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《南华大学》 2006年
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RUNX3基因在胃癌中表达及其表达下调机制的研究

曾超  
【摘要】:(一)胃癌组织中RUNX3基因的表达及其突变、杂合性缺失、甲基化检测 目的 为阐明RUNX3基因异常与胃癌发生发展的关系,本文从mRNA及蛋白质水平,检测胃癌组织中RUNX3基因的表达;并从基因的结构上,分析胃癌组织中RUNX3基因的突变、杂合性缺失及甲基化状况,评价RUNX3基因异常在胃癌发生及演进过程中作用与地位。 方法 采用RT-PCR技术,分析胃癌组织RUNX3基因mRNA的表达状况;应用WesternBlot、免疫组织化学技术,检测胃癌发生发展过程中RUNX3蛋白表达水平的改变;施用MSP、PCR-SSCP和微卫星结合PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,从基因结构(DNA)水平,分析胃癌组织中RUNX3突变、杂合性缺失、甲基化。 结果 免疫组织化学法结果显示:RUNX3蛋白表达定位于正常胃粘膜上皮细胞的胞浆及胞核;45例正常胃粘膜组织中,RUNX3蛋白均为阳性表达,表达率为100%;45例胃癌组织中呈阳性反应者仅为23例,阳性率为51.13%;结果表明胃癌组织中存在RUNX3蛋白的表达下调,其阳性表达率明显低于正常胃粘膜组织(P<0.05)。RUNX3蛋白在不同分化程度胃癌中的阳性表达率分别为:高分化组80.00%(12/15),中分化组53.84%(7/13),低分化组23.52%(4/17),表明RUNX3蛋白表达与胃癌分化程度有关,差异有显著性意义(P<0.05)。有淋巴结转移胃癌组RUNX3蛋白阳性表达率仅为33.33%(7/21),无淋巴结转移胃癌组RUNX3蛋白阳性表达率为66.67%(16/24),差异有显著性意义(P<0.05),结果提示,胃癌中RUNX3蛋白表达的降低可能与淋巴结转移有关。 Western Blot结果显示:25例胃癌组织中RUNX3蛋白表达强度为0.495±0.161,而在相对应的正常胃粘膜组织中其表达强度为1.274±0.108,RUNX3蛋白表达较正常胃粘膜组织明显降低。RUNX3在高、中、低分化胃癌组中蛋白表达强度分别为
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