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《湖南农业大学》 2007年
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复方三角风注射液的研制

唐小武  
【摘要】: 乳房炎是奶牛的一种常见多发病,是奶牛业生产中花费最多的疾病之一。乳房炎的治疗主要采用抗生素和中草药治疗,由于抗生素的残留及耐药性问题,中草药治疗乳腺炎已成为国内外研究的热点。本研究根据奶牛乳房炎致病菌的特点,选用三角风、紫菀、威灵仙等5味药进行单方有效成分和体外抑菌探索,开发出纯中药制剂复方三角风注射液,现将研究结果报道如下: 1本文首次报道了三角风的化学成分。 本试验根据试管预试法和圆形滤纸层析法的特征性显色反应、沉淀反应和色谱结果分析。结果表明:三角风化学成分主要有皂苷、有机酸、生物碱、鞣质、酚性成分、糖类等。 2本文首次报道了三角风有效成分和生物碱的提取与体外抑菌结果。 本试验采用经典的醇类溶剂提取法。从300g三角风生药中提取出总生物碱0.8453g,得率为0.28%。抑菌结果表明:三角风乙醇浸膏水溶液和三角风生物碱对5种兽医临床常见病原微生物均有较强的抑菌作用。特别是总生物碱对金色葡萄球菌、链球菌最敏感。 3对三角风的有效成分采用系统溶剂法进行了分级分离研究,并对分离出来的每一级化合物进行了体外抑菌试验和得率测定。 用系统溶剂法对三角风乙醇提取物的水溶液进行萃取分离,萃取物的得率为:正丁醇萃取部分得率最高(2.04%)>剩余水溶液部分(1.20%)>乙酸乙酯萃取部分(0.20%)>氯仿萃取部分(0.13%)>石油醚萃取部分(0.04%);萃取物的抑菌结果:除剩余水溶液部分无抑菌作用外,其余4部分都一定的抑菌效果,正丁醇萃取部分抑菌效果最好,特别对巴氏杆菌和链球菌最为敏感,。 4建立了分离和鉴定三角风皂苷类化合物的TLC、HPLC试验条件方法 根据有皂苷的物理化学性质和有机物的极性特点,利用展开剂的常规方法与Glajch三角形法相结合,筛选出分离总皂苷的薄层层析展开剂体系。筛选结果为:甲醇:正丁醇:氯仿(16:16:67,V/V),其Rf值分别为0.30、0.38、051、0.62。 对HPLC洗脱剂、洗脱流速、洗脱柱温度、进样量、波长等条件进行逐步筛选,筛选结果为:HPLC条件:流动相:乙腈—水,柱温30℃,流动相流速为1.0ml/min,进样量:10ul,波长:214nm。 5对紫菀进行了化学成分鉴定、有效成分提取及体外抑菌研究 本试验根据试管预试法和圆形滤纸层析法特征性显色反应、沉淀反应和色谱结果表明:紫菀化学成分主要含有生物碱、有机酸、黄酮类、多糖、酚类、鞣质、黄酮类、植物三萜和挥发油等。与有关紫菀化学成分分析文献报道比较,与本试验的研究结果基本相似,但我们的结果还检验出了多糖和生物碱,且生物碱的含量达0.1523%;说明紫菀的化学成分存在地方差异,其生物碱的有无及含量高低受生长环境、季节等多因素的影响。 本文首次用紫菀乙醇提取液和生物碱对兽医临床常见的病原微生物进行了抑菌研究,结果表明:紫菀对沙门氏菌、巴氏杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌都具有较好的抑菌和杀菌作用。 6复方三角风注射液生产工艺研究 根据酸水提取法、超声提取法、水提取法的体外抑菌效果和制剂的稳定性进行筛选出酸水提取乙醇沉淀法为复方三角风注射液生产工艺,用酸水提取乙醇沉淀制备的复方三角风注射液为棕红色澄清透明液体,PH值为6.0±0.3,每1ml注射剂相当于生药2g,规格10ml/支、5ml/支。 7复方三角风注射液安全性评价 对复方三角风注射液制剂的稳定性、热原、溶血性、过敏源、刺激性进行检验以及急性毒性试验评价都符合《中华人民共和国兽药典》(2005年版)注射液的规定,适合肌肉注射给药。 8复方三角风注射液的临床疗效研究 为了便于确定临床的使用剂量和使用方法,对不同时间、不同地点患乳腺炎120头奶牛进行随机分为4组:高剂量(0.1ml/kg.bw)、中剂量组(0.05ml/kg.bw)、低剂量组(0.025ml/kg.bw)和对照组(注射10ml/头的生理盐水),给药组治疗有效率结果为96.6%、86.6%,53.3%。根据临床治疗结果、给药剂量综合考虑,0.05ml/kg.bw适合用于作复方三角风注射液的临床治疗使用剂量。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S853.7

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