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《南华大学》 2011年
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HCV核心蛋白对HepG2细胞Bax与Bcl-2表达的影响

刘玲玲  
【摘要】:目的: 研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核心蛋白(core protein, C)对HepG2细胞B细胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphoma -2, Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)表达的影响,以探索HCV核心蛋白与HepG2细胞凋亡的关系。 方法: 选取我国最流行的1b型HCV RNA,RT-PCR扩增出HCV-1b-C基因,经双酶切后连接到pcDNA3.1(-),构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/HCV- 1b-C;利用脂质体将其转染HepG2细胞,RT-PCR及Western Blot检测其mRNA及蛋白。将细胞分为pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C组、pcDNA3.1(-)组及空白对照组,检测Bax与Bcl-2表达,分析HCV-1b-C对HepG2细胞Bax与Bcl-2表达的影响。 结果: 1.成功构建HCV-1b-C基因真核表达载体pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C;瞬时转染HepG2细胞后,成功表达HCV C mRNA及蛋白。 2. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C组的Bax的mRNA及蛋白相对表达量减少,分别与pcDNA3.1(-)组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P0.01);而pcDNA 3.1(-)组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。 3. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C组的Bcl-2的mRNA及蛋白相对表达量增多,分别与pcDNA3.1(-)组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P0.01);而pcDNA 3.1(-)组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。 结论: 1.成功构建1b型HCV核心蛋白真核表达载体pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C。 2. 1b型HCV核心蛋白可使HepG2细胞Bax减少,Bcl-2增多,降低Bax/Bcl-2比值,这可能是HCV感染后抑制细胞凋亡的机制之一。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R512.63

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【参考文献】
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