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《湖南农业大学》 2010年
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腺枝葡萄EST-SSR标记及亲缘关系研究

吴曼颖  
【摘要】: 腺枝葡萄(Vitis adenoclada Hand.-Mazz)是我国特有的野生葡萄种类,分布于湖南等长江以南地区。本研究以湖南农业大学葡萄园及郑州果树研究所的腺枝葡萄等其他葡萄材料,初步观察和记载了其形态学性状特征,并利用EST-SSR分子标记技术,探讨了它与其他葡萄种类与品种之间的亲缘关系。主要结果如下: 1.由19份葡萄材料叶片的8个性状进行聚类分析,种间遗传距离的变幅很大,从0.0705-2.3762,反映出葡萄属植物种类的形态多样性。 2.建立了适合腺枝葡萄EST-SSR反应体系。25ul的反应体系包括模板DNA30ng,2.5mM的MgCl2,引物浓度0.2μM,10mM的Tris-HCl,50mM的KCl,1U的Tag酶及0.2mM的dNTPs。扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性lmin,50℃退火1min,73℃延伸2min,45个循环,73℃延伸8min,最后保持在4℃。 3.用腺枝葡萄-1,贝达葡萄,户太8号,维多利亚4个形态学差异较大的葡萄种类,从16对EST-SSR引物中筛选出多态性较好的引物8对,8对引物共扩增出49条DNA带,其中37条具有多态性,占总条带数的75.5%。 4.本试验对23份葡萄材料进行EST-SSR分析,聚类结果表明:以相似系数0.8为临界值时,可将23份试材分为8类。 5.本试验在分子水平上对腺枝葡萄的分类关系进行了研究,结果表明腺枝葡萄与毛葡萄的遗传相似系数为0.9556,亲缘关系比较近,支持了牛立新将腺枝葡萄和毛葡萄都归为毛葡萄组。
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