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《湖南中医药大学》 2017年
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艾灸与针刺对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜保护作用和胃组织代谢组学的对比研究

佘畅  
【摘要】:目的:1.复制CAG大鼠模型,观察艾灸与针刺对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃黏膜的保护作用;2.观察艾灸与针刺对CAG大鼠胃黏膜保护相关因子(EGF、TGF-α、PGE_2)的影响,从胃黏膜保护相关因子层面探讨艾灸与针刺的作用差异;3.利用核磁共振氢谱技术(~1H NMR)观察艾灸与针刺对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织代谢的影响,从代谢物层面探讨艾灸与针刺的靶器官效应响应机制的差异。方法:1.通过MNNG联合乙醇灌胃、饥饱失常法复制CAG大鼠模型,设置正常组、模型组、艾灸组、针刺组,艾灸组与针刺组分别采用艾灸、针刺干预CAG大鼠双侧足三里穴、中脘穴,观察实验大鼠的一般行为学改变、体重变化、胃组织大体变化,HE染色观察胃组织病理学变化。2.运用IHC、ELISA检测各组大鼠胃组织胃黏膜保护相关因子EGF、TGF-α和PGE_2的含量变化;3.利用~1H NMR技术检测胃组织中代谢物的变化,通过PCA、PLS-DA、OPLS-DA等分析方法对胃组织做代谢模式、差异性代谢物进行分析。结果:1.造模结束后,造模大鼠胃黏膜色苍白,黏膜层变薄,弹性减少,皱襞变平,黏液减少,有散在出血点,HE染色,光镜下胃组织病理学检查结果可见大量炎性细胞浸润,大量主细胞坏死空泡样变化,大量纤维组织充填,并有诸多集中出血点,腺体结构紊乱减少,固有腺体出现萎缩。2.艾灸与针刺干预后,艾灸组与针刺组大鼠精神状态较前好转,皮毛较前有光泽,活动度增加;体重呈现缓慢平稳增长,但与模型组比较差异不显著(P0.05);艾灸与针刺对胃组织病理学的影响显示两组胃组织病理损伤均较模型组有改善,且差异具有统计学意义(P0.05),而艾灸组与针刺组比较无显著差异(P0.05)。3.艾灸组与针刺组大鼠胃组织EGF、TGF-α含量明显高于模型组(P0.05、P0.05),艾灸组EGF、TGF-α含量与针刺组比较无明显差异(P0.05);艾灸组与针刺组PGE_2的含量明显高于模型组(P0.01,P0.05),且艾灸组PGE_2含量明显高于针刺组(P0.05)。4.各组大鼠PCA的得分图中,我们可以看出,CAG大鼠的胃组织代谢发生发生了改变,艾灸和针刺对CAG大鼠胃组织的代谢产生了影响,艾灸干预后胃组织代谢恢复得更加明显。OPLS-DA分析发现CAG大鼠胃组织共出现17个差异性代谢物,其中浓度显著升高的代谢物有7个:Lac、Gln、GSH、NAA、UDG、Ino、AMP;浓度显著下降的代谢物有10个:Leu、Tau、DMG、Bet、Ser、PC、GPC、Ura、UD、Phe。艾灸干预后浓度发生逆转的有GSH、NAA、PC、Ura,而针刺干预尚未检测到浓度发生逆转的代谢物。结论:1.MNNG联合乙醇灌胃、饥饱失常法可成功复制CAG大鼠模型。2.艾灸与针刺对性萎缩性胃炎均具有胃黏膜保护的作用。3.艾灸与针刺均可明显升高CAG大鼠胃组织EGF、TGF-α、PGE2的含量;艾灸对升高PGE2含量的调节作用更明显;艾灸与针刺对EGF、TGF-α表达的影响未体现出明显的差异。4.CAG大鼠模型胃组织存在胃黏膜细胞膜受损、黏膜细胞凋亡,神经递质发生紊乱,对大鼠神经系统造成一定的影响,机体免疫力降低,同时伴有能量代谢的异常。艾灸与针刺对CAG大鼠胃组织代谢存在差异,艾灸调节有利于CAG大鼠胃黏膜的修复和免疫力的提高。但是,从本次实验结果看,暂未发现针刺干预后浓度发生逆转的的差异代谢物,可能针刺效应的代谢作用途径有别于艾灸,其结果有待于进一步分析。
【学位授予单位】:湖南中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R245

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【参考文献】
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