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《暨南大学》 2011年
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应激负荷诱发小鼠抗流感病毒能力低下与营养型鸡精的改善作用

王聪智  
【摘要】:实验目的:本实验采用应激负荷模型诱发小鼠抗病毒能力低下,并在此基础上研究营养型鸡精对小鼠抗流感病毒能力的影响,并探讨其可能的作用机理,旨在揭示营养型鸡精对人体健康作用的科学内涵。 实验方法:(1)应激负荷对小鼠抗病毒能力的影响:将小鼠随机分为A组(正常对照组),B组(病毒组),C组(拘束+病毒感染组),D组(病毒感染+拘束组)共4组,每组10只动物。除正常对照组外,C组(拘束+病毒感染组)于第1 d将小鼠置于通风良好的50 mL尖底聚丙烯塑料离心管中拘束18 h(16:00-10:00),拘束期间小鼠不给予正常进食进水,其他组小鼠为非拘束禁食禁水小鼠。小鼠拘束恢复24 h以内,除正常组外其他各组用乙醚轻度麻醉小鼠,以3×LD50(半数致死量)的流感病毒液经鼻感染小鼠(30μL/只),正常组以生理盐水滴鼻作为对照。D组(病毒感染+拘束组)于病毒感染后,拘束置于通风良好的50 mL尖底聚丙烯塑料离心管中拘束18 h(16:00-10:00),拘束期间小鼠不给予正常进食进水,其他组小鼠为非拘束禁食禁水小鼠。从感染病毒当天开始连续21天记录各组小鼠的死亡数目及死亡小鼠的平均存活时间(MDD)。测定小鼠的体重以及各项免疫指标(肺脏指数,脾脏指数,脾脏淋巴细胞总数,脾脏淋巴细胞亚群的分布)。 (2)营养型鸡精对小鼠抗流感病毒能力的影响:将小鼠随机分为正常对照组、病毒组、模型组(拘束+病毒)、阳性药物(利巴韦林,50 mg·kg-1)组、EC低剂量组(12mL·kg-1), EC高剂量组(24 mL·kg-1),每组10只。实验组每天给药1次,连续给药10 d。除正常对照组及病毒组外,其余各组在给药的第2d将小鼠置于通风良好的50 mL尖底聚丙烯塑料离心管中拘束18 h(16:00-10:00)。小鼠拘束恢复1天后,除正常组外其他各组用乙醚轻度麻醉小鼠,以3×LD50(半数致死量)的流感病毒液经鼻感染小鼠(30μL/只),正常组以生理盐水滴鼻作为对照。从感染病毒当天开始连续21天记录各组小鼠的死亡数目及死亡小鼠的平均存活时间(MDD)。给予营养型鸡精10 d灌胃后,测定小鼠的免疫功能。评价营养型鸡精对小鼠免疫功能的调节作用。实验首先通过检测拘束应激对流感病毒感染小鼠死亡率以及体重的影响;从脾脏指数,肺脏指数,脾脏淋巴细胞总数,脾脏淋巴细胞亚群的分布以及NK细胞活性的变化来评价鸡精对小鼠免疫功能的影响;我们还从基因水平检测NP,MP,INF-γ,IL-12,IL-18的表达的影响。 实验结果:(1)与病毒组相比,C组(拘束+病毒感染组)和D组(病毒感染+拘束组)小鼠的体重明显下降,小鼠的死亡率明显上升,肺脏指数显著增加,脾脏淋巴细胞总数下降,降低小鼠脾脏Th(CD3+CD4+)(辅助性T淋巴细胞)亚群百分率和降低Ts(CD3+CD8+)(抑制性T淋巴细胞)亚群百分率。 (2)应激负荷降低小鼠的平均生存时间(MDD),提高小鼠的死亡率。EC-L(营养型鸡精低剂量)和EC-H(营养型鸡精高剂量)能够显著降低肺脏指数,增加脾脏指数和脾脏淋巴细胞总数;EC-L和EC-H明显升高拘束小鼠脾脏Th(CD3+CD4+)(辅助性T淋巴细胞)亚群百分率和降低Ts(CD3+CD8+)(抑制性T淋巴细胞)亚群百分率,使小鼠脾脏T淋巴细胞中的Th/Ts比值升高,使应激小鼠的脾脏免疫细胞亚群比值趋向正常状态从而提高小鼠的抗流感病毒能力;EC-L和EC-H明显提高小鼠的脾脏NK细胞活性,提高小鼠的在病毒感染早期的抗流感病毒能力。EC抑制病毒基因NP,MP基因的表达;同时,EC显著提高炎症因子INF-γ,IL-12,IL-18的表达,提高其吞噬流感病毒的能力。 结论:EC有明显的抗应激负荷作用,能够提高应激负荷小鼠的免疫力从而提高机体的抗流感病毒能力,起到免疫保护的作用。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R151.3

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