收藏本站
《湖南农业大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鸡B淋巴细胞激活因子基因的克隆表达及生物学功能研究

王步高  
【摘要】: 根据已报道的BAFF的开放阅读框架(ORF)序列设计特异性引物,以鸡的法氏囊淋巴细胞的总RNA为模板进行RT-PCR。将PCR回收产物与克隆载体pGEM-T连接,并转化E.coli DH5α,取阳性克隆进行测序分析。克隆的BAFF序列测序结果表明,其序列全长为867bp,将所克隆的序列与已报道的序列相比较,二者核苷酸序列的相似性为99.88%(866/867),表明成功克隆获得了鸡淋巴细胞激活因子基因的ORF。DNAssist分析表明,所克隆基因编码的蛋白质分子量为31.6kDa,等电点为8.3。 设计引物,以E.coli DH5α(pGEM-T-BAFF)为模板克隆BAFF的ORF,与质粒载体pMAL-c2X连接。连接产物转化宿主细菌E.coli Rosset(DE3),再进行PCR和酶切鉴定及测序鉴定。将阳性转化菌落进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析显示所表达融合蛋白的分子量约为74kDa,获得了可溶性BAFF融合蛋白。表达的融合蛋白约占总蛋白含量的15%。 通过MTT法检测纯化的融合蛋白活性,结果显示BAFF融和蛋白可以明显促进脾脏淋巴细胞的增殖。将纯化的BAFF融合蛋白注射鸡,检测纯化的重组蛋白的生物特性,结果显示BAFF组的脾脏较对照组的增重明显,而BAFF重组蛋白对法氏囊病疫苗引起的病理变化保护不明显。 本实验首次在国内克隆出鸡的BAFF基因,表达出了可溶性的BAFF重组蛋白,通过分析外源BAFF生物学功能,结果显示重组蛋白能在一定程度上提高鸡的免疫功能。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S852.4

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 乔彦良,付兴伦,朱剑英,盛英霞,遇欣,张妍,赵金东,郭步术;左旋咪唑对鸡传染性法氏囊病疫苗免疫效果影响的观察[J];山东家禽;2001年04期
2 孙淑红,崔治中,刘思当,商营利;两个中等毒力IBDV疫苗免疫鸡对超强毒攻毒的保护试验[J];动物医学进展;2003年06期
3 何凤田;BAFF及相关疾病[J];国外医学(分子生物学分册);2002年06期
4 徐海燕,邱玉华;BAFF信号的免疫调节作用[J];国外医学(免疫学分册);2004年05期
5 居忠亮,臧敬五;B细胞激活因子研究进展[J];现代免疫学;2005年03期
6 李建荣,宋厚辉,于涟,周继勇,郑筱祥;传染性法氏囊病免疫失败原因分析[J];中国兽医杂志;2000年09期
7 李宏梅,郭慧君,李祥瑞,汪志楷;重组鸡IL-2作为传染性法氏囊病疫苗免疫增强剂对鸡细胞免疫水平的影响[J];中国兽医杂志;2005年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜亦飞;亓丽红;黄兵;李玉峰;于可响;宋敏训;;鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定[J];山东农业科学;2011年01期
2 尤向峰;;H5型禽流感诊断试剂对肉、种鸡的免疫抗体效价比较[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年01期
3 崔艳红;韩庆功;赵玉军;;鸡疫病防治中免疫增强剂的作用[J];安徽农业科学;2006年02期
4 姜金庆;杨国有;许艳凤;王香云;;中草药制剂提高肉鸡细胞免疫力的研究[J];安徽农业科学;2006年18期
5 董发明;龙塔;潘耀谦;张蓓;赵德明;;断奶仔猪多系统衰竭综合征淋巴结和脾脏病理组织学研究[J];安徽农业科学;2007年25期
6 司振书;孟喜龙;;微生态制剂对肉鸡免疫器官发育影响的研究[J];安徽农业科学;2007年26期
7 张珠明;汪仁莉;何生虎;;牛心朴子生物碱对小鼠细胞免疫功能的影响[J];安徽农业科学;2009年32期
8 张铁;王春光;吕建存;倪耀娣;;硝酸铈对小鼠非特异性免疫功能的影响研究[J];安徽农业科学;2010年03期
9 李雪华;刘俊伟;郭延峰;崔金忠;;蓝耳康A对仔猪PRRS疫苗免疫效果和主要生长性能指标的影响[J];安徽农业科学;2010年17期
10 王贵平;胡仕凤;李晓云;刘伟;;兽医免疫学实验教学的改革与实践[J];安徽农业科学;2011年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨自军;冉林武;王婷;王宏伟;张才;汪纪仓;刘凤军;林霖;;锌对鸡钼营养与毒性的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
2 魏莹;盖新娜;贾红;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
3 赵圣国;王加启;刘开朗;董晓丽;李旦;于萍;;乳及乳制品中IgG含量检测方法概述[A];中国奶业协会年会论文集2009(下册)[C];2009年
4 杨光;王加启;哈斯额尔敦;赵圣国;刘开朗;卜登攀;;牛乳中sIgA的合成机理及提高技术[A];中国奶业协会年会论文集2009(下册)[C];2009年
5 杨自军;王婷;冉林武;刘凤军;邱妍;;不同剂量钼对小白鼠免疫指标的影响[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
6 刘光磊;王加启;丁庆;张成波;张春刚;程金波;;埋植抗原缓释剂(ARD)对奶牛生产性能及乳品质的影响[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
7 田刚;陈代文;;免疫调节肽研究进展[A];饲料营养研究进展——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2006年
8 程时军;马立保;张伟;;溶菌酶对肉鸡食糜微生物数量、免疫及生长性能的影响[A];饲料酶制剂的研究与应用[C];2009年
9 么宏强;马学恩;于立新;张淑琴;郑秉武;;绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊后淋巴细胞的变化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
10 刘国华;马秀霞;韩梅英;张映西;鲍顺梅;许卫戈;张瑞山;何培政;雍长福;;鸡禽流感和新城疫不同设计免疫程序免疫抗体保护效果观察[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜淑贞;玉米赤霉烯酮对断奶仔猪的毒性初探及改性蒙脱石的脱毒效应研究[D];山东农业大学;2010年
2 姚美玲;H9N2亚型禽流感病毒气溶胶发生与传染机制及其感染SPF鸡的特点[D];山东农业大学;2010年
3 王芙蓉;牛磺酸对鹌鹑生产性能、免疫功能及脂肪代谢影响的研究[D];江南大学;2010年
4 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
5 李畅;调节因子Act1对多发性骨髓瘤中BAFF通路的调节作用研究[D];第二军医大学;2011年
6 姚新奎;伊犁马、新吉马及其杂交马乳理化指标、泌乳特性初步研究[D];新疆农业大学;2011年
7 李培德;复方麻醉剂舒眠宁的研制、临床效果、药代动力学及其对免疫功能的影响[D];南京农业大学;2011年
8 王益兵;EPA与DHA调控肉仔鸡肠道B淋巴细胞免疫功能的机理[D];西北农林科技大学;2011年
9 武瑞;亚硒酸钠在雏鸭体内药动学及毒理学的研究[D];东北农业大学;2002年
10 李永清;禽流感病毒M2基因克隆、表达及其重组马立克氏病病毒的构建[D];中国农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 向安静;杜洛克×二花脸F2资源群体构建及其血液指标、免疫性状的测定和分析[D];华中农业大学;2010年
2 喻翠翠;猪结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
3 杨恒伟;黄芪对肉鸡生产性能、免疫性能和抗氧化性能影响的研究[D];山东农业大学;2010年
4 张俊;玫瑰无须鲃卵黄脂磷蛋白是具有调理素功能的免疫识别因子[D];中国海洋大学;2010年
5 高琳琳;羊口蹄疫灭活疫苗免疫程序的研究[D];中国农业科学院;2010年
6 王希龙;多种鱼类血清Ig广谱型单克隆抗体的筛选与分析[D];福建师范大学;2010年
7 李艳芝;构树叶对蛋鸡生产性能、蛋品质、血液生化指标及免疫功能的影响[D];河北农业大学;2011年
8 谭洪志;牛分支杆菌电化学免疫传感器的研究[D];西南大学;2011年
9 于妮娜;大花君子兰化学成分及药理活性的研究[D];吉林农业大学;2011年
10 张念章;副猪嗜血杆菌hhdA基因缺失株的构建及胞外丝氨酸蛋白酶免疫原性的研究[D];中国农业科学院;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 崔治中,孙淑红,单忠芳,蒋玉雯,金文杰;鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株GX8/99株的致病性[J];病毒学报;2002年02期
2 刘忠贵;郑世民;陈少莺;魏萍;马春全;高荣;顾文艺;杨丽萍;;感染传染性法氏囊病毒雏鸡的免疫抑制及其机理[J];东北农学院学报;1992年02期
3 李祥瑞,金红,卢景良;鸡白细胞介素-2 cDNA克隆[J];南京农业大学学报;1999年02期
4 乔彦良,杨汉春,郭玉璞,盛英霞,马贤本,付兴伦;左旋咪唑对鸡细胞免疫和体液免疫功能的作用[J];畜牧与兽医;2000年02期
5 李祥瑞,金红,王秀丽,卢景良;以MTT比色法检测鸡脾淋巴细胞转化效果[J];畜牧与兽医;1996年01期
6 李德山;武志强;陈冠春;王笑梅;谷守林;郝桂玉;尹训南;;鸡传染性法氏囊病超强毒毒株的分离和初步鉴定[J];中国畜禽传染病;1991年06期
7 曹永长,毕英佐,梁志清,林文量;超强传染性法氏囊病病毒株宿主保护抗原的分子特征[J];中国兽医学报;1998年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 戴建华,秦爱建,许金俊,刘岳龙,金文杰;鸡γ-干扰素基因的克隆及其在原核和真核系统中的表达[J];中国预防兽医学报;2003年04期
2 刘胜旺,孔宪刚,丁忠庆,刘永刚,童光志,马云燕;鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达[J];中国兽医学报;2001年05期
3 王文成;舒秀伟;宣华;陆承平;;鸡IL-2基因的克隆及GST-chIL2融合蛋白的表达[J];畜牧与兽医;2007年01期
4 刘成倩;肖长峰;易建中;关平原;吴双林;陈斌;张天庆;;猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J];安徽农业科学;2009年22期
5 牟巍;蒋菲;何宇;丁家波;彭小兵;蒋玉文;;副结核分枝杆菌map0862基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];中国兽药杂志;2010年08期
6 姜文博;孙进华;单安山;;鸡IL-18基因的克隆表达及对新城疫疫苗诱导的HI抗体变化的研究[J];东北农业大学学报;2009年05期
7 韩春来;张灿;柏亚铎;陈通;吴艳花;韩雪;王雅楠;汪明;;惠阳胡须鸡IFN-α、IFN-β基因在大肠杆菌中的表达及其抗病毒活性比较[J];家禽科学;2006年01期
8 ;烟曲霉脱乙酰几丁质酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达的研究(英文)[J];安徽农业大学学报(自然科学版);1999年03期
9 徐向明;张泉;;犬瘟热H基因亚单位的克隆和融合表达[J];江苏农业科学;2008年04期
10 吴秀萍,刘明远,陈启军,卢强,付宝权,姚春雨,P.Boireau;旋毛虫新生幼虫期特异性T_(314)全长cDNA的克隆及表达[J];中国兽医学报;2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 魏群;贾振宇;陈萍;王林波;曹江;;eIF3g GST融合蛋白的表达与兔抗血清的制备[A];浙江省免疫学会第六次学术研讨会论文汇编[C];2007年
2 徐立新;袁橙;严若峰;宋小凯;李祥瑞;;山羊IFN-γ基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
3 贾新正;卢肖男;聂庆华;张细权;;鸡部分microRNA的同源预测与克隆验证[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
4 滑世轩;岑东;吕建新;裴仁治;;NK4基因的克隆及在Raji细胞中的表达[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年
5 鲁会军;韩松;郑敏;李旭;李昌;金扩世;金宁一;;口蹄疫病毒泛亚株VP1基因的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
6 李念;胡国库;张义正;冯红;;黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)环氧化物水解酶的克隆及酶学性质分析[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
7 毕佳佳;梁卫红;;OsMPK14基因与水稻非生物胁迫应答有关[A];中国遗传学会植物遗传和基因组学专业委员会2009年学术研讨会论文摘要汇编[C];2009年
8 卢仁泉;胡娟;吴兴中;郭林;;HE4融合蛋白基因的构建、表达及鉴定[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
9 陈佳;王春仁;;东毕吸虫信号蛋白14-3-3基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
10 陈玉飞;祁克宗;彭开松;涂健;;鸡β-防御素-8 cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 范胜利;鸡年难掩降价激情[N];华夏时报;2005年
2 记者 车亭;鸡年将至 旅游升温[N];威海日报;2005年
3 王惟恒;鸡年漫话鸡之药(二)[N];中国中医药报;2005年
4 左 同;期盼鸡“昂首”[N];证券日报;2005年
5 周耀华;鸡身皆是药[N];大众卫生报;2005年
6 曾庆;糖尿病和高血压:先有鸡还是先有蛋[N];上海中医药报;2005年
7 周伟 宋学娜 本报记者 杨树义;质量铸就“劲量”美味鸡精[N];中国食品质量报;2004年
8 吴建华;锦绣中华“鸡景”遍地[N];中国社会报;2005年
9 李永钩;鸡年车市十大“猜想”[N];中国消费者报;2005年
10 东方;鸡年首日 低价股呈强[N];证券日报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张怀;人Hepcidin融合表达载体的构建、在大肠杆菌中的表达及制备研究[D];北京化工大学;2005年
2 杜晓惠;鸡多趾候选基因的SNPs及表达差异研究[D];四川农业大学;2005年
3 樊东;几种鳞翅目昆虫几丁质酶基因的克隆与表达研究[D];东北农业大学;2004年
4 邹克琴;苹果钙依赖蛋白激酶MdCPK1:分子克隆、表达、定位及被脱落酸的激活[D];中国农业大学;2005年
5 喻麟;猪生长激素基因cDNA克隆与表达效应研究[D];四川大学;2007年
6 蒋圣娟;青岛文昌鱼TRP14和ycaCR基因的表达和功能鉴定[D];中国海洋大学;2007年
7 刘旭东;Bacillus sp. YX-1中温酸性α-淀粉酶的分离纯化及基因克隆和表达的研究[D];江南大学;2008年
8 崔志刚;MUC1模拟表位疫苗筛选和治疗小鼠膀胱癌效应[D];第三军医大学;2006年
9 康巧珍;幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因克隆表达及免疫评价[D];郑州大学;2005年
10 张焱如;马生长激素(GH)基因序列、分子进化及其多态性的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王步高;鸡B淋巴细胞激活因子基因的克隆表达及生物学功能研究[D];湖南农业大学;2007年
2 万修红;镰形扇头蜱IgG结合蛋白基因的克隆及表达[D];上海师范大学;2007年
3 张文杰;镰形扇头蜱抗微生物多肽基因的克隆及序列分析[D];上海师范大学;2008年
4 陈卫红;鸭IL-8 cDNA克隆与基因组结构分析及其重组蛋白的表达[D];中国农业大学;2005年
5 张晓佩;迟缓爱德华氏菌鞭毛蛋白的研究[D];福建师范大学;2008年
6 任燕;致病性嗜水气单胞菌的检测与一种温敏胞外蛋白酶基因的克隆、表达及其免疫性研究[D];南京农业大学;2005年
7 赵宏伟;DNase B基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[D];福建师范大学;2005年
8 冷雪;猪圆环病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、测序及原核表达[D];吉林农业大学;2006年
9 徐蕾;结核分枝杆菌三种复活促进因子的原核表达和初步应用[D];重庆医科大学;2007年
10 李娜;犬瘟热病毒核蛋白基因的克隆与表达及间接ELISA检测方法的初步建立[D];扬州大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026