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《湖南农业大学》 2007年
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黄瓜性别表达相关分子标记的研究

陈刚  
【摘要】: 黄瓜是研究植物性别表达的经典材料,其性别表达除了受遗传因子控制外,还易受环境和化学物质的调控。长日照、高温、GA促进雄花产生,而短日照、低温、乙烯则促进雌花形成。内源乙烯因与黄瓜雌花的形成呈显著正相关,被称为黄瓜植株的“性激素”。研究表明,乙烯不敏感转录调节基因(ethylene insensitive 3,EIN3)是定位在细胞核上的乙烯信号转导下游元件,其编码的EIN3蛋白与乙烯反应相关基因启动子的特殊序列结合,激活这些基因的转录。立足于此,本研究以一对近等基因系黄瓜材料WI1983G(全雌株)和WI1983H(两性花株)及其F_2群体为材料,分别进行了关于EIN3基因的SNP标记筛选与分析、利用RFLP-BfmⅠ技术阐明黄瓜性别表达机理、全基因组DNA多态性片段筛选等研究,结果分述如下: (1)通过对WI1983G和WI1983H的EIN3基因序列分析,获得两个SNP标记。根据两个变异SNPs重新设计引物组Ⅰ(Forward primer:5’—cat gat ggg atc ttg aag—3’和Reverse primer:5’—cac cat tcc tcg act cca—3’)和引物组Ⅱ(Forward primer:5’—cat gat ggg atc ttg aag—3’和Reverse primer:5’—ata ata gca agc cag gta gc—3’)。通过特定PCR扩增,发现只有性状为全雌性的植株才可获得特异性产物,其中引物组Ⅰ扩增得到的特异性片段大小为382bp左右,引物组Ⅱ则为605bp左右。田间性别统计表明,全雌性相对于两性花基本符合3:1的分离规律(x~2<0.05),按照Yin和Quinn的模型,初步推测全雌株的基因型为FFMM,而两性花株的基因型则为FFmm。上述两个标记有望作为黄瓜雌性株系的分子标记进行辅助选择。 (2)利用RFLP-Bfm I技术对WI1983G和WI1983H的EIN3基因序列进行进一步分析,发现性别为两性花的黄瓜植株,产物均为500 bp大小的酶切产物(aa);而性别为全雌性的黄瓜植株,分为两种情况,一种为产物包括497 bp和608 bp的两条主带(Aa),另一种为608 bp的主带(AA)。田间统计表明,AA:Aa:aa比例接近1:2:1(x~2<0.05)。这进一步证实了WI1983G的基因型符合FFMM,而WI1983H则符合FFmm的特征,杂交后其F_2群体的性别因M/m分离而发生分离。 (3)利用RAPD技术筛选了600多条随机引物,未获得任何差异片段;通过AFLP分析,获得了5条可进行回收克隆的特异性条带,分别为:CT_TG_(480bp)和CA_AT_(500bp)、CA_AT_(520bp)、CA_AT_(680bp)、CA_AT_(700bp),为进一步寻找控制黄瓜性别决定的基因提供了丰富的实验基础。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q943.2

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 朱明涛;分子标记辅助番茄自交系改良及其配合力的测定[D];华中农业大学;2010年
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9 刘新颜;荷斯坦公牛SPAG11基因、Tf基因多态性及与精子质量性状的关联性分析[D];山东师范大学;2011年
10 吴艳艳;甜樱桃果实中五个乙烯信号转导基因的克隆及其表达[D];山东农业大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前8条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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10 李亚利;与黄瓜果皮绿色性状相关的SRAP分子标记[D];西北农林科技大学;2008年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 崔苗;高山红景天花药培养研究[D];延边大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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中国重要报纸全文数据库 前10条
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9 朱国旺;机遇凸显 我们如何把握[N];中国医药报;2003年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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7 杨元明;四川省玉米杂交种种质研究[D];四川农业大学;2004年
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4 温小杰;我国陆地棉抗枯黄萎病品种遗传多样性分析[D];河北农业大学;2004年
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7 潘文嘉;利用AFLP技术对谷子抗锈基因进行分子标记[D];河北农业大学;2010年
8 朱肖艳;嫁接对西瓜品质性状的影响及AFLP多态性分析[D];河南大学;2011年
9 沈恩健;利用AFLP和SSR对南海区域马氏珠母贝群体的遗传结构分析[D];广东海洋大学;2010年
10 赵宏;我国棉花抗枯黄萎病部分骨干品种的AFLP研究[D];河北农业大学;2002年
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