收藏本站
《南华大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

耐辐射融合菌株的构建及其对铀的吸附试验研究

任柏林  
【摘要】: 核素铀的辐射杀伤力以及对生物体的毒性,限制了生物吸附剂的发展,致使其在低浓度含铀废水的处理中进入了一个瓶颈。本研究利用单亲灭活原生质体技术对柠檬酸杆菌和奇球菌原生质体进行了融合,成功构建了对铀具有耐辐射的融合菌株,筛选出来的融合子传代6次,性状稳定。考察了原生质体制备条件与融合过程中的影响因素,融合子的稳定性、耐受性、及其吸附铀过程中的影响因素,并对融合子吸附铀的性能和亲本进行了比较。 试验确定了柠檬酸杆菌原生质体最佳制备条件为:溶菌酶浓度1.5mg/L,酶解时间90min,酶解温度37℃,此条件下的原生质体形成率为93%,再生率为36%;奇球菌原生质体的最佳制备条件为:溶菌酶浓度2.0mg/L,酶解时间120min,酶解温度37℃,形成率为86%。随着溶菌酶浓度,酶解时间的增加和温度的上升,原生质体的形成率呈上升趋势,而再生率则逐渐下降。 奇球菌和柠檬酸杆菌融合影响因素正交试验表明:最佳融合条件为PEG浓度40%,融合时间10min,融合温度42℃,pH值8,其中PEG的浓度是主要影响因素,在最佳融合条件下的融合率为2.74×10~(-7)。较高的温度,pH值可以促进原生质体的融合,由于PEG对细胞的毒害作用,过长的融合时间和过高的PEG浓度会对原生质体造成伤害。Ca~(2+)存在的情况下,Ca~(2+)和PO_4~(3-)形成不溶于水的配合物,成为细胞间的钙桥,从而引起融合。 融合子对铀的耐受性试验表明,当铀浓度为20、40、60、80mg/L时,融合子表现出良好的耐受性,但在90mg/L时,很难生长,在100mg/L时,不能生长。融合子的最高耐受极限为85mg/L。在铀浓度85mg/L的培养基中,柠檬酸杆菌已不能生长并逐渐死亡,奇球菌在经过45h的适应期后开始生长,融合子在经过22h的适应期后开始生长,并生长良好。 融合子吸附铀正交试验考察了菌体浓度、菌龄、pH、吸附时间、U(VI)浓度5个因素对吸附的影响。融合子吸附铀最大理化因素为pH值,其次是菌体浓度和U(VI)的浓度,菌龄的影响因素最小。最佳的吸附条件为菌体浓度3g/L,菌龄12h,pH值6,吸附时间1.5h,U(VI)浓度25mg/L。在此条件下进行吸附,得到的吸附率为93.12%。 融合子与亲本吸附性能对比发现,在pH值为6,铀浓度为40mg/L,菌体浓度大于2g/L时,吸附率和吸附量都比同期的奇球菌和柠檬酸杆菌略高,吸附率比柠檬酸杆菌高出近0.9%,吸附量高出0.1mg/g。但吸附率和吸附量并没有大幅度的增加,可能是融合后基因重组引起引物结合位点改变的结果,或者融合子从原菌株获得的遗传信息不完全所致。 研究工作为耐辐射基因工程菌的构建可以提供参考,为研究耐辐射融合菌株在重金属、核素污染生物修复方面的应用提供借鉴。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:TL941.1

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 卢小青;;核电站电气贯穿件专用压力表组件[J];硅谷;2011年14期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 卫志明;许智宏;;外源DNA转化高粱原生质体[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
2 刘永翔;刘作易;;戴氏绿僵菌原生质体的形成及再生[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
3 王鹏;李伟伟;朱迎紫;方侃;何森;孟凡欣;程瑛琨;;均匀设计法优化纤维堆囊菌ATCC15384原生质体的制备条件[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
4 王广策;叶乃好;曾呈奎;;藓羽藻原生质体再生植株的形成与发育[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
5 郭文武;Grosser JW;邓秀新;;柑橘原生质体操作技术与育种新进展[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
6 林栖凤;李冠一;;第一章 植物遗传转化的主要方法(一)[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
7 程红;周嫦;;三种植物幼嫩花粉原生质体的分离与培养[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
8 王镨;许英;张信强;;香菇(Lentinus edodes)原生质体再生菌丝的形状发生[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
9 王文涵;王丽达;许浩然;郑田;孟凡欣;刘洋;;响应面法优化纤维堆囊菌So ce 90原生质体的制备条件[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
10 张鉴铭;郑玉萍;;鸡(土从)菌丝原生质体的分离和培养[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 通讯员 汪学峰;九江石化:耐辐射聚丙烯专用料供不应求[N];现代物流报;2010年
2 奕 夫;耐辐射细菌“乘坐”陨石来地球?[N];大众科技报;2003年
3 记者 袁新文;九江石化召开新产品分析会[N];中国石化报;2010年
4 晓王;2006年机械行业钢材消费五大特点[N];中国建材报;2006年
5 本报记者 周群 罗忠河;机械工业仍将保持平稳增长[N];中国冶金报;2005年
6 彭志英;细胞工程在食品工业中的应用[N];粮油市场报;2001年
7 刘涛;聚酰亚胺纤维研发获突破[N];中国纺织报;2006年
8 张兴刚 冯桂;有机硅中间体企业要发展就要创新[N];中国高新技术产业导报;2006年
9 徐彬;神奇细菌的第三种假说[N];南方周末;2004年
10 刘方;GE东芝在华再建有机硅厂[N];中国工业报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 叶乃好;藓羽藻原生质体团聚、再生及其相关的应用研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
2 吕芳;羽藻再生过程中基因表达及其光合作用的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
3 刘红全;条斑紫菜的转基因研究[D];中国海洋大学;2004年
4 张学英;草莓(Fragaria ananassa Duch.)原生质体培养及植株再生研究[D];河北农业大学;2004年
5 洪伟雄;甘蔗梢腐病病原菌—串珠镰刀菌分子生物学研究初探[D];福建农林大学;2011年
6 潘增光;苹果原生质体培养再生及融合研究[D];华中农业大学;1998年
7 郭英华;生姜原生质体培养与体细胞变异[D];中国农业大学;2005年
8 侯艳华;四株海洋放线菌遗传转化体系的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
9 熊兴耀;苎麻体细胞杂交研究[D];湖南农业大学;2000年
10 林学政;利用细胞融合技术构建富含EPA/DHA异养微藻株的研究[D];青岛海洋大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 廖莉娟;ε-聚赖氨酸的菌种选育及合成过程强化[D];江南大学;2010年
2 王娟;苜蓿原生质体分离与培养的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 赵硕;耐高渗(高糖)酵母菌株的选育[D];安徽农业大学;2010年
4 白忠彬;原生质体介导的外源性GRF基因在家兔及小鼠肌肉中的表达[D];延边大学;2002年
5 彭帅;电融合法构建海藻糖高产菌株的研究[D];吉林农业大学;2004年
6 张新峰;嗜热真菌高产木聚糖酶及其酶法制备低聚木糖的研究[D];湖北工业大学;2011年
7 王春丽;β-葡萄糖苷酶高产菌株的选育及玉米芯的诱导作用研究[D];北京化工大学;2010年
8 孟国庆;头孢菌素C高产菌株选育及发酵特性研究[D];山东轻工业学院;2011年
9 任柏林;耐辐射融合菌株的构建及其对铀的吸附试验研究[D];南华大学;2010年
10 谢华永;杨树胚性悬浮细胞系建立与原生质体融合研究[D];南京林业大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026