏红花愈伤组织生长的影响[A];第四届中国新医药博士论坛论文集[C];1999年
3 张寿文;曹岚;;彭泽贝母愈伤组织的诱导及培养条件的优化研究[A];首届江西省科协学术年会江西省中医药学术发展论坛论文集[C];2010年
4 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;郑宝强;;牡丹愈伤组织扫描电镜观察[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
5 张寿文;聂秀霞;曹岚;;彭泽贝母愈伤组织的诱导及培养条件的优化研究[A];全国第9届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2010年
6 王丕武;王雷;张君;;基因枪转化玉米愈伤组织转化条件的优化[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(上)[C];2003年
7 黄皓;夏涛;高丽萍;;茶愈伤组织的诱导及继代培养的研究[A];全国茶业科技学术研讨会论文集[C];2007年
8 汪春义;戚凤春;陈桂玲;申镇维;王宣军;谢英林;盛军;;表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系的建立[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
9 甘烦远;郑光植;沈月毛;;毛喉鞘蕊花愈伤组织的诱导及其活性成分的产生[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
10 吉前华;;碳酸钙胁迫对枳壳愈伤组织的生理效应[A];2004中国植物生理生态学学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 文涛;虎杖愈伤组织白藜芦醇次生代谢调控体系研究[D];四川农业大学;2009年
2 于海鹏;人参愈伤组织细胞表达HBsAg-rhIFNα-2b融合蛋白的研究[D];吉林大学;2008年
3 田敏;草莓体外培养再生机理及遗传转化的研究[D];浙江大学;2003年
4 傅经国;愈伤组织和冠瘿培养生物合成苦皮素A[D];郑州大学;2001年
5 吉前华;小麦(Triticum aestivum L.)幼穗愈伤组织形成和植株再生能力的基因型变异及其遗传基础的研究[D];四川农业大学;2001年
6 王晓敏;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在芦苇愈伤组织盐适应性中调节作用的机理研究[D];兰州大学;2008年
7 吴顺;籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究[D];湖南农业大学;2005年
8 王克臣;亚麻离体再生及早期体细胞胚胎发生机理的研究[D];东北农业大学;2008年
9 商海红;陆地棉体细胞胚胎发生的细胞学研究[D];中国农业科学院;2009年
10 张朝军;棉花叶柄高效再生体系的建立与遗传分析[D];中国农业科学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姜云斌;焦亚硫酸钠对番茄愈伤组织及悬浮细胞培养的影响[D];天津科技大学;2008年
2 肖璇;狼毒组织培养及其黄酮类成分研究[D];中央民族大学;2011年
3 张猛;干燥和硝酸银对水稻愈伤组织分化及其生理生化特性的影响[D];广西大学;2007年
4 刘治佑;大豆异黄酮合酶基因的克隆及转基因愈伤组织的制备[D];新乡医学院;2012年
5 傅瑜;水飞蓟的愈伤组织培养[D];吉林农业大学;2012年
6 李慧;皱叶酸模高效再生体系的建立及愈伤组织大黄素含量的分析[D];辽宁师范大学;2013年
7 马晓菲;防风愈伤组织超低温保存及其玻璃化现象研究[D];山东农业大学;2014年
8 牛佳佳;牡丹愈伤组织继代培养的研究[D];河南农业大学;2009年
9 王晓凤;低温胁迫和激素对外源基因表达及愈伤组织防御酶活性的影响[D];东北林业大学;2011年
10 任振兴;黄芩愈伤组织培养及其次级代谢物合成调控的研究[D];山西大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 ;俄罗斯培育出更耐涝小麦[N];新华每日电讯;2010年
2 濮阳市世锦现代农业发展有限公司 张晖 王绪月;花卉无性系的快速繁殖[N];中国花卉报;2006年
3 曹涤环 刘建武;影响苗木嫁接成活的因素[N];中国绿色时报;2008年
4 ;非洲紫罗兰快繁法[N];广东科技报;2000年
5 山东省莱西市职业技术学校 于新刚;果树嫁接成活的几个关键因素[N];河南科技报;2009年
6 李婵;月季管理四要点[N];云南科技报;2012年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978