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《南华大学》 2006年
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迷迭香酸抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡作用及机制的探讨

颜涛  
【摘要】:目的:观察迷迭香酸(Rosmarinic acid,RosA)对谷氨酸(Glutamic acid,Glu)诱导PC12细胞凋亡的作用,初步探讨迷迭香酸抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的机制。 方法:以谷氨酸损伤的PC12细胞为模型,用普通光镜和吖啶橙(AO)荧光染色观察谷氨酸对PC12细胞形态和核形态的影响;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察迷迭香酸对PC12细胞存活率的量-效关系和时-效关系;用碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测迷迭香酸对PC12细胞凋亡率的效应;用RT-PCR、间接免疫荧光法和Western blot分别检测迷迭香酸对PC12细胞Bcl-xl和Bax mRNA含量和蛋白质表达的影响。 结果:用不同剂量谷氨酸(1、5、10、12.5、15、20mmol/L)孵育PC12细胞24h后,该细胞存活率随药物浓度的增加依次下降,12.5mmol/L谷氨酸孵育细胞24h后,其细胞形态发生了明显的改变,并出现细胞核浓缩、碎裂和凋亡小体等凋亡特征;Bcl-xl表达下调,Bax表达上调。用100μmol/L迷迭香酸预处理细胞1h后,再用12.5mmol/L谷氨酸孵育细胞24h,细胞凋亡率由21.63%±0.25%下降至4.23%±1.32%(P<0.01),Bcl-xl表达上调(P<0.01),Bax表达下调(P<0.05)。加Bcl-xl蛋白质阻断剂HA14-1(40μmol/L)后,迷迭香酸抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的作用完全被取消(11.62%±0.65% vs 2.55%±0.13%),其凋亡率甚至比单独用Glu处理组还高(11.62%
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R285

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