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《中南林业科技大学》 2011年
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油茶主要病害拮抗放线菌F10有效成分及菌剂研究

杨蕾  
【摘要】:微生物是筛选优良生物农药的重要来源之一,放线菌是一种能够产生多种有效代谢产物,具有良好的抑制植物病原菌生长和促进植物生长作用的重要微生物资源。F10菌株是从湖南油茶根际土壤中分离得到的一株对油茶病害拮抗效果较好的放线菌菌株,经鉴定为链霉菌属球孢链霉菌。室内生物测定表明,拮抗放线菌F10及其发酵液对油茶及其它林木多种病害的抑制率可达80%以上,是一株很有开发潜能的广谱生防菌株。 本论文以油茶主要病害拮抗放线菌F10菌株为材料,对菌株的发酵工艺、代谢物稳定性进行了系统研究,对其主要活性代谢产物的分离纯化和结构鉴定方面进行了初步分析,并对F10生防菌剂的研制及林间应用进行了探索研究,主要研究结果如下: 1、放线菌F10发酵工艺及其稳定性研究。为了提高放线菌F10菌株发酵液抑菌活性物质的产量,以放线菌F10发酵液菌体干重和抑菌活性为主要指标,研究不同发酵培养基、不同碳源、氮源等营养因子,以及接种量、装液量、初始pH值等非营养因子对F10菌株发酵液生物活性的影响;采用不同的酸碱、热、紫外线照射及传代处理,结果表明:F10菌株最佳发酵培养基为:酵母粉0.5%,葡萄糖1%,磷酸二氢钾0.1%,氯化钠0.1%,碳酸钙0.3%,pH自然;最优发酵条件为初始pH=7.0,发酵时间168h,最适接种量为10%,装液量100 mL/300m L。F10的热稳定性较差,在pH为12时仍有较好的抑菌活性,在传代10代后仍有较好的抑菌活性。 2、拮抗放线菌F10有效成分分析。捷克氏八溶剂系统纸层析结果表明,F10所产生的抑菌活性物质可能是弱极性的脂溶性物质,或是含脂溶性成分较多;经pH纸层析表明,F10发酵产物呈中性;HPLC分离纯化后,经生物活性跟踪测定,确定抑菌活性最好的组分为H2;经液质联用分析,确定H2的分子量为402。 3、生防放线菌F10菌剂研制。根据F10的生物学性质,选择将生防菌株F10制成可湿性粉剂。经抑菌活性测定,润湿性、分散性、悬浮性综合评价以及货架期长短测定,最终确定菌剂的最优配方为添加40%原粉,38%高岭土,10%木质素磺酸钠,7%SDS,5%腐植酸;菌剂存放6个月F10的抑菌活性仍为78.8%。 经盆栽实验表明,该菌剂对油茶炭疽病的预防和治疗效果均很良好,500倍的菌剂稀释液的防治效果可达80%以上,优于对照药剂多菌灵的防治效果;F10菌剂对油茶叶枯病有一定的防治效果,且治疗效果优于预防效果,与对照多菌灵相比,F10菌剂对油茶叶枯病的防治效果呈现明显优势。通过观察在油茶苗圃上施用该菌剂的效果,发现其不仅可以防治油茶苗木病害,亦可有效促进油茶幼苗的生长。
【学位授予单位】:中南林业科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S763.7

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