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《湖南农业大学》 2006年
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富硒大豆蛋白的酶解及其低聚肽的分离纯化研究

程天德  
【摘要】:硒是人体必须的微量营养元素,大豆低聚肽具有多重生物学功能,将微量元素硒的研究同大豆低聚肽的研究有效结合起来,开发富硒大豆低聚肽将具有较高的应用价值。本研究选用湖北恩施高硒区生产的富硒大豆为原料,从富硒大豆中提取出富硒大豆蛋白,然后用所选的蛋白酶水解富硒大豆蛋白得到酶解产物,再从酶解产物中分离纯化出高含硒量的富硒大豆低聚肽(分子量1000以下为主)。主要研究结果如下: 根据富硒大豆蛋白中氨基酸的种类及其含量,参考目前市场上各种蛋白酶的价格及其来源,查阅相关资料,选定了枯草芽孢杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶对富硒大豆蛋白进行水解,这两种蛋白酶作用条件相近,且来源广泛、价格也比较便宜,适用于工业化大生产。 研究了木瓜蛋白酶、枯草芽苞杆菌蛋白酶的酶浓度、温度、pH和底物浓度对富硒大豆蛋白的水解效率的影响,探讨了水解富硒大豆蛋白的最佳条件。结果表明:酶浓度、温度、pH和底物浓度对木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶水解富硒大豆蛋白的影响程度大小依次为:酶浓度>温度>pH>底物浓度;木瓜蛋白酶水解富硒大豆蛋白的最佳条件为:酶浓度15000u/g,温度55℃,pH7.0,底物浓度2%,时间3h;枯草芽苞杆菌蛋白酶水解富硒大豆蛋白的最佳条件为:酶浓度8000u/g,温度55℃,pH7.0,底物浓度2%,时间4h。 研究了木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶混合水解富硒大豆蛋白的最佳条件,结果表明:这两种酶的添加顺序对富硒大豆蛋白最终的水解度影响不大,混合酶解的最佳条件为:温度55℃,pH7.0,底物浓度2%,反应前同时加入木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶,木瓜蛋白酶的酶浓度为15000u/g,枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶浓度为8000u/g,水解时间为4h,这即是本研究得出的富硒大豆蛋白酶解的最佳条件。 选定了三种超滤膜对富硒大豆蛋白酶解混合物进行分离,分别考查了膜通量、料液原始浓度对超滤的影响、膜两侧平均压力对超滤的影响、膜效能、膜所受的阻力以及硒的回收率等情况。结果表明:膜通量随时间的延长而降低;料液原始浓度在0.2%~0.3%最合适;对于分子量20000、5000和1000的超滤膜来
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q814.9

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