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《中南林业科技大学》 2009年
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抗鹅膏肽的全合成及其活性测定

谢进  
【摘要】:抗鹅膏肽(Antamananide)是一种源自毒鹅膏(Amanita phalloides)的无毒环十肽,其氨基酸残基组成为环-(一Phe-Pro-Pro-Phe-Phe-Val-Pro-Pro-Ala-Phe),它是毒蕈肽和毒伞毒素转运系统的竞争性抑制剂,因此对抗鹅膏肽进行研究具有重要的意义。 本实验通过多肽自动合成仪合成抗鹅膏肽直链前体后,采用手动合成抗鹅膏肽,并对其进行制备、检测分析,对制备后的抗鹅膏肽进行活性测定,其研究结果如下: (1)本实验对抗鹅膏肽直链前体的合成采用的是日本岛津PSSM-8型多肽自动合成仪合成,在对其反应程序进行优化和改进后,其得率可达93%。抗鹅膏肽直链前体的自动合成原理与固相人工合成原理相同,与固相人工合成相比自动合成的优势有:安全,实验周期短,缩合率高,得率高等。并对抗鹅膏肽直链前体进行测序分析,代替质谱分析,提高了合成序列的可信度。 (2)对于抗鹅膏肽直链前体的环化方法,本实验分别采用了DCC-HOBt法,DPPA法和DMF法,对抗鹅膏肽直链前体进行环化,并对环化结果进行分析比对,得出DPPA法是其中最有效的环化方法,可获得纯度为35.55%的抗鹅膏肽。在对抗鹅膏肽的制备分离纯化后,可得到纯度为93.3%的抗鹅膏肽样品。 (3)本实验对抗鹅膏肽直链前体样品和抗鹅膏肽样品进行检测,通过紫外分光光度计的波长扫描得220nm为两种样品的最佳检测波长;通过红外光谱分析得到两种样品官能团骨架,各种键之间的伸缩振动和变形振动的异同,较为系统的对两者的结构,性质进行了分析比对。 (4)在对抗鹅膏肽的活性测定部分,使用的是毒性比鹅膏肽较小的鬼笔环肽,其LD50在1.8-2.2mg/kg,在对小鼠进行肌肉注射鬼笔环肽毒素后36h,对照组小鼠死亡,而同时注射抗鹅膏肽样品的实验组小鼠的死亡时间推后了12h。
【学位授予单位】:中南林业科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R914;R96

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【参考文献】
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