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《南华大学》 2011年
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银杏叶提取物联合灯盏细辛对兔视网膜神经节细胞保护作用的实验研究

王明良  
【摘要】:目的:本课题是在慢性持续性高眼压动物模型建立的基础上,观察银杏叶提取物联合灯盏细辛对新西兰白兔慢性持续性高眼压模型视网膜神经节细胞的保护作用,从而探讨其保护机制。 研究方法:对20只新西兰白兔进行眼压测量,排除眼压异常。随机抽取4只为正常对照组,其余新西兰白兔双眼前房内注射糜蛋白酶建立慢性高眼压模型,造模后测量24h及72h的眼压,24h眼压30mmHg ,72h眼压26.6mmHg为造模成功。造模成功的家兔16只随机分为4组,每组8只眼。造模后72h开始治疗,共治疗4w。治疗方法如下:银杏叶A组:银杏叶提取物150mg/Kg灌胃,每日1次;灯盏细辛B组:灯盏细辛150mg/Kg灌胃,每日1次;联合用药C组:银杏叶提取物150mg/Kg联合灯盏细辛150mg/Kg灌胃,每日1次;模型对照D组:不予任何治疗。各组兔于开始治疗第29d经耳缘静脉注射空气栓塞致死,立即摘取眼球,在眼球赤道部用5mL注射器抽取部分眼内组织后置换等量的甲醛溶液,置入甲醛溶液固定24h,石蜡包埋,切片,HE染色,制成切片后用Olympus光学显微镜观察视网膜各层病理改变;计算各层RGCs胞核内AgNOR染色后银染颗粒的数目,分析细胞的活性与功能情况;免疫组化方法检测新西兰白兔视网膜caspase-3蛋白表达情况;TUNEL法检测视神经节细胞凋亡细胞,及正常的视神经节细胞。 结果:1.α-糜蛋白酶(0.2ml)(2667.2μkat)注入新西兰白兔眼后房,造成实验性慢性高眼压至少1m,术后眼压维持在30mmHg以上。高眼压下视网膜中内界膜至节细胞层外界的厚度明显变薄,较正常对照眼差异有统计学意义(P0.05)。 2.视网膜神经节细胞层中TUNEL阳性细胞数从高到低依次为模型对照组、单纯用药组、联合用药组、正常组,四组间凋亡指数两两比较差异都具有统计学意义(P0.05)。 3.正常组和联合用药组RGCs细胞核内银染颗粒数比较差异无统计学意义(P﹥0.05);模型对照和单纯用药组RGCs细胞核内银染颗粒明显减少,与正常组和联合用药组相比,差异都具有统计学意义(P0.05);用药组较模型对照组多,差异也具有统计学意义(P0.05)。 4.各组视网膜神经节细胞层Caspase-3蛋白阳性表达较正常组明显增强。其中模型对照组阳性细胞数最多,联合用药组也明显低于用药组。四组间两两比较差异都具有统计学意义(P0.05)。 结论:1.α-糜蛋白酶(0.2ml)(2667.2μkat)注入新西兰白兔眼后房,可获得持续、稳定的实验性慢性高眼压模型。 2.银杏叶提取物联合灯盏细辛对持续性高眼压导致的视网膜神经节细胞损伤的有显著保护作用。 3.银杏叶提取物联合灯盏细辛对新西兰白兔视网膜神经节细胞保护作用可能与视网膜神经节细胞Caspase-3的表达下调有关。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285

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