壮骨镇痛胶囊对裸鼠乳腺癌移植瘤模型骨转移指标ITG-α_Vβ_3及BSP影响的实验研究

【摘要】：目的： 1.将人乳腺癌细胞MDA-MB-231接种于裸鼠皮下,建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型。 2.从实验角度论证壮骨镇痛胶囊预防乳腺癌发生骨转移的疗效,并从肿瘤黏附、浸润转移及分子水平初步探讨产生疗效的机理,为壮骨镇痛胶囊防治乳腺癌骨转移提供有力的药效学实验依据。 方法：BALB/c裸小鼠32只,体重(17.21±0.27)g,SPF级,雌性,运用乳腺癌细胞悬液皮下接种于裸鼠右肩胛部,以建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型,并将裸鼠随机分为四组,A组：模型组(模型对照组)、B组：预防组(壮骨镇痛胶囊预防组)、C组：治疗组(壮骨镇痛胶囊组治疗组)、D组：对照组(氯磷酸二钠胶囊对照组),每组8只,B组在接种乳腺癌细胞后次日开始应用壮骨镇痛胶囊浓缩液450mg/kg灌胃,A、C、D组待裸鼠乳腺癌移植瘤体积达到约5mm3时(两周),A组以0.2ml积蒸馏水灌胃；C组以壮骨镇痛胶囊浓缩液450mg/kg灌胃；D组以氯磷酸二钠胶囊浓缩液2g/kg灌胃,A、C、D组灌胃频率均为每日2次,持续30d。灌胃期间每5天测量一次移植瘤体积。30天后,同时处死四组动物,分离移植瘤,分别测量移植瘤组织重量,计算抑瘤率；切取标本制片,免疫组化法检测各组整联蛋白αvβ3(I TG-αv β3)和骨唾液蛋白(BSP)的表达差异。 结果： 1.经过连续两次MDA-MB-231细胞皮下接种,10天后,各组裸鼠均成瘤。 2.经不同干预方法后,各组裸鼠一般情况比较,预防组最好,治疗组及对照组一般,模型组最差； 3.各组抑瘤率比较,模型组与各用药组均有统计学差异P0.01,治疗组与对照没有统计学差异P0.05；与预防组相比有统计学差异P0.05 4.各组移植瘤组织的光镜观察结果显示,模型组的瘤细胞排列紧凑甚至重叠,结构清晰,可见癌巢的形成。用药各组的癌细胞固缩,轮廓变形,均出现不同程度的凋亡。其中预防组移植瘤组织中可见凋亡小体。 5.模型组移植瘤组织中ITG-ανβ3、BSP含量显著高于预防组、治疗组及对照组(P0.05)；治疗组和对照组组与预防组比较有统计学差异(P0.05)；治疗组与对照组无统计学差异(P0.05)。 结论：壮骨镇痛胶囊对乳腺癌移植瘤骨转移具有防治作用；能显著抑制裸鼠乳腺癌移植瘤组织中ITG-ανβ3及BSP的表达,并通过调控以上蛋白介导通路,抑制裸鼠乳腺癌移植瘤细胞黏附、浸润效应,从而达到防治乳腺癌骨转移的作用。