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植物悬浮培养细胞对青蒿酸和二氢青蒿酸生物转化的研究

唐煜  
【摘要】:本文利用转基因西洋参冠瘿组织和黄花蒿悬浮培养细胞两种培养体系分别对青蒿酸(QS)和二氢青蒿酸(QQS)进行了生物转化研究。在本研究组利用植物悬浮培养体系成功对青蒿酸(QS)进行了生物转化的研究基础上,改变实验条件,首次选择西洋参冠瘿瘤悬浮培养细胞在30%(v/v)浓度双氧水作用影响下考察其对底物青蒿酸进行转化的能力情况。通过化学提取和色谱柱层析分离等手段分离纯化得到了一个首次报道的新化合物15-羟基青蒿酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(GQS-5)。在黄花蒿悬浮培养细胞培养体系中,二氢青蒿酸发生了羟基化反应,得到一对区域特异性的羟基化产物:3-α-羟基二氢青蒿酸(Ⅱa)和3-β-羟基二氢青蒿酸(Ⅱb)。实验结果表明植物悬浮培养体系对青蒿酸和二氢青蒿酸转化具有羟基化和糖基化等能力。 此外,本文还通过绘制时效曲线来阐明在共培养时间变化的影响下,培养体系的转化能力与产物的生成情况。在冠瘿组织转化体系中,转化产物GQS-5主要存在于培养物中,共培养2d后在转化体系中的最高产率可达18.3%。而在黄花蒿培养体系中,两个羟基化转化产物的最佳共培养时间均为1 d,总的摩尔转化率最高分别为2.6%(Ⅱa)和15.7%(Ⅱb)。


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