收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于适配体功能化碳纳米管的细菌生物膜控制方法研究

汪胜  
【摘要】:细菌生物膜(Biofilm),又称菌膜,是主要由多糖、蛋白质、核酸及脂类等成份构成的稳定的细菌胞外聚合物。细菌感染宿主一旦形成生物膜后将难以消除,它是导致慢性感染以及耐药菌产生的一个主要诱因。因此,寻求有效的方法来控制和消除细菌菌膜具有重大研究意义。核酸适配体是通过指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选得到的单链DNA或RNA,它能够与其靶标高亲和力和高特异性地稳定结合。适配体的靶标范围包括小分子、蛋白质及细胞等。基于适配体的良好性质,它被广泛应用于疾病诊断及治疗中。单臂碳纳米管(SWNTs)是一种碳纳米材料,具有良好的荧光猝灭性、穿透性和导电性等理化性质,被广泛应用于化学、材料学和生物医学等领域。此外,SWNTs还同时具有很强的抗菌和抗菌膜能力。本论文拟以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)为目标菌,利用其菌体细胞适配体,以探究适配体能否作为靶向载体提高抗菌膜药物的作用效率为目的,构建了2个复合物并分别观测它们对铜绿假单胞菌菌膜形成或消除的作用效果。(1)SWNTs具有良好的表面性质,核酸分子能够紧密的吸附在其表面。因此,将铜绿假单胞菌菌体细胞适配体(PA-ap1)与SWNTs共同孵育后形成一个稳定的复合物(AP-SWNTs)。通过显微镜观察及结晶紫染色法得出AP-SWNTs复合物能够抑制约68%的菌膜产生,与相同浓度的SWNTs的作用结果对比,菌膜形成的抑制率提高了约36%。此外,还将AP-SWNTs与具有解离菌膜作用的物质硝普化钠(SNP)联合处理成熟的菌膜,结果AP-SWNTs和SNP共同作用能够减少约72%的成熟菌膜,效果优于SWNTs和SNP共同作用。本实验结果初步证明了适配体作为靶向载体提高抗菌膜物质作用效果的可行性,同时提供了一个处理成熟菌膜的新方法。(2)本实验利用适配体与靶标之间的高选择性,构建了一个控制细菌菌膜的复合物。在目标菌菌体适配体PA-ap1的5,-末端上修饰一个氨基,之后再将其与分子结构中带有一个羧基的抗生素环丙沙星(CPX)共同反应,形成适配体-环丙沙星共价连接物(AP-CPX)。利用紫外光谱扫描及琼脂糖凝胶电泳验证AP-CPX的形成和特异性。再将AP-CPX连接物与SWNTs共同孵育使得AP-CPX吸附并缠绕于SWNTs表面形成一个三元复合物(AP-CPX-SWNTs)。通过显微镜观察和结晶紫染色法观测AP-CPX-SWNTs对铜绿假单胞菌菌膜的形成抑制及消除的作用效果,结果表明AP-CPX-SWNTs能够抑制约90%的菌膜形成,消除约75%的成熟菌膜,作用效果明显优于其各个组分。应用AP-CPX-SWNTs处理菌膜有多个优点,具有一定的潜在应用价值。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前15条
1 贺宏斌;;核酸适配体在病原生物学中的应用研究进展[J];热带病与寄生虫学;2019年03期
2 孙玉琼;袁宝银;邓美桃;王青;羊小海;;核酸适配体序列优化策略的研究进展[J];化学传感器;2018年02期
3 许涛;彭智辉;王泽峰;周佳琪;邓乐;;核酸适配体筛选技术研究进展[J];生物技术通讯;2018年01期
4 汪靖;王进;曾家豫;;核酸适配体结合蛋白质靶标的亲和力表征方法及其在疾病诊断中的应用[J];中国生物化学与分子生物学报;2018年04期
5 李亚楠;赵洁;张傲哲;谭琰;华茜;张子剑;;核酸适配体的体外筛选方法的最新研究进展[J];生物技术通报;2017年04期
6 胡涛;杨帆;杨秀荣;;双偏振极化干涉技术实时研究三磷酸腺苷与其适配体相互作用[J];分析化学;2017年07期
7 刘洪美;栾云霞;陆安祥;陈佳祎;李成;王纪华;;核酸适配体在小分子目标物快速检测中的应用[J];食品安全质量检测学报;2017年08期
8 陈尔凝;赵新颖;屈锋;;细菌的核酸适配体筛选的研究进展[J];色谱;2016年04期
9 ;中科大筛选出特异针对点突变蛋白的适配体[J];中国科学院院刊;2015年05期
10 ;中国科学技术大学筛选出特异针对点突变蛋白的适配体[J];中国材料进展;2015年Z1期
11 仲津漫;刘鸽;文娣娣;宦怡;任静;;前列腺癌适配体的研究进展及其应用[J];现代生物医学进展;2015年29期
12 董理权;吴小高;;构建辅助器具适配体系探讨[J];残疾人研究;2014年02期
13 王开;裴志花;曲桂娟;马红霞;;适配体药物的研究现状及其在传染病防制领域的应用前景[J];中国预防兽医学报;2013年04期
14 ;生物分析中的核酸适配体[J];分析化学;2012年05期
15 申睿;唐吉军;张朝阳;郭磊;谢剑炜;;基于磁珠分离的酶联适配体检测痕量蛋白质的新型比色分析方法[J];高等学校化学学报;2009年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 屈锋;杨歌;魏强;胡猷浩;;核酸适配体三维度筛选策略初探[A];中国化学会第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会(材料分析与其它分会)论文摘要集[C];2016年
2 王开宇;林建敏;兰小鹏;;基于适配体茎环开关和链置换放大技术的铅离子荧光适配体传感器[A];第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编[C];2015年
3 林雪霞;林金明;;可控核酸适配体-芯片毛细管电泳用于细胞代谢物的研究[A];第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二分册)[C];2015年
4 上官棣华;邴涛;刘祥军;乞萃;梅宏成;张楠;常天俊;杨晓娟;;用于高选择性分离分析的核酸适配体研究[A];中国分析测试协会科学技术奖发展回顾[C];2015年
5 王梁华;胡波;郑欣;高顺祥;刘德婧;孙铭娟;焦炳华;;建立海洋生物毒素适配体筛选与优化技术平台[A];全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议论文摘要集[C];2014年
6 陈巍;赵新颖;屈锋;;毛细管电泳法筛选蛋白质的核酸适配体的初步研究[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
7 马文韬;古力;屈锋;;毛细管电泳筛选大肠杆菌适配体的初步研究[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
8 杨晓娟;邴涛;梅宏成;上官棣华;;核酸适配体用于手性拆分L型和D型色氨酸[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
9 蔡圣;刘彩云;卢建忠;;基于核酸适配体和酶循环放大的腺苷化学发光检测[A];中国化学会第十届全国发光分析学术研讨会论文集[C];2011年
10 郑冬梅;娄新徽;;一种基于结构开关型适配体的无标记荧光传感法[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张英;基于聚乙烯亚胺和核酸适配体构建免标记光学传感器检测生物标志物的研究[D];西南大学;2019年
2 叶华;脂多糖广谱型核酸适配体的定向筛选、序列优化及分析应用[D];江南大学;2019年
3 李文凯;基于核酸适配体的几种致病微生物新型检测与防治方法的建立与应用[D];湖南师范大学;2017年
4 应站明;遗传编码核糖核酸生物传感新方法研究[D];湖南大学;2018年
5 程莉娟;功能核酸控制沙门氏菌致病性的研究[D];湖南师范大学;2018年
6 李发兰;牛奶氨基糖苷类抗生素残留的适配体传感器制备方法研究[D];东北农业大学;2018年
7 杜晓娇;农产品中微囊藻毒素检测用氮杂石墨烯基电化学适配体传感器的研究[D];江苏大学;2018年
8 白云龙;基于适配体毛细管电泳法与荧光开关法检测蛋白质[D];山西大学;2018年
9 陆涛峰;核酸适配体筛选技术平台建立及应用研究[D];中国农业科学院;2018年
10 闫凯;基于复合光电材料构建适配体传感与自供能传感体系研究[D];华中科技大学;2018年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁瑶;黄曲霉毒素核酸适配体的结构优化、表征及应用[D];江南大学;2019年
2 杜高尚;基于核酸适配体的孕酮快速检测新方法研究[D];上海交通大学;2017年
3 王荣华;基于光学适配体传感器的蔬菜中甲拌磷和水胺硫磷分析方法研究[D];江南大学;2019年
4 孙羽菡;单增李斯特氏菌及副溶血性弧菌适配体的结合机制与应用研究[D];江南大学;2019年
5 朱俊亚;基于电化学适配体传感器的牛奶中氨苄青霉素检测方法研究[D];河南科技大学;2019年
6 张佳佳;cell-SELEX技术筛选人乳腺癌核酸适配体及序列优化[D];长春理工大学;2019年
7 周佳琪;鼠伤寒沙门氏菌菌毛蛋白FimA特异性适配体及多克隆抗体的制备研究[D];湖南师范大学;2019年
8 孙蕊;基于适配体功能化磁珠的荧光传感器检测食品和水环境中的Hg~(2+)[D];吉林大学;2019年
9 唐云飞;制备二氧化钛异质结纳米结构应用于电/光电化学适配体传感器[D];河南大学;2019年
10 巫朦朦;粪肠球菌特异性单链DNA适配体的筛选及其应用研究[D];江南大学;2019年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 庄乾坤;湖南大学提升我国肿瘤活体实时成像技术[N];科学时报;2011年
2 潘文;核酸适配体在医药领域应用前景广阔[N];中国医药报;2010年
3 黄旻 殷向佳;走在分子抗癌的路上[N];团结报;2015年
4 于洋 田野;蛋白质检测有了新方法[N];吉林日报;2011年
5 本报记者 谢水旺;陆金所首席风控官杨峻:信用评级等传统风控技术仍是最有效的[N];21世纪经济报道;2016年
6 记者 吴长锋 通讯员 周慧;重金属超标实现快速实时检测[N];科技日报;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978