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《湖南农业大学》 2007年
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冠突散囊菌产胞外多糖的研究

龚淑俐  
【摘要】: 冠突散囊菌(Eurotium cristatum,EC)是茯砖茶生产过程中的优势菌,是形成茯砖茶独特品质的主要因素。本研究利用茯砖茶中分离纯化出来的冠突散囊菌进行深层液体发酵,提取不同培养基发酵产生的胞外多糖,对提取条件进行了正交试验,确定了最佳提取工艺;采用DEAE-52纤维柱色谱和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱色谱对提取出的冠突散囊菌粗多糖进行了分离纯化,绘制出了分离曲线;并对纯化出的多糖进行了分子量、单糖组成等的测定及结构分析。其主要结果如下: 1.冠突散囊菌胞外多糖提取工艺的研究 通过正交试验确定了冠突散囊菌胞外多糖的最佳提取条件:冠突散囊菌液体发酵液浓缩至原体积的1/4,乙醇浓度95%,乙醇沉淀时间10h。分别得到两种多糖ECP和ECP~#,其提取量分别为195.2μg/mL和136.8μg/mL,其粗多糖中总糖含量分别为62.2%和70.1%。 2.冠突散囊菌胞外多糖的分离、纯化与性质研究 冠突散囊菌液体深层发酵滤液经浓缩,醇析,透析冻干得多糖粗品。采用DEAE-52纤维柱色谱和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱色谱对粗多糖ECP和ECP~#进行分离纯化研究。结果表明: 在弱阴离子DEAE-52交换柱上,经分步洗脱,粗多糖ECP和ECP~#分离后分别得到4个部分,其中,1.0MNaCl洗脱部位含量最多,分别达到68.69%和46.83%。 应用凝胶色谱法Sephadex G-100(1.6×100)分离多糖ECP-A后得组分ECP-A1和ECP-A2,分离多糖ECP~#-A后得组分ECP~#-A1和ECP~#-A2,经透析,冻干,经进一步的凝胶层析证明ECP-A1,ECP-A2,ECP~#-A1和ECP~#-A2均为单一组分;紫外光谱扫描表明ECP-A,ECP~#-A,ECP-A1,ECP-A2,ECP~#-A1和ECP~#-A2在260nm和280nm均无明显的吸收,表明这六部分中蛋白质和核酸的含量都很低或无;运用凝胶柱层析法测定ECP-A1,ECP-A2,ECP~#-A1和ECP~#-A2的分子量分别为8.61×10~4D,1.75×10~4D,1.18×10~5D和2.6×10~4D。 气相色谱分析表明ECP-A1,ECP-A2,ECP~#-A1和ECP~#-A2主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖组成。其组成摩尔比分别为12.73:2.47:23.75:1:1.79;0.97:3.13:2.76:1:0.81;0.18:0.93:0.05:1:0.23;1.43:6.31:0.73:1:0.85。 运用高碘酸氧化和Smith降解相结合IR图谱对冠突散囊菌多糖进行结构分析。分析表明ECP-A1,ECP-A2,ECP~#-A1和ECP~#-A2是以α(1→3)、α(1→6)、α(1→2)或α(1→4)糖苷键连接的多糖;单糖残基以吡喃型存在;IR结果表明该多糖是一种不含糖醛酸的中性杂多糖或糖醛全部以钠盐的形式存在。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:TS201.2

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【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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