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《湖南中医药大学》 2012年
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三七有效部位对雌激素干预下大鼠子宫内膜止血、修复机制的研究

刘东平  
【摘要】:目的: 研究中药三七三类有效部位(三七皂苷、三七黄酮、三七氨酸)及三类有效部位混合物对在全周期持续外源性雌激素干预下的未成年大鼠子宫内膜组织中的PAI-1、 TF、 TFPI-2、 TGF-β1的变化,基于从纤溶、凝血因子、细胞外基质等角度探索三七有效部位对外源性雌激素作用下的未成年大鼠子宫内膜细胞因子的调控变化,分析三七有效部位对外源性雌激素作用下的子宫内膜稳定性与子宫止血修复之间的关系以及这三类有效部位之间的相互关系,探讨三七“化瘀止血”的科学内涵。 方法: 1.将160只雌性未成年大鼠随机分成空白组(40只)和模型组(120只),空白组给予生理盐水灌胃3周,模型组给予外源性雌激素(戊酸雌二醇)悬液灌胃3周。观察大鼠子宫内膜组织的形态学变化;应用免疫组化和原位杂交技术检测子宫内膜中PAI-1、 TF、 TFPI-2、 TGF-β1的变化。 2.在全周期(3周)持续外源性雌激素的干预后,对没有性周期的大鼠,随机分成6组,即模型组、连续雌激素组(简称雌激素组)、三七皂苷组、三七黄酮组、三七氨酸组、三七有效部位混合组(简称三七混合组)。各组分别给予相应的生理盐水、雌激素、三七皂苷、三七黄酮、三七氨酸、三类有效部位混合物连续灌胃2周,每周末处死每组大鼠8只,应用免疫组化和原位杂交技术检测子宫内膜中PAI-1、 TF、 TFPI-2、 TGF-β1的变化。 结果: 1与空白组相比,前三周模型组子宫内膜明显增厚,腺体和间质增生。第3周末,模型组大鼠子宫内膜TF、 TFmRNA、 PAI-1、 PAI-1mRNA、 TGF-β1的表达较空白组均升高(P0.05,P0.01);TFPI-2、 TFPI-2mRNA的表达均降低较空白组均降低(P0.05); 2.第5周末,三七皂苷组、三七氨酸组、三七混合组PAI-1、 PAI-1mRNA表达较模型组降低(P0.01);三七混合组PAI-1、 PAI-1mRNA表达较三七皂苷组降低(P0.05); 3.第4周末,三七混合组TF、 TFmRNA表达较模型组降低(P0.05);第5周,三七皂苷组、三七黄酮、三七氨酸、三七混合组TF、 TFmRNA表达较模型组和雌激素组降低(P0.01,P0.05);三七皂苷组、三七混合组TF、 TFmRNA表达较黄酮组降低(P0.01,P0.05) 4.第5周末,雌激素组TFPI-2表达较模型组降低(P0.05);三七皂苷组、三七黄酮组、三七氨酸组、三七混合组TFPI-2mRNA表达较模型组增高(P0.01,P0.05);第4周末,第5周末,三七氨酸组、三七混合组TFPI-2、 TFPI-2mRNA表达较三七皂苷和三七黄酮增高(P0.05,P0.05); 5.第4周,三七皂苷组、三七黄酮组、三七氨酸、三七混合组TGF-β1、 TGF-β1mRNA表达较模型组降低(P0.05,P0.01);三七混合组TGF-β1mRNA表达较三七黄酮组增高(P0.05);第5周,三七皂苷组、三七黄酮、三七氨酸、三七混合组TGF-β1和(或)TGF-β1mRNA表达较模型组降低(P0.05,P0.01)。 结论: 1.雌性未成年大鼠在全周期持续外源性雌激素干预后,子宫内膜多呈增生改变,成功建立了雌激素干预大鼠子宫模型。基于外源性雌激素的合理剂量,大鼠子宫内膜病理形态改变,提示与单一雌激素引起的无排卵性功血机制相似。 2.研究显示三七中三类有效部位均可降低全周期持续外源性雌激素干预下的大鼠子宫内膜组织中PAI-1的表达减弱,通过启动纤溶系统而活血止血,以三七三类有效部位混合物作用显著,这可能是三七有效部位治疗无排卵型功血的止血机制之一。 3.三七皂苷和三七三类有效部位混合物对全周期持续外源性雌激素干预下的大鼠子宫内膜组织中TF的表达减弱,其机制可能是抑制组织因子,阻断凝血系统的激活,减少炎症反应,而达到活血止血的目的。 4.三七三类成分均可升高雌激素干预后的大鼠子宫内膜TFPI-2的表达,以三七氨酸和三七三类有效部位混合物作用显著,其机制可能加强子宫内膜细胞外基质,维持子宫内膜稳定性,而减少内膜崩解出血,有利于内膜修复、重塑作用。 5.三七三类成分均可降低雌激素干预后的大鼠子宫内膜TGF-β1的表达,以三七黄酮和三七三类有效部位混合物作用显著。提示三七黄酮及混合物治疗子宫出血的作用可能与其抑制TGF-β1的过度表达有关,通过抗炎,同时改善组织微循环,促进细胞外基质的降解,起到祛瘀生新的作用。 6.本研究发现三七中有效部位对全周期持续外源性雌激素干预下的大鼠子宫内膜组织的止血修复机制中,以三类有效部位的混合物效果最优。“止血圣药”三七的三个有效部位之间的作用是相互协调的、不可分割的,这种状态也符合多因素参与的功血止血、修复机制。
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