收藏本站
《湖南农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

芸薹素合成基因PSC1导入番茄的研究

梁成亮  
【摘要】: 番茄是重要的蔬菜作物,在我国种植面积大,但单位产量低,抗逆性差,病虫害严重。为了解决这个问题,番茄的育种工作一直没有停止过,常规育种和杂交育种是番茄育种中应用最广的方法,通过育种不断创造出新品种,获得了较高产、优质、抗病虫的番茄。但是自然界已存在的番茄种植资源已被番茄育种工作者几乎全部利用完,现行的育种无疑是在已存在的种植资源中重复利用,无法再创造真正的新品种。借助转基因技术将芸薹素合成基因PSC1导入番茄,并通过基因在番茄中的过表达,使芸薹素在番茄中含量增加,从而达到增产、优质、抗逆等效果。为了将PSC1基因成功导入到番茄并表达,本研究进行了以下工作: 1.建立花序浸泡法转化体系 通过比较多种转基因方法的优缺点,确定了以农杆菌介导的花序浸泡法为获得转基因番茄的最佳转化法。转化菌液为农杆菌、MS、6-BA和表面活性剂Silwet L-77的悬浮液,为使转化菌液侵染活力最强,对悬浮液中各个成分的终浓度以及农杆菌培养时间都做了研究。在植株开花前5-10天用转化菌液浸泡花序,并套袋处理2-3天。植株上直接收获种子进行筛选。 2.选择合适的筛选方法 本文通过试验,对三种主要的筛选方法进行了比较,确定在培养皿中用Kan与营养液的混合液培养转化种子进行抗性筛选为最佳的筛选方法,并确定50mg/L为Kan最佳筛选浓度。通过筛选共得到33株阳性株。通过PCR鉴定证明外源基因已导入番茄。 3.内含子增强基因表达的初步研究 本研究分别将1542bp PSC1的cDNA片段和3105bp全长DNA通过分子克隆的方法连入带有35S启动子的pROK2双元载体中,分别构建了p16和p14两种转化载体,通过花序浸泡法将p16和p14导入番茄中,得到的转基因植株分别命名为T16和T14。通过观察,转基因植株的表型比对照植株高大,生长状态好。T14植株又比T16植株更高大,这初步证明了PSC1基因的内含子对该基因的表达起着增强作用。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S641.2

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曹为玉,赵万英,郑燕棠,王民;测定出侵染抗TMV的TMV—2~a基因株系[J];植物病理学报;1988年02期
2 贤;耐热性好的番茄品种“台中亚蔬4号”[J];福建农业科技;1991年05期
3 张文兴;番茄品种——粉冠888F_1、红冠2号[J];农业科技通讯;2004年08期
4 胡景河;;两个硬果型番茄品种越夏栽培技术[J];中国蔬菜;2006年07期
5 周林;曾国平;;番茄花药培养研究进展[J];北方园艺;2007年11期
6 陈仁;林文;林明忠;;嫁接防治番茄青枯病试验初报[J];福建热作科技;2008年01期
7 韩秀梅;;日光温室番茄品比试验[J];北京农业;2008年30期
8 查素娥;张春奇;李红波;;马铃薯嫁接番茄试验初报[J];黑龙江农业科学;2010年01期
9 陈振德;王佩圣;周英;吉玉玲;;筛选抗南方根结线虫的番茄品种[J];中国蔬菜;2010年18期
10 徐东旭;宣惠明;张苏珏;;秋冬茬番茄无公害栽培[J];农家致富;2011年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 项国栋;吴娜;李荣;邹德乙;;腐植酸番茄专用底肥在番茄上适宜用量试验研究[A];2010中国腐植酸行业低碳经济交流大会暨第九届全国绿色环保肥料(农药)新技术、新产品交流会论文集[C];2010年
2 方丽;王汉荣;茹水江;王连平;;番茄品种对叶霉病菌的抗性评价[A];保护地农作物有害生物综合治理技术[C];2005年
3 赵廷昌;时涛;李国庆;孙福在;;感细菌性斑点病番茄品种上存有抗病基因pto序列[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
4 杨雅云;罗文富;杨艳丽;;云南番茄晚疫病菌生理小种的研究[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
5 杨红丽;王子崇;;多效唑对番茄穴盘育苗质量的影响[A];河南省植物生理学会三十周年庆典暨学术研讨会论文集[C];2010年
6 王冬梅;康立功;许向阳;李景富;;热胁迫对番茄叶片主要生理生化指标的影响[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
7 李昌文;杨向东;杨长楷;阮继伟;木万福;;元谋干热区冬季番茄新品种引种试验[A];云南省作物学会2004—2006年优秀论文选集[C];2006年
8 庞淑婷;郭玉玲;施祖华;;B型烟粉虱对不同番茄品种的选择及适生性研究[A];科技创新与绿色植保——中国植物保护学会2006学术年会论文集[C];2006年
9 严从生;方凌;张其安;王艳;王明霞;刘茂;董言香;江海坤;;早春大棚栽培番茄品种比较试验[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
10 曲佳;须晖;王蕊;马健;李天来;;基于叶长和叶宽的番茄叶面积简易测算方法的研究[A];中国园艺学会2010年学术年会论文摘要集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 武汉市蔬菜科学研究所 骆海波 龙启炎 徐翠容;耐储运番茄品种欧盾[N];江苏农业科技报;2009年
2 本报记者 柯士雨;番茄“红”了 日子“火”了[N];贵阳日报;2010年
3 铁岭;番茄品种多 选种莫盲目[N];山西科技报;2004年
4 王世刚;番茄品种利生10号[N];山西日报;2000年
5 温义昌;番茄品种介绍[N];农民日报;2003年
6 ;我国番茄品种改良的进展[N];农民日报;2000年
7 本报记者 李白蕾 李淑娟;“洋上加洋”喜洋洋 “番中有番”翻一番[N];福州日报;2011年
8 杨月清;她从没有离开过番茄[N];陕西日报;2007年
9 李新生;番茄品种迷人眼 选种因素考虑全[N];山西科技报;2002年
10 宫文文;当前番茄不上色是咋回事[N];河南科技报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 弓鹏娟;基于潘那利番茄渐渗系发掘干旱胁迫响应基因及功能分析[D];华中农业大学;2010年
2 鲍碧丽;番茄乙烯受体调控规律的研究[D];浙江大学;2008年
3 刘玉凤;番茄光合作用对低夜温及其恢复的响应机理研究[D];沈阳农业大学;2011年
4 齐明芳;番茄花柄脱落相关基因表达谱分析及多聚半乳糖醛酸酶性质研究[D];沈阳农业大学;2011年
5 李金红;番茄花柄脱落相关基因LelDL和LeHAESA克隆功能验证及LeMKKs和LeMPKs的钙素调控[D];沈阳农业大学;2012年
6 畅文军;番茄钙依赖性蛋白激酶的生化鉴定和功能分析[D];海南大学;2010年
7 刘浩;温室番茄需水规律与优质高效灌溉指标研究[D];中国农业科学院;2010年
8 苗立祥;番茄抗青枯病的AFLP分子标记及其相关基因的克隆[D];浙江大学;2008年
9 李琳琳;钙对SA诱导番茄抗灰霉病的作用机制研究[D];沈阳农业大学;2012年
10 葛体达;番茄对有机氮的吸收及土壤可溶性有机氮行为特性研究[D];上海交通大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁成亮;芸薹素合成基因PSC1导入番茄的研究[D];湖南农业大学;2010年
2 杨瑾;海藻糖对番茄耐盐性作用效应的研究[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
3 王晓静;番茄种质资源品质性状遗传多样性研究[D];西北农林科技大学;2010年
4 赵云霞;马铃薯L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D];山东农业大学;2010年
5 袁亭亭;嫁接栽培与施肥水平对番茄生长发育及养分吸收利用特性的影响[D];山东农业大学;2010年
6 葛婷;不同农艺措施对上海地区管棚内小气候特性及其番茄生长发育的影响效应[D];上海交通大学;2011年
7 黄金华;宽体与钢架大棚保温性能及对番茄生长和产量的差异[D];扬州大学;2010年
8 李晓晶;细胞分裂素等激素对番茄生殖器官生长及光系统Ⅱ光能吸收利用的影响[D];河北农业大学;2010年
9 齐凤坤;番茄芝麻斑病侵染机理初步探讨[D];东北农业大学;2010年
10 张晓蕾;基肥不同氮钾肥水平对大棚番茄产量和品质的影响[D];扬州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026