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《湖南师范大学》 2008年
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苏云金芽胞杆菌4.0718菌株Cry1和Cry2蛋白高产发酵条件的优化

刘飞  
【摘要】: 为了提高苏云金芽胞杆菌4.0718菌株的杀虫晶体蛋白产量,首先采用Plackett-Burman设计筛选出发酵培养基中影响苏云金芽胞杆菌4.0718 Cry1和总晶体蛋白产量的显著性因子为黄豆饼粉和MnSO_4·H_2O,Cry2的产量在该配方中无显著性影响因子。然后利用最速上升实验逼近Cry1最大产出区域,找到后续试验中心点。最后通过中心组合设计和响应面优化得到最佳培养基配方为(g/L):淀粉12,葡萄糖10,豆饼粉11.5,蛋白胨2.5,K_2HPO_4 2.5,FeSO_4·7H_2O0.02,MnSO_4·H_2O 0.02,MgSO_4·7H_2O 0.25。使Cry1和Cry2产量分别达到0.32 mg/mL和0.11 mg/mL,比原优选配方产量提高了两倍多。该优化配方发酵液对棉铃虫的半致死浓度(LC_(50))为1.09μL/mL,杀虫活性比原优化配方(LC_(50)为3.10μL/mL)显著提高。 通过单因子优化实验,得到了优化培养基的最佳起始pH为8.0,消泡剂(豆油)的最佳添加量应小于1%。为提高培养密度,采用直接提高培养基初始浓度法,发现高底物浓度对芽孢和晶体蛋白的形成产生了抑制作用,而在调整C/N基础上增加部分碳氮源含量能达到提高晶体蛋白的产量的目的。优化补料高密度工艺,筛选到了最佳补料培养基组成为葡萄糖和牛肉膏粉,最佳补料工艺为:在10、12、14h,分三次,以2:1的碳氮比补加12g/L的营养物质。为开展发酵罐分批补料高密度培养奠定了基础。 通过单因子实验优化将培养基组成中碳氮源调整为葡萄糖18g/L和蛋白胨14.5g/L,优化出发酵最佳培养基配方。
【学位授予单位】:湖南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S476.1

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 常明;周顺桂;卢娜;倪晋仁;;污泥-废糖蜜联合发酵培养Bt生物杀虫剂[J];北京大学学报(自然科学版);2007年06期
2 褚以文;微生物培养基优化方法及其OPTI优化软件[J];国外医药(抗生素分册);1999年02期
3 刘森林,宗敏华,娄文勇;苏云金杆菌补料高密度培养的研究[J];工业微生物;2000年04期
4 高家合;;苏云金杆菌Bt33发酵条件优化及应用于烟草粉螟防治的研究[J];工业微生物;2006年03期
5 李世杰,方尚玲,刘华梅,王志林;苏云金杆菌深层发酵补料分批培养工艺研究[J];湖北农业科学;2001年01期
6 朱星华,潘舟,郝国防,何云松,蒋路,张海波;Bt中δ-内毒素含量与生物效价相互关系的实验分析[J];化工时刊;2002年03期
7 卢娜;周顺桂;常明;倪晋仁;;玉米浸泡液制备苏云金杆菌生物杀虫剂的影响因素研究[J];环境工程学报;2007年09期
8 常明;周顺桂;卢娜;倪晋仁;;微生物转化污泥制备苏云金杆菌生物杀虫剂[J];环境科学;2006年07期
9 刘子宇;李平兰;郑海涛;靳志强;;微生物高密度培养的研究进展[J];中国乳业;2005年12期
10 廖湘萍;易华蓉;杨翠珍;;苏云金芽孢杆菌液体发酵的研究[J];酿酒;2007年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张家学;苏云金芽胞杆菌BMB005的补料发酵工艺研究[D];华中农业大学;2004年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄银久;黄荣茂;金林红;陈卓;许瑞卿;;基因工程和发酵工程在植物源和微生物农药中的应用[J];安徽农业科学;2007年19期
2 苏永杰;李军;马学文;邓振山;;苏云金杆菌(B.t-7216菌株)噬菌体的活性测试[J];安徽农业科学;2009年26期
3 王书平;刘俊华;;发酵法生产谷氨酰胺研究综述[J];安徽农业科学;2009年31期
4 胡荣锁;杨劲松;杨瑞;徐飞;徐绍成;李开绵;叶剑秋;;虾青素果汁饮料的研究[J];安徽农业科学;2010年02期
5 郑颖洁;余勃;陆豫;;绿色木霉降解稻草秸杆产葡萄糖工艺优化研究[J];安徽农业科学;2010年13期
6 王鹤茹;刘燕舞;;Bt生物农药发酵研究进展[J];安徽农业科学;2010年19期
7 刘坤;郭威;胡雪芹;张洪斌;;响应曲面法优化苏云金芽孢杆菌B28培养基[J];安徽农业科学;2011年16期
8 鲍朋;陈宁;温廷益;;修饰的谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶对鸟苷产量的影响[J];安徽农业科学;2011年17期
9 崔凤杰;张天真;黄达明;孙文敬;钱静亚;;从生物转化液中分离提取11-α-羟基-坎利酮的工艺研究[J];安徽农业科学;2012年09期
10 黄莉娟;;高细胞密度发酵技术的研究进展[J];安徽农业科学;2012年14期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 马天良;谢幸珠;张覃华;孙祥明;;苏云金杆菌发酵动力学研究[A];杀虫微生物[C];1992年
2 梁凤来;任改新;赵钢;陈月华;钟辉;;中国Bt-ken-Ag菌株培养条件的研究[A];杀虫微生物[C];1992年
3 刘远东;尹益辉;;基于多目标优化的螺栓-法兰连接结构尺寸设计[A];结构及多学科优化工程应用与理论研讨会’2009(CSMO-2009)论文集[C];2009年
4 王哲;丁辉;李鑫钢;汤桂兰;顾春瑞;巩晓明;;用MIBK从废旧电子印刷线路板中提纯金的研究[A];2009全国可再生能源—生物质能利用技术研讨会论文集[C];2009年
5 潘洁茹;陈丽仙;黄天培;关雄;;荧光差异显示技术在Bt上的初步应用[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
6 常亚飞;陈守文;喻子牛;;苏云金素发酵培养基的优化[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
7 牛杰;褚福鹏;王龙花;宗周红;;基于响应面的嵩口大桥有限元模型修正研究[A];第21届全国结构工程学术会议论文集第Ⅱ册[C];2012年
8 刘远东;尹益辉;余绍蓉;;螺栓-法兰连接结构的多目标优化设计研究[A];四川省力学学会2008年学术大会论文集[C];2008年
9 余晓斌;郝学财;;优化纤维素酶液体发酵培养基[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年
10 查传勇;董法宝;杨悦;冀宪领;牟志美;;洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1产生抗菌活性物质的发酵培养基和发酵条件优化试验[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(3)[C];2009年
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1 陈云松;转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件优化及安全性评价[D];中国海洋大学;2010年
2 赵祺;冻土细菌新种和冰缘植物内生细菌新种的特征和多相分类学研究[D];兰州大学;2010年
3 孟凡涛;酒明串珠菌不对称合成手性醇及其反Prelog脱氢酶的酶学特性研究[D];江南大学;2010年
4 吴寒亮;芳纶纤维布约束混凝土短柱的尺寸效应研究与多尺度分析[D];北京交通大学;2010年
5 朱占平;带缝金属腔体、电子线路的微波耦合特性分析与基本电路的微波注入效应实验研究[D];国防科学技术大学;2011年
6 吴丹丹;苏云金芽胞杆菌YBT-1520热胁迫下的生理变化及差异蛋白质组研究[D];华中农业大学;2011年
7 周生飞;高效降解棉酚菌种筛选、降解机理及固体发酵工艺研究[D];甘肃农业大学;2011年
8 吴石林;球冠钹型换能器建模、仿真及优化设计研究[D];国防科学技术大学;2011年
9 王泽建;宏观和微观代谢分析相结合的系统生物过程研究—维生素B_(12)发酵过程优化[D];华东理工大学;2011年
10 何璐;苦参内生真菌抑菌物质纯化鉴定及作用机制研究[D];沈阳农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘乐乐;锰氧化细菌的筛选与芽胞杆菌WH_4发酵培养基的响应面法优化[D];华中农业大学;2010年
2 潘方;高产柚苷酶菌株的选育及发酵过程研究[D];安徽工程大学;2010年
3 郭文文;转基因番茄对土壤生物学性质及养分吸收的影响[D];山东农业大学;2010年
4 杨悦;桑树内生真菌菜豆壳球孢菌MOD-1产油脂发酵条件优化及利用淀粉厂废水的研究[D];山东农业大学;2010年
5 韩艳;基于支持向量机的发酵过程建模研究[D];大连理工大学;2010年
6 赵硕;耐高渗(高糖)酵母菌株的选育[D];安徽农业大学;2010年
7 刘伟;海洋小链霉菌DY2741菌株抗菌活性物质的初步研究[D];安徽农业大学;2010年
8 陈蕾;扣囊复膜酵母A11菌株淀粉酶的生产和酒精发酵的研究[D];中国海洋大学;2010年
9 祁永青;西宁地区硅酸盐细菌生物学特性及促生效应的研究[D];青海师范大学;2010年
10 李健;味精废水用于金针菇液体发酵培养的研究[D];长春工业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林同香,林益,林尾妹;苏云金杆菌和培养基氨基酸的比较分析[J];福建农业大学学报;1995年01期
2 秦建侯;邓勃;王小芹;;分析测试中的试验设计和优化方法——四、单纯形优化法[J];分析试验室;1986年01期
3 金玉来;苏云金杆菌7216菌株的摇瓶发酵试验[J];工业微生物;1994年03期
4 刘勇,张长铠,曹光宇,房敏;分批补料培养对L-异亮氨酸发酵的影响[J];工业微生物;2000年02期
5 刘森林,宗敏华,娄文勇;苏云金杆菌补料高密度培养的研究[J];工业微生物;2000年04期
6 陈守文,马昕,汪履绥,赵学慧;稻草酶法水解液的丙酮丁醇发酵[J];工业微生物;1998年04期
7 姚伟芳;弓爱君;邱丽娜;孙翠霞;;苏云金芽孢杆菌固态发酵条件的优化[J];化学与生物工程;2006年11期
8 喻子牛,代大生;7216杀虫菌高菌数发酵培养基的优选[J];湖北农业科学;1985年11期
9 丁秋梅,杨和文;优化溶解氧浓度提高苏云金杆菌发酵水平[J];湖北农业科学;1993年12期
10 李世杰,方尚玲,刘华梅,王志林;苏云金杆菌深层发酵补料分批培养工艺研究[J];湖北农业科学;2001年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 何进;几种微生物及其代谢产物的毛细管电泳方法研究[D];华中农业大学;2003年
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1 李建洪,万秋英,王沫,姜锡权,喻子牛;苏云金芽胞杆菌新菌株的研究[J];湖南农业大学学报;2000年05期
2 蔡启良,刘子铎,喻子牛;苏云金芽胞杆菌生物活性成分研究进展[J];应用与环境生物学报;2003年02期
3 姚宝安,钟勤,王乾兰,赵俊龙,马丽华,喻子牛;对捻转血矛线虫幼虫有杀灭作用的苏云金芽胞杆菌的筛选[J];华中农业大学学报;1995年02期
4 喻子牛,孙明,陈亚华,刘子锋,喻凌,罗曦霞,戴经元;苏云金芽胞杆菌生物活性蛋白基因在动、植物病虫害防治中的应用(综述)[J];农业生物技术学报;1995年02期
5 王清锋,喻子牛;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1E的改造[J];华中农业大学学报;1998年05期
6 孙明,刘子铎,喻子牛;苏云金芽胞杆菌YBT-1520杀虫晶体蛋白基因的属性[J];微生物学报;2000年04期
7 刘刚;;湖南师大“苏云金芽胞杆菌杀虫伴胞晶体蛋白质组学研究”取得重要成果[J];农药市场信息;2009年12期
8 姚宝安;王祥;夏雪山;赵俊龙;马丽华;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌晶体蛋白对羊捻转血矛线虫成虫的作用[J];中国农业大学学报;1998年S2期
9 姚江,田广,喻子牛;苏云金芽胞杆菌Ly30株最适发酵培养基配比的初步研究[J];连云港师范高等专科学校学报;1999年04期
10 周琴,孙明,李林,杨在清,喻子牛;苏云金芽胞杆菌标记重组菌株的构建与杀虫基因水平转移[J];应用生态学报;2005年01期
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1 喻子牛;孟盈;孙明;何进;李明顺;郑世学;;苏云金芽胞杆菌新基因资源的发掘策略[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年
2 周帼萍;闫建平;郑大胜;周晓慧;袁志明;;苏云金芽胞杆菌在食品中分布及来源分析[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
3 张春鸽;束长龙;高继国;宋福平;张杰;;高通量测序在苏云金芽胞杆菌基因发掘中的运用[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 何晓明;刘晓垒;陆琼;束长龙;张永军;张杰;宋福平;;苏云金芽胞杆菌中新型vip3基因的克隆与活性分析[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
5 喻子牛;孙明;刘子铎;戴经元;陈亚华;;苏云金芽胞杆菌Cry基因命名十年的进展[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
6 乐超银;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌广谱、遗传稳定工程菌的构建[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
7 刘小锦;朱晨光;王莉;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌AiiA蛋白的活性[A];廿一世纪微生物学发展前沿与应用新技术研讨会论文摘要集[C];2003年
8 孙明;;苏云金芽胞杆菌YBT-1520的功能组分析[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
9 张剑冰;罗朝来;喻子牛;;2.4-D诱导苏云金芽胞杆菌CT-43菌株进入小麦细胞的初步研究[A];杀虫微生物[C];1992年
10 谭芙蓉;唐雪明;;四川生态区苏云金芽胞杆菌资源的筛选鉴定及其新型杀虫基因的克隆表达研究[A];第二届上海市植物生理学青年学术研讨会论文摘要集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 本报记者 李徽;技改创新独领风骚[N];宁夏日报;2010年
2 林敏 张木;我国农业重组微生物技术产业化现状[N];科技日报;2002年
3 李晓云;农科中心的留美博士[N];人民政协报;2005年
4 谈海亮 金安江;“转基因抗虫水稻品种培育”在华中农大启动[N];农民日报;2009年
5 上海农科热线供稿;应对转基因水稻严格进行安全性评价[N];东方城乡报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘子铎;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白和辅助蛋白基因的克隆表达[D];华中农业大学;1999年
2 李林;苏云金芽胞杆菌高频转化系统的建立及其性能[D];华中农业大学;1999年
3 鲁松清;苏云金芽胞杆菌对鳞翅目昆虫广谱高毒基因工程菌的构建[D];华中农业大学;1999年
4 周琴;绿色荧光蛋白基因在苏云金芽胞杆菌中的表达与应用[D];华中农业大学;2004年
5 张琼;苏云金芽胞杆菌蛋白Aii及其对植物病原菌致病性的影响[D];华中农业大学;2001年
6 张利莉;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白cry1D的表达调控[D];华中农业大学;2000年
7 邵宗泽;苏云金芽胞杆菌帮助蛋白对杀虫晶体蛋白表达的影响[D];华中农业大学;2000年
8 吴岚;苏云金芽胞杆菌解离载体的构建及其特性[D];华中农业大学;2000年
9 周学永;苏云金芽胞杆菌喷雾干燥工艺和杀虫蛋白纳米材料吸附剂型的研究[D];华中农业大学;2004年
10 朱晨光;苏云金芽胞杆菌抗病杀虫和广谱工程菌的构建[D];华中农业大学;2004年
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1 向雪梅;纳米材料—苏云金芽胞杆菌原粉复合物杀虫剂杀虫效果的初步研究[D];华中农业大学;2014年
2 苏俊平;苏云金芽胞杆菌的分离鉴定及高毒力菌株的研究[D];河北农业大学;2012年
3 张喆;苏云金芽胞杆菌赖氨酸代谢基因簇表达与调控的研究[D];中国农业科学院;2014年
4 逯晋忠;苏云金芽胞杆菌对云斑天牛的抗性研究[D];华中农业大学;2010年
5 舒正玉;重组苏云金芽胞杆菌WG-001环境安全性分析[D];华中农业大学;2003年
6 齐明霞;苏云金芽胞杆菌转录调控因子CodY的调控研究[D];华中农业大学;2014年
7 王忠勇;一株杀线虫苏云金芽胞杆菌的分离鉴定及其ICPs基因的克隆[D];湖南农业大学;2013年
8 邵志会;苏云金芽胞杆菌的分批发酵动力学[D];华中农业大学;2004年
9 郎晓磊;肠道菌对苏云金芽胞杆菌家蚕杀虫活性的作用[D];华中农业大学;2010年
10 葛东华;苏云金芽胞杆菌MB-15菌株特性及其可湿性粉剂的研究[D];河北农业大学;2012年
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