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《湖南中医药大学》 2011年
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田七注射液对大鼠肾纤维化的作用及TGF-β1/Smads信号转导机制的研究

吴金玉  
【摘要】:目的: 1.研究田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠模型肾脏结构和功能、细胞外基质成分等的影响,明确田七注射液抗肾纤维化的作用。 2.从TGF-β1/Smads信号转导通路研究田七注射液抗大鼠阿霉素性肾纤维化的作用机制。 方法: 1.采用切除右肾、尾静脉注射阿霉素(ADR)的方法建立阿霉素性肾纤维化大鼠模型。 2.将健康雄性SD大鼠48只随机分为正常组、假手术组、模型组和田七注射液组。正常组大鼠正常条件饲养,不造模,予以生理盐水(10mL/kg·d)腹腔注射;假手术组大鼠切除右肾后,不注射ADR,予以生理盐水(10mL/kg·d)腹腔注射;模型组大鼠按上法造模后,予以生理盐水(10mL/kg·d)腹腔注射;田七注射液组大鼠按上法造模后,予以田七注射液(2g生药/kg.d)腹腔注射给药。4组大鼠均连续给药8周后处死,收集各组大鼠的尿液、血液和肾组织。检测各组大鼠24h尿蛋白定量和肾功能(BUN和Scr),苏木素伊红(HE)和马松(Masson)染色检测大鼠肾组织病理情况并半定量评分。RT-PCR、免疫组织化学法和Western Blot法检测各组大鼠肾组织Ⅳ型胶原(CL-Ⅳ)、a-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子βⅠ型受体(TGF-βR-Ⅰ)、转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βR-Ⅱ)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad7(p-Smad7)mRNA和/或蛋白的表达。 结果: 1.切除右肾静注ADR后,大鼠尿蛋白排出增加(P0.01),肾功能BUN和Scr水平升高(P0.01),肾组织出现肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化、炎症细胞浸润等病理改变,提示肾纤维化大鼠模型建立成功。 2.与假手术组比较,模型组大鼠尿蛋白排出增加,BUN和Scr水平升高(P0.01),肾小管CL-Ⅳ和α-SMA表达增多(P0.01),提示肾纤维化大鼠存在小管上皮-间质细胞转分化(EMT)过程。与模型组比较,经田七注射液处理后,大鼠尿蛋白排出减少(P0.01),肾功能BUN和Scr水平下降P0.01),肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化、炎症细胞浸润等病理改变减轻,肾小球硬化面积及肾小管间质纤维化半定量评分均显著下降(P0.01);肾小管CL-Ⅳ和α-SMA表达下调(P0.01),提示田七注射液具有抗肾纤维化的作用,其机制可能与影响EMT过程有关。 3.与假手术组比较,阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1、TGF-βR-Ⅰ、TGF-βR-Ⅱ、p-Smad2、p-Smad7 mRNA和/或蛋白表达明著显上调(P0.01),提示阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路活化。经田七注射液处理后,阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1、TGF-βR-Ⅰ、TGF-βR-Ⅱ、p-Smad2 mRNA和/或蛋白表达显著下调(P0.01),但p-Smad7蛋白表达显著上调(P0.01),提示田七注射液的抗肾纤维化作用可能与抑制肾组织TGF-β1/Smads信号通路活化有关。 结论: 1.阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路活化,参与肾小管上皮-间质细胞转分化过程。 2.田七注射液具有抗肾纤维化和改善肾功能的作用,其机制可能与抑制肾组织TGF-β1/Smads信号通路活化介导的肾小管上皮-间质细胞转分化过程有关。
【学位授予单位】:湖南中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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