收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

古尼虫草液体深层发酵及化学成分的研究

傅岚  
【摘要】:本文以产于湖南浏阳市的古尼虫草[Cordyceps gunnii (Berk.)Berk.]及深层发酵的古尼虫草菌丝体为实验材料,利用菌种分离技术,液体深层发酵、PCR、柱层析、纸层析、紫外、红外光谱技术和化学反应等手段,对古尼虫草菌丝体液体发酵培养条件及部分化学成分进行了研究,主要包括以下内容:古尼虫草液体种子培养基及培养条件的筛选,发酵罐深层发酵生长曲线的测定,古尼虫草子座和古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii)ITS序列的分析,菌丝体多糖的分离纯化及结构测定,古尼虫草的碱溶性多糖、甘露醇的提取方法及含量研究,获得了如下结果: 1.优化筛选出了古尼虫草菌丝体最适液体种子培养基和最佳培养条件,培养基配方为:土豆汁20%、蛋白胨1%、葡萄糖2%、硫酸镁1‰、磷酸二氢钾0.5%0、磷酸氢二钾1‰;用三因素四水平的正交试验,获得其最佳培养条件:26℃,转速150 r/min,pH 6.5,时间以5d为宜。 2.测定了古尼虫草菌丝体发酵罐深层发酵的生长曲线,确定发酵周期以66h为宜,并根据其生长规律,将其分为四个典型生长时期:生长延迟期、对数生长期、稳定生长期及衰老期。 3.运用PCR技术研究了古尼虫草子座和菌丝体的完整的ITS区(ITS1+5.8S+ITS2),两者的PCR扩增产物电泳图谱及整个碱基序列完全一致,ITS1为207bp,5.8S为157 bp,ITS2为202 bp,可证明本文分离得到的古尼虫草菌丝体,确为古尼虫草的无性型古尼拟青霉;比较了古尼虫 草子座、菌丝与冬虫夏草的rrs序列,并认为它们具有较近的亲缘关系。 4.古尼虫草菌丝体经热水浸提、醇析、脱蛋白,得到粗多糖,再经 D王AE一52纤维素柱层析纯化得到纯多糖CG-1,经紫外光谱,柱层析等证 明其为单一成分,纸层析表明其单糖组分为葡萄糖,用高碘酸反应证明其 糖基是以(1。6)位糖若键型缩合,红外光谱结果显示CG-1具多糖特征 吸收峰,为Q一毗喃型葡聚糖。 5.用四因素三水平的正交试验确定了以35℃,加5倍量的0 75mol几 的NaOH溶液浸泡提取古尼虫草菌丝体sh,为碱溶性多糖的最适提取方 法,从每克菌丝体中提取的多糖最高可含41 .92mg。 6古尼虫草发酵菌丝体含有丰富的甘露醇,在每克干菌粉中含量为 60mg,每克古尼虫草子座中含量为61mg,每克僵虫体含量达105mg。


知网文化
【相似文献】
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 梁宗琦;刘爱英;董熙昌;李淑芳;;古尼虫草的应用价值评估[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第二卷)[C];1991年
2 雷帮星;康冀川;梁宗琦;税小波;谭艾娟;张倩;;古尼虫草镇痛组分研究[A];中国菌物学会2009学术年会论文摘要集[C];2009年
3 曾冬;郭力;周静波;王颖;陈佳江;邹一可;;虫草染色化学物质的初步研究[A];2008年成渝药学学术年会论文集[C];2008年
4 韩燕峰;梁宗琦;初华丽;刘爱英;;拟青霉Paecilomyces Bain.,一类值得关注的真菌资源[A];中国第六届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2004年
5 梁宗琦;;我国虫草属真菌研究开发的现状及思考[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
6 刘作易;梁宗琦;刘爱英;喻子牛;;虫草属真菌分子系统学研究[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(上册)[C];2002年
7 李春如;;近十年虫草无性型研究进展[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第五卷)[C];2003年
8 刘春秀;汪来发;朴春根;李永;田国忠;;拟青霉属真菌的系统分类及代谢产物应用研究进展[A];首届中国林业学术大会论文集[C];2005年
9 雷帮星;康冀川;何劲;文庭池;潘丽丽;;四种虫草菌丝体中腺苷和虫草菌素含量的研究[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
10 谷桓生;梁曼逸;赵国莉;赵玉明;;吉林省虫草种类调查初报[A];中国虫生真菌研究与应用[C];1991年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 刘作易;虫草属及其无性型关系研究[D];华中农业大学;1999年
2 肖建辉;虫草发酵及其代谢产物的分离与生物活性研究[D];华东理工大学;2010年
3 陈璐;名贵中药冬虫夏草特征性蛋白质成分与鉴定方法研究[D];成都中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 傅岚;古尼虫草液体深层发酵及化学成分的研究[D];湖南师范大学;2004年
2 孟祥贤;古尼虫草生物学特性及其生理活性物质的研究[D];湖南师范大学;2001年
3 李电;古尼虫草液体发酵和多糖提取及其抗肿瘤活性研究[D];吉林大学;2011年
4 梅德强;古尼虫草菌丝发酵工艺优化及其多糖对肿瘤细胞免疫抑制因子的影响[D];贵州大学;2006年
5 张永明;古尼虫草益智作用及其活性物质的相关性研究[D];贵州大学;2007年
6 章能胜;一株古尼拟青霉提取物清除自由基活性研究[D];安徽农业大学;2010年
7 陈晓琳;两种虫草无性型原生质体融合及蜂头虫草发酵条件的研究[D];安徽农业大学;2001年
8 吴海亮;几种虫草无性型及其相关真菌混合培养的研究[D];安徽农业大学;2009年
9 黄华玮;保护血管内皮细胞的食药用真菌粗提物筛选及对高糖损伤内皮的保护作用[D];福建医科大学;2012年
10 方士英;虫草多糖对实验性肝损伤的作用及部分作用机制研究[D];安徽医科大学;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978