收藏本站
《暨南大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Cdc20基因突变与小鼠结肠癌的发展

冯聚玲  
【摘要】:目的:探索cdc20基因突变对结肠癌发展的影响,并初步阐明其分子机制。 方法:应用同源重组技术进行载体打靶,构建了cdc20条件性敲除及点突变相结合的载体,并将构建好的载体,经囊胚注射构建cdc20loxp/+基因敲除小鼠。将cdc20loxp/+基因突变小鼠与APCmin/+基因突变小鼠交配,运用PCR进行基因鉴定,得到cdc20loxp/+; APCmin/+基因型小鼠作为实验组,余基因型小鼠作为对照组。通过表型分析及组织学分析,比较实验组及对照组的差异并探求其分子机制。制作cdc20loxp/+; APCmin/+基因型、cdc20loxp/+基因型、APCmin/+基因型和WT基因型的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs),绘制生长曲线比较各种基因型MEFs生长情况。各种基因型MEFs细胞滴片计数染色体个数,并检测有丝分裂姐妹染色单体分离情况及是否存在非整倍体(aneuploid)。构建PMXs-E1A-RAS病毒载体,将其转染入各种基因型MEFs细胞,进行克隆形成实验,阐明cdc20基因是否具有加快细胞转化的能力。通过上述体外细胞实验进一步证实并揭示cdc20对结肠癌发展的影响及其分子机制。 结果:表型分析显示cdc20loxp/+APCmin/+基因突变小鼠肿瘤个数与对照组无明显差异,肿瘤的最大直径实验组和对照组之间无明显差异。病理切片显示,cdc20loxp/+APCmin/+基因突变小鼠肿瘤恶性程度高,病理类型为腺癌,而对照组为腺瘤。各种基因型MEFs生长曲线显示APCmin/+-Cdc20loxp/+MEFs增殖速度要快于其他基因型的MEFs。克隆形成实验显示,转染了PMXs-E1A-RAS质粒的4种基因型MEFs中,APCmin/+-Cdc20loxp/+MEFs发生转化的速度要快于其他组。MEFs细胞滴片计数染色体显示APCmin/+-Cdc20loxp/+小鼠MEFs中可见姐妹染色单体的提前分离,且染色体数目异常要多于APCmin/+MEFs,大多数为38对。 结论:(1)Cdc20基因一条同源臂的敲除可促进小鼠结肠癌的发展。(2) APCmin/+-Cdc20loxp/+基因型小鼠MEFs中存在姐妹染色单体的提早分离及大量aneuploidy。(3) APCmin/+-Cdc20loxp/基因型小鼠MEFs可发生细胞转化,Cdc20基因突变有致癌作用。(4)Cdc20是通过基因不稳定来影响结肠癌的发展的。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R735.35

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙利波;付双林;罗毅男;陈儇;李文臣;葛鹏飞;;Aurora-B在胶质瘤中的表达及其意义[J];南方医科大学学报;2009年01期
2 王文睿;杨胜生;林金祥;曾志勇;刘道明;刘洪涛;;非小细胞肺癌中Aurora-B的表达及其临床意义[J];南方医科大学学报;2009年09期
3 王晓霞;樊飞跃;詹启敏;;有丝分裂激酶Aurora-A活性调节的分子机制[J];医学分子生物学杂志;2005年06期
4 钟亚莉,童彤,杨观瑞,詹启敏;Aurora-A在细胞中的功能以及与肿瘤的关系[J];国外医学.遗传学分册;2005年05期
5 陈聪琴;范艳华;吕文文;赵庆春;;抗肿瘤新靶点——极光激酶及其小分子抑制剂研究进展[J];国际药学研究杂志;2013年01期
6 陈亮;方习武;;Aurora-A与膀胱癌发病关系的研究现状[J];蚌埠医学院学报;2013年03期
7 林凛;林国武;;Aurora激酶及其抑制剂的研究进展[J];海峡药学;2010年09期
8 滑芳;张红真;房桂英;孟亚丽;刘晶;高庆红;葛静;;RNA干扰Aurora A表达对人子宫内膜癌细胞的生长与细胞周期的影响[J];河北医药;2008年07期
9 杨锐;韩葳葳;王嵩;;极光激酶A抗癌抑制剂的高通量筛选及对接研究[J];化学学报;2011年12期
10 赵凤艳;屈艺;张林;母得志;黄翔;魏大鹏;;Aurora A表达对人前列腺癌细胞生物学行为的影响[J];四川大学学报(医学版);2007年02期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 晏杰;Aurora B对Bacp/Nlp的磷酸化调控及其参与胞质分裂的机制研究[D];北京协和医学院;2009年
2 邹丽娟;Aurora-A激酶在不同类型肺癌中的表达研究[D];大连医科大学;2005年
3 张悦;细胞有丝分裂调节激酶Aurora-A的自身活性调节与作用模式的研究[D];复旦大学;2005年
4 崔建国;辐射致癌相关蛋白质筛选及其表达研究[D];第二军医大学;2006年
5 高华;BACP在细胞基因组稳定性中的作用研究[D];中国协和医科大学;2006年
6 王苏荣;Aurora-A在卵巢癌中的表达及端粒酶活性的关系[D];山东大学;2006年
7 薛宇;蛋白质翻译后修饰和细胞信号通路的生物信息学[D];中国科学技术大学;2006年
8 张智弘;携带BRCA杂合性突变的卵巢表面上皮细胞BTAK的表达和卵巢癌发生机制的研究[D];南京医科大学;2007年
9 秦丽莉;Aurora-A高表达抑制Cyclin B1泛素化降解诱导其表达上调及在肿瘤发生发展中的作用[D];中国协和医科大学;2008年
10 冯彦斌;PLK1在食管鳞状细胞癌中的表达变化及其作用机制研究[D];中国协和医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 严化龙;乳腺癌细胞中BMP信号通路对有丝分裂监测点基因的调控[D];兰州大学;2011年
2 孙萍;Nlp、Aurora-A在宫颈脱落细胞中的表达及其与HPV感染的相关性[D];北京协和医学院;2011年
3 武继琳;Aurora-B和Survivin在卵巢恶性上皮性肿瘤中的表达和意义[D];郑州大学;2011年
4 钟亚莉;Aurora-A在食管鳞癌组织中的表达及其对细胞生物学性状的影响[D];郑州大学;2005年
5 崔红;喉鳞状细胞癌与STK15基因蛋白表达的关系[D];青岛大学;2006年
6 武文;Aurora A表达与人前列腺癌细胞增殖侵袭及对紫杉醇敏感性的研究[D];四川大学;2007年
7 高志波;Aurora-A蛋白在星形细胞瘤中的表达及其与临床病理特征之间的关系[D];安徽医科大学;2008年
8 丛斌;Spindlin 1定位与功能的关键位点分析及鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
9 高佳;苯并(a)芘对宣威女性肺腺癌细胞中Aurora-A蛋白表达影响的研究[D];昆明医学院;2008年
10 徐一鸣;中心体微管蛋白-α、γ及ki-67在宫颈上皮内瘤变及宫颈浸润癌中的表达及意义[D];华中科技大学;2007年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张杰;姚明;闫明霞;徐冰;刘蕾;孔韩卫;罗玉柱;;小鼠结肠癌高转移模型体内筛选和建立[J];实验动物与比较医学;2006年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 郝京生;逆转录病毒介导的小鼠白细胞介素-23抗肿瘤效应及其机理研究[D];河北医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 周丹旎;NDV7793对小鼠结肠癌肝转移的抑制作用[D];广西医科大学;2014年
2 李雄兵;卡介苗联合DC-CIK细胞抑制BALB/c小鼠结肠癌肝转移的研究[D];广西医科大学;2014年
3 田园;艰难梭菌毒素A诱导小鼠结肠癌细胞CT26发生免疫原性凋亡的研究[D];华南理工大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026